Hepatiidi serodiagnostika

Share Tweet Pin it

Jäta kommentaar 1,079

Hepatiidi viiruse kindlakstegemiseks, et saada teavet haiguse päritolu kohta, viiakse läbi haigusseisundi ja esinemise põhjused, hepatiidi C, b, a serodiagnostika. Seroloogiliste markerite identifitseerimine võimaldab teil diagnoosi teha ja õigesti ravida. Markeriteks on viirusvalgud, spetsiifilised antikehad, mille organism toodab infektsiooni ja viiruse nukleiinhapete vastusena.

Mis see on?

Serodiagnosis - haiguste etioloogia tuvastamine, tuvastades veres antikehad. Seroloogilised markerid on hiline diagnostika, sest reaktsioonid on võimalikud 10-12 päeva pärast haiguse algust. Serodiagnostilised uuringud viiakse läbi järgmiselt:

  • diagnoosida haigus - määrata antikehade olemasolu veres standardsete antigeenide abil;
  • identifitseerima patogeeni - tundmatu antigeeni tuvastamiseks.

Seradiagnostika tarbeks: bakterirakud; plasmakudesid ja lümfotsüüte, kasvajaid ja haigeid rakke; lahustuvad koostisosad. On olemas 6 rühma seroloogilisi reaktsioone:

  1. Reaktsioonid, mis ilmnevad Ag-osakeste laienemisega.
  2. Täiendavad siduvad reaktsioone ja immuunsüsteemi hemolüüsi.
  3. Immunofluorestsentsi reaktsioon.
  4. Neutraliseerimise vastased reaktsioonid
  5. Reaktsioon fagotsütoosiga.
  6. Immuunsorbendi analüüsi reaktsioonid antigeenide ja antikehade abil.
Tagasi sisukorra juurde

Mida analüüs näitab?

Patsientidele määratud seroodiagnostika läbiviimine, kui mingil põhjusel haigust ei ole võimalik diagnoosida. Analüüs tuvastab patogeeni tüübi ja aitab diagnoosida. Serodiagnostika võimaldab teil valida parima ravivõimaluse. Testimise sümptomid: ebamõistlik nõrkuse, nõrkuse, iivelduse, väljaheidete ja uriini värvuse muutus, kollane nahk. Õigeaegne seroodiagnostika kinnitab või eitab infektsiooni ja määrab haiguse staadiumi.

Seradiagnostika tunnused ja hepatiidi tüüp

Iga viiruse kest on oma valkude komplekt. Ja valku moodustavad aminohapped loetakse teatud tüüpi koodeksiks. See kood on serodiagnostika marker. Hepatiit A markerid on anti-HAV IgM ja IgG. B-hepatiidi markerid - HBcAg, HBsAg, HBeAg. Viiruse markerid C - HBCAg. Viiruse A serodiagnoosimiseks kasutatakse järgnevaid näiteid: IEM (immunoelektronmikroskoopia), CSC (komplemendi sidumine), RIA (märgistatud Anti ja Ag), REMA (antikeha ensüümi reaktsioon). Viiruse B serodiagnostika kasutab RIA, REMA, RPG (sadestamine geelil) ja RIGA (kaudne hemaglutinatsioon). RIGA kasutab erütrotsüüte, mis on laaditud HBsAg-iga. Hepatiit C serodiagnoosimiseks kasutati ensüümi immuunanalüüsi.

Hepatiit A markerid

Hepatiit A uuringu eesmärgiks on määrata IgM ja IgG. Need näitajad ilmuvad veres niipea, kui suureneb seerumi ensüümide tase. Anti-HAV IgM - näitaja hepatiidi viiruse antikehade M taseme kohta. Pärast nakatumist kasvab indikaator ja kuni esimesed sümptomid ilmuvad, näitab vereanalüüs positiivset tulemust. Anti-HAV IgG - see klass määratakse 10 nädalat pärast kehasse nakatumist. Näitaja jääb pärast taastumist kõige sagedamini kõrgeks, see näitab, et A-tüüpi viiruse immuunsuse tekkimise protsess algab.

HBsAg markeri abil saab B-hepatiiti avastada varases staadiumis, antigeen ilmneb 27-41 päeva jooksul pärast organismi nakatumist.

Hepatiit B markerid

Uuringu eesmärgiks on identifitseerida antigeene ja antikehi. Serodiagnosis võimaldab teil teha diagnoosi ja ennustada haiguse tagajärgi. Iga etapi puhul tuvastatakse teine ​​HBV marker. Inkubatsiooniperioodi jooksul säilitatakse antigeen veres 2 kuni 5 kuud. Infektsiooni indikaatoriks on HB-de ja HB-de samaaegne määramine. Taastumise alguses kaovad HBc ja HBe verest, tekib anti-HBc, kõikidesse antigeenivastastesse antikehadesse tuvastatakse veres. HbsAg esinemine viitab infektsioonile, kui antigeen on veres enam kui kuus kuud, siis haigus on kroonilises faasis. HbsAg-vastane antikeha näitab, et organismis on tekkinud antikehad ja immuunsüsteem võitleb aktiivselt viirusega. HbsAg tuvastatakse mõne aja pärast taastumist. Anti-HbcAg tuvastatakse sümptomitega ja jätkub kogu perioodi vältel.

Laboratoorsete uuringute käigus tuvastatakse kaks antikehade klassi: IgM - sünteesitakse varases staadiumis ja see on viirus hiljutise infektsiooni või viiruse kõrge aktiivsuse kohta. IgG - moodustub 2-3 kuud pärast nakatumist, annab immuunsuse. HbeAg indikaator näitab infektsiooni aktiivsust. Patsientidel, kellel on veres antigeene, on viiruse edasikandmine ohtlik, nii tuleb ettevaatlik olla. Anti-HbeAg tuvastamisel hakkab immuunsus tekkima.

Hepatiit C markerid

C-hepatiidi viirus kordub inaktiivselt, seega on infektsiooni diagnoosimisel raskusi. Ainus viis C-viiruse tuvastamiseks on RNA tuvastamine. Selle määramine viiakse läbi ensüümi immuunanalüüsiga, määrates anti-HCV koguse. Antikehad tuvastatakse 4-6 nädala jooksul pärast viiruse sisestamist verd. Selle aja jooksul algab IgM moodustumine ja ringlus. Pärast 3 kuud algab IgG süntees. IgM pikaajaline tuvastamine näitab viiruse aktiivsust ja haiguse kroonilist staadiumi. Kroonilises vormis näitab IgM tuvastamine maksakahjustust. Ensüümimmunoanalüüsi tulemus ei ole diagnoosi aluseks, seda meetodit kasutatakse sõelkatsena kroonilise vormi tuvastamiseks. Olles leidnud HCV antikehade ja C-hepatiidi kahtluse korral, tuleb läbi viia terviklik laboriuuring.

Seradiagnostika ensüümi immunoloogiline analüüs võib avastada hepatiidi C antikehasid 95% ulatuses kroonilise vormi juhtudest, ägedas vormis on meetodi täpsus 50-70%.

Seradiagnostikal puudub 100% spetsiifilisus ja tundlikkus viirusliku hepatiidi diagnoosimisel. Seetõttu tuleb tulemuste hindamisel arvesse võtta sümptomeid ja kasutada tulemusi kinnitava diagnoosi mitmesuguseid katseid. Seroloogiliste uuringute tulemuste hindamisel tuleks arvestada haiguse ajalugu, teavet varasemate haiguste ja vaktsineerimise kohta ning võimalikku kokkupuudet nakkusallikaga.

Seroloogilised meetodid viirushepatiidi C diagnoosimiseks

C-hepatiidi viirus põhjustab peamiselt maksa funktsioonihäireid, mistõttu haigus on omandanud oma nime: hepara - maks, see - põletik. Viiruse leviku aluseks on selle parenteraalne edastamise viis. See tähendab, et infektsioon toimub vere kaudu (süstimise, vereülekande, maniküüri ja tätoveeringu salongi ajal, st manipuleerimisel töötlemata vahenditega) ja seksuaalse kontakti kaudu.

Hepatoloogide nõuanne

2012. aastal tekkis C-hepatiidi ravis läbimurre. Uued otsese toimega viirusevastased ravimid töötati välja, mis 97% tõenäosusega vabastab teid täielikult haigusest. Nüüdsest peetakse hepatiit C ametlikuks ravikeskkonnas täielikult ravitavaks haiguseks. Venemaa Föderatsioonis ja SRÜ riikides on ravimid esindatud sofosbuviiri, daclatsviri ja ledipasviiriga. Praegu on turul palju võltsinguid. Hea kvaliteediga ravimeid saab osta ainult litsentseeritud ettevõtetelt ja asjakohastest dokumentidest.
Minge ametliku tarnija veebilehele >>

Viiruse hepatiit C nimetatakse ka "õrnaks tapjuseks". See on tingitud selle kerge käigu, sujuva äge perioodi ja tendents kroonika (30-70%). Umbes kolmandik C-hepatiidi patsientidest tekitab maksatsirroosi ja suureneb kartsinoomi tekkimise oht.

C-hepatiidi viirus koosneb üheahelalisest ribonukleiinhappemolekulist ja kuulub flaviviiruste perekonda. Seda ei saa avastada elektronmikroskoobi abil, see probleem tuleneb viiruse madalast kontsentratsioonist veres. Hepatiit C viirus tuvastatakse ja kirjeldatakse laboriuuringute meetodite abil.

Viiruse ribonukleiinhappe ahel hõlmab ligikaudu kümme tuhat nukleotiidi. Leiti ka kolm struktuurvalku, mis kuuluvad C-hepatiidi viiruse hulka:

  • pinnalaba E;
  • membraanivalk M;
  • struktuurset valku C;

Nende valkude poolt toodetud antikehad on spetsiifilised markerid, mida kasutatakse viirushepatiidi C diagnoosimiseks.

Nendel valkudel on sarnased antigeensed omadused, mille tulemusena saadakse kõigi kolme valgu biogeense markeri agregaat. See marker on anti-HCV-core-Ig.

Lisaks ülaltoodule on lisaks uute RNA-ahelate sünteesi kaasatud mittestruktuursete valkude rühma.

Diagnostika- ja kontrollimeetodid

Maks on rekordaja, mis vastab erinevate ülesannete täitmisele. Viiruslik hepatiit, mis häirib maksa normaalset toimet, stimuleerib peaaegu kõigi normaalse kehavigastuse laboratoorsete omaduste rikkumist.

Paljud neist muudatustest on mittespetsiifilised, st selline seisund võib näidata teiste haiguste esinemist.

Samuti esineb viiruse hepatiidi iseärasusi omavaid märke. Seega põhjustab hepatotsüütide massiline tsütolüüs veres rohkem maksaensüümide vabanemist.

Tegelikult on maksakahjustuse ulatuse hindamisel kõige olulisem määrata alaniini aminotransferaasi (AlAt) ja aspartaataminotransferaasi (AsAt) kontsentratsiooni tase.

Hiljuti lugesin artiklit, milles räägitakse uimastite kompleksi "SOFOSBUVIR" kasutamisest DAKLATASVIR "hepatiit C raviks. Selle kompleksi abil saate alati HEPATITIS C. vabaneda.

Mind ei kasutanud mingit teavet usaldades, kuid otsustasin seda kontrollida ja tellida. Need ravimid ei ole odavad, kuid elu on kallim! Ma ei tundnud vastuvõtust kõrvaltoimeid, ma juba arvasin, et kõik oli asjatu, kuid kuu aega hiljem läbisin testid ja PCR-i ei tuvastatud, seda ei tuvastatud pärast kuut ravi. Dramaatiliselt paranenud meeleolu oli taas soov elada ja nautida elu! Ma võttis ravimeid 3 kuud ja selle tulemuseks oli viirus. Proovige seda ja teie, ja kui keegi huvitab, siis link allolevale artiklile.

Viirusliku hepatiidi korral on nende ensüümide tase kümneid kordi tõusnud, AlAT ületab AsAT-i. Aminotransferaaside tase tõuseb isegi enne sümptomite tekkimist, seetõttu on AlAT ja AsATi taseme määramine väga oluline maksahaiguste diagnoosimeetod.

Samuti tuleks mainida bilirubiini metabolismi rikkumist. Kollakas on naha rakkudes vaba bilirubiini sadestumise tagajärg, mis võib lisaks värvumisele põhjustada ka sügelust.

Suure hulga urobilinogeeni vabanemise tõttu võib muutuda uriini värvus (tume õlle värv).

Kroonilise raja korral on oluline diagnostiline meetod biopsia läbiviimiseks järgneva histoloogilise analüüsi abil. See uurimismeetod võimaldab hinnata maksa rakkude kahjustuse taset ja ulatust.

Haiguse uuringu markerid

Tsirkuleerivate vereringesüsteemide väga väikese kontsentratsiooni tõttu ei ole C-hepatiidi viirus otseselt veres tuvastatav. Seetõttu uuritakse konkreetseid markereid, mis lihtsustavad diagnoosi.

Antikehad Uurimismeetodina kasutatakse peamiselt immunoensüümide analüüsi. Seda meetodit kasutatakse M- ja G-rühmade (anti-HCV) või anti-HCV IgG rühmade üldiste spetsiifiliste immunoglobuliinide määramiseks.

Samuti on võimalik kasutada immunoblotmeetodit kvalifitseerivaks testiks. Selle haiguse faasi selgitamiseks kasutatakse spetsiifilisi analüüsimeetodeid, mida kasutatakse spetsiifiliste viiruse struktuurvalkude antikehade ja anti-NS-IgG (spetsiifiliste immuunglobuliinide vastu, mis on toodetud mittestruktuursete valkude vastu) identifitseerimiseks. Klassikalise haiguse kulgu tuvastatakse HCV-vastane antikeha taastumisperioodil (4-9 kuud pärast nakatamist).

Kuid mõnedes variantides avastati antikehad varem (2-4 nädalat) ja mõnikord palju hiljem (üks aasta pärast nakatamist). Võttes arvesse asjaolu, et viirushepatiidil on krooniline kurk, võib antikehi tuvastada pika aja jooksul. Hilisem serokonversioon on sageli valesti dekodeeritav, kuna spetsiifilisi antikehi ei pruugi veel areneda ja vere on juba nakatunud.

HCV-RNA tuvastamine. HCV-RNA ahel tuvastatakse veres või maksa biopsia abil, kasutades selle jaoks polümeraasi ahelreaktsiooni. Teoreetilisel tasemel võimaldab PCR-i vastuvõtlikkus määrata proovis ühe viiruse osakese.

Tänapäeval võimaldab tehnoloogiaarenduse tase PCR-i abil mitte ainult tuvastada C-hepatiidi viiruse esinemist, vaid ka seda tüüpi dešifreerida, valides kõige tõhusama ravimeetodi.sisu ↑

Haigusperioodid ja laboriuuringute tulemused

Inkubatsiooniaeg kestab tavaliselt 6-8 nädalat. (2-4 nädalat kuni kuus kuud ja kauem). Selle perioodi jooksul registreeritakse aminotransferaaside kasvu esimene piik. Immunoglobuliinide süntees algab 15-20 nädala pärast haiguse algust. M klassi spetsiifilised immunoglobuliinid avastati kuu varem kui klassi G antikehad. Tänu PCR-le võib RNA-HCV-d tuvastada juba haiguse esimestel nädalatel.

Ägeda perioodi märgid:

  • kontrollpunkti olemasolu vastavalt anamneesile;
  • klassi M spetsiifiliste antikehade avastamine ja nende tiiteri suurenemine aja jooksul;
  • äsja diagnoositud äge hepatiit;
  • aminotransferaaside sisalduse suurenemine;
  • HCV-RNA loomine.

Prognoosiga viirushepatiidi C käigus ilmnevad nähud:

  • M-klassi antikehade kontsentratsiooni varane vähenemine;
  • ajalooline äge lugu;
  • kaebuste puudumine;
  • HVC-RNA stabiilne puudumine;
  • struktuursete valkude spetsiifiliste antikehade pikaajaline ringlus.

Kõhukinnisus peetakse viirusliku hepatiidi käigus soodsaks märgiks ja spetsiifiliste M-klassi antikehade tuvastamine enam kui kahe kuu jooksul ei ole hea, kinnitades haiguse kroonilise vormi arengut.

Varjatud staadium

See etapp vastab viirusliku hepatiit C pikale püsivale püsivusele. See faas on kaasas ekspresseerimata sümptomid või selle täielik puudumine. Võib voolata aastaid (tavaliselt 15-20 aastat).

On oluline eraldada asjaolu märkimisväärseid erinevusi pikaleveninud käigus B- ja C-hepatiidi eelnevatel etappidel Järk taasaktiveerumise hepatiit C peetakse latentse faasivoolude, kusjuures sümptomaatika moodustub vastav pikaleveninud käigus hepatiit.

Tuleb märkida, et B-hepatiidi krooniline käik peaaegu kunagi ei põhjusta nakkavat protsessi ägenemist.

Varjatud etapi märgid:

  • kaebuste puudumine;
  • registreeritud sümptomid ägedate protsesside ajaloos;
  • klassi G spetsiifiliste antikehade olemasolu, samuti C-valgu ja mittestruktuursete valkude antikehade olemasolu;
  • suurenenud maksaensüümide tiiter;
  • anti-HCV-IgM ja HCV-RNA ei tuvastata ega tuvastata madala kontsentratsiooniga haiguse ägenemise ajal.
sisu ↑

Reaktivatsiooni staadium

Viiruse hepatiidi Kroonilise kuriteo analüüsiks on oluliseks aspektiks dünaamiline vaatlus spetsiifiliste M-klassi antikehadega, mis määravad ägeda faasi.

Taasaktiveerimise etapile ülemineku kriteeriumid:

  • struktuursete ja mittestruktuursete valkude G-tüüpi antikehade suurte arvude regulaarne avastamine;
  • ajalooline äge lugu;
  • suurenenud aminotransferaaside sisaldus veres;
  • HCV-vastase IgM kõrge taseme tuvastamine;
  • HCV-RNA tuvastamine;
  • sümptomite ilmnemine, mis on iseloomulik haiguse kroonilisele kulgemisele.

Hepatiidi viiruste uurimise meetodid

Seroloogilised uurimismeetodid

Kõigi seroloogiliste reaktsioonide alus on antigeeni ja antikeha vastasmõju.

Antikehade diagnostiliseks otstarbeks avastamise meetod subjekti seerumis.

Sellisel juhul ei ole reaktsiooni kahest komponendist (antikeha, antigeen) seerum teada, kuna reaktsioon viiakse läbi teadaolevate antigeenidega. Positiivne tulemus näitab antikehade olemasolu veres, mis vastab kasutatud antigeenile; negatiivne tulemus viitab sellise puudumisele.

Usaldusväärsed tulemused saadakse patsiendi "paaristatud" seerumi uuringus, mis on võetud haiguse alguses (3-7 päeva) ja 10-12 päeva pärast. Antud juhul on võimalik jälgida antikehade kasvu dünaamikat. Viiruslike infektsioonide korral on teise seerumi antikehade tiitriga ainult neljakordne või rohkem suurenenud diagnoosimisväärtus.

Kasutuselevõtuga meetodi praktikas laborid immunosorptsioonianalüüsimeetod (ELISA) tehti võimalik määrata antikehade patsientide veres kuuluvad erinevatesse klassidesse immunoglobuliinide (JGM ja JGG), mis suurendas oluliselt seroloogiliste diagnostikameetodite informatiivuse.

Esmase immuunvastuse korral, kui inimese immuunsüsteem interakteerub nakkusohtliku ainega esmakordselt, sünteesitakse peamiselt klassi M immunoglobuliinide (JgM) antikehad. Alles hiljem, 8.-12. Päeval pärast seda, kui antigeen siseneb kehasse, hakkavad klassi G immunoglobuliinide (JgG) antikehad kogunema veres. Immuunvastuses nakkushaiguste korral toodetakse ka klassi A antikehi (JgA), millel on oluline roll naha ja limaskestade kaitsmisel nakkushaigustest.

Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) meetod

Polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR), mis on üks meetodites DNA diagnostika, võimaldab suurendada koopiate arvu tuvastasime genoomi osa (DNA) bakterite või viiruste on miljon korda, kasutades DNA polümeraasi ensüümi. Teatud genoomi jaoks spetsiifilise nukleiinhappe testitav segment multiplitseerib (amplifitseeritakse), mis võimaldab seda tuvastada. Esiteks DNA molekuli bakterite või viiruste kuumutamisega jaguneb kaheks ketid, seejärel juuresolekul sünteesitud DNA praimerid (järjestuse nukleina on spetsiifiline määratletud genoomi) on siduv nende komplementaarsete lõikude DNA, sünteesiti teise ahela nukleiinhappe pärast iga praimerit kohalolekul termostabiilsele DNA polümeraasi. Tuleb välja kaks DNA molekuli. Seda protsessi korratakse mitu korda.

Diagnostikale piisab ühest DNA molekulist, see tähendab ühe bakteri või viiruse osakese olemasolu. Reaktsiooni täiendav samm - DNA süntees RNA molekulis, kasutades ensüümi pöördtranskriptaasi - võimaldas testida RNA viiruseid, näiteks C-hepatiidi viirust.

PCR on kolmeastmeline protsess, mis kordub tsükliliselt: denatureerimine, praimeri anniilimine, DNA süntees (polümerisatsioon). DNA sünteesitud kogus identifitseeritakse ensüümi immuunanalüüsil või elektroforeesil.

    PCR-i eelis nakkushaiguste diagnoosimisel teiste uurimismeetodite puhul on järgmine:
  • infektsiooni tekitaja võib avastada igas bioloogilises keskkonnas, sealhulgas biopsia abil saadud materjalis;
  • nakkushaiguste võimalik diagnoosimine haiguse erinevatel etappidel;
  • võime uurimistulemuste kvantifitseerimiseks (kui palju viirusi või baktereid on uuritavas materjalis);
  • kõrge tundlikkuse meetod.

Hepatiidi viiruse uuringud

Praegu eristuvad järgmised viirusliku hepatiidi vormid: A-hepatiit, B-hepatiit, C-hepatiit, D-hepatiit, E-hepatiit, G-hepatiit ja TT-hepatiit. Igat loetletud viirushepatiidi vormide diagnoosimiseks kasutatakse spetsiifilist markerite nimekirja.

Viiruse hepatiit A

A-hepatiit on äge enteroviiruse infektsioon. Selline põhjustaja on hepatiit A viirus (HAV, HAV) - enteroviirus tüüp 72. Viiruse genoomi esindab üheahelaline RNA. A-hepatiidi viirus sisaldab üht antigeeni (HA-Ag). Hepatiidi A osakaal viirushepatiidi üldises esinemissageduses on 70-80%. A-hepatiidi esinemissageduse struktuuris moodustavad lapsed kuni 80%, peamiselt preschoolers ja primary school children.

Viirushepatiit B

B-hepatiit - viiruslik antroponootiline infektsioon. B-hepatiidi viiruse (HBV, HBV) põhjustaja - viitab hepatnaviiruste perekonnale, mis sisaldavad DNA-d sisaldavaid viirusi, mis nakatavad maksarakud. HBV virioonidel on välimine lipoproteiini membraan ja nukleokapsiid, mis sisaldab kaheahelalist DNA-d ja DNA-st sõltuvat DNA polümeraasi.

    HBV (HBV) struktuuris eristatakse järgmisi antigeenisüsteeme:
  • HBV lipoproteiini membraani koostises olev ("Austraalia") antigeen, HBsAg, on HBV marker, mis näitab viiruse nakatumist;
  • tuum (tuum), HBcAg - on leitud virioni nukleokapsiidi koostises, mis viitab viiruse aktiivsele paljunemisele;
  • HBeAg - on osa HBV tuumast, mis viitab viiruse aktiivsusele ja lisaks sellele selle kõrgele virulentsusele ja infektsioonile;
  • HBxAg - asub virioni koore lähedal, uuritakse selle rolli infektsiooni tekkeprotsessis.

Viiruse hepatiidi B diagnoosimisel on esmase tähtsusega hepatiidi markerite kompleksi määratlus. Selle nakkuse alla kuulub üle 5% maailma elanikkonnast ning erinevate autorite arvates on 60-82% HBV antiktarpakkude esinemissagedusest.

Hepatiit C viiruse genotüübid

C-hepatiit (HCV) on viirushaigus, mis kõige sagedamini esineb transfusioonivastase hepatiidi kujul, kus esineb antikehalisi ja kergeid vorme ning kalduvad kroonilisele protsessile.

Selline haigusjuht, C-hepatiidi viirus, sarnaneb flavoviirustega ja sisaldab RNA-d. Fülogeneetilise analüüsi põhjal on eraldatud 6 HCV genotüüpi ja enam kui 80 alatüüpi.

Genotüüp 1 on maailma kõige levinum genotüüp (40-80%). Ameerika Ühendriikide jaoks on domineeriv genotüüp 1a, ülekaalus 1b Lääne-Euroopas ja Lõuna-Aasias.

Genotüüp 2 on levinud kogu maailmas, kuid see esineb vähem kui 1. genotüübiga (10 kuni 40%).

HCV tüüp 3 on iseloomulik Indiale, Pakistanile, Austraalia ja Šotimaale. Genotüüp 4 levib peamiselt Kesk-Aasias ja Egiptuses, Lõuna-Aafrikas genotüüp 5 ja Hong Kongis ja Mokaos genotüüp 6.

Ligikaudu 90% kõikidest transfusioonijärgse hepatiidi juhtumitest on seotud HCV-ga. Doonorriikide seas esineb C-hepatiidi viiruse (HCV-vastane antikeha) antikehi 0,2-5% -l juhtudest.

In 40-75% patsientidest registreeritud asümptomaatiline haiguse vormi sisse 50-75% patsientidest ägeda HCV krooniline hepatiit on moodustunud, 20% neist arendada maksatsirroos. Oluline roll antud HCV etioloogias hepatotsellulaarne kartsinoom.

C-hepatiidi viiruse genoomi esindab üheahelaline positiivselt laetud RNA, mis kodeerib 3 struktuurilist ja 5 mittestruktuurilist valku. Igaüks neist proteiinidest toodab hepatiit C patsientide veres leiduvaid antikehi.

HCV eristav tunnus on haiguse laine-sarnane liikumine, milles eristatakse 3 faasi: akuutne, latentne ja reaktivatsioonifaas.
Ägeda faasi iseloomustab maksaensüümide aktiivsuse suurenemine vereseerumis, IgM ja IgG antikehade tase HCV suhtes tiitrite ja ka HCV RNA suurenemisega.

Varjatud faasi iseloomustab kliiniliste ilmingute puudumine, kõrgete IgG antikehade esinemine veres kõrgetel tiitritel, IgM antikehade puudumine ja HCV RNA puudumine või nende esinemine väikestes kontsentratsioonides ägenemise ajal maksaensüümide vähese tõusu taustal.
Reaktivatsioonifaasi iseloomustavad kliiniliste tunnuste ilmnemine, maksaensüümide aktiivsuse suurenemine, IgG antikehade olemasolu (tuumikukleekapsiidi valgu ja NS struktuurifaasidega) suurtes tiitrites, HCV RNA esinemine ja dünaamikas HCV tiitrite suurenemine IgM antikehades.

Viirushepatiit D

D-hepatiit on viirusnakkus, mis on tingitud viiruse bioloogilistest omadustest, mis esinevad ainult B-hepatiidi kaas- või superinfektsiooni kujul, mida iseloomustab raske kurss,
sageli kahjulik tulemus.

Sõltumatult, viiruse B puudumisel ei satu D-hepatiidi viirus inimese kehasse

Selle põhjustajaks on D-hepatiidi viirus (HD), selle bioloogilised omadused on lähedased viroididele - tuvastatud nukleiinhappemolekule. Inimese maks on ainus HDV reproduktsiooni (replikatsiooni) koht.

On teada kaks infektsiooni varianti: kaasinfektsioon (samaaegne HBV ja VHD nakkus) ja superinfektsioon (HBsAg-positiivsete patsientide infektsioon). HBV ja HDV kombinatsiooniga kaasneb patoloogilise protsessi raskemate vormide väljatöötamine, mis on peamiselt tingitud HDV-i toimest.

Üleinfektsioonide suremus ületab 15-20%. Delta viiruse nakkus võib põhjustada ägeda haiguse, mis lõpeb taastumisega või moodustab HDV kroonilise kandja.

D-hepatiidi korral võib B-hepatiidi markerid - anti HBs ja HBs-antigeenid - veres puududa ja DNA polümeraasi aktiivsus on inhibeeritud, kuna HDV pärsib B-hepatiidi viiruse replikatsiooni.

Viirusliku hepatiidi seroloogiline diagnoos

Diagnoos algab patsiendi uurimisega. Viirusliku hepatiidi õige ja õigeaegseks diagnoosimiseks uurivad arstid esmalt patsiendi, suunavad teda vere ja uriinianalüüside tegemiseks.

Kõigepealt pööravad nad tähelepanu selliste haiguse esialgse perioodi iseloomulikele sümptomitele nagu letargia, üldine lihasnõrkus, isutus, iiveldus, ebamugavustunne kõhus, uriini värvuse tumenemine, maksa laienemine ja paksenemine, selle alumise serva valutundlikkuse suurenemine. Üldiselt pöörab verearstide analüüs tähelepanu leukotsüütide, lümfotsüütide, ESRi sisaldusele.

Nad kasutavad biokeemilisi vere ja uriinianalüüse, et hinnata maksakahjustuse taset ja kinnitada, kas kollatõbi on seotud maksapõletikuga. Kõige olulisem on sapipigmendi - bilirubiini tase, mis moodustub punaliblede lagunemise tõttu maksas.

Tavaliselt on bilirubiin seostatud vere proteiinidega ja ei oma toksilist toimet kehakudedele. Hepatiidi korral suureneb vabade ja seotud bilirubiini kontsentratsioon veres järsult. Kui see ületab 200-400 mg / l, muutub ikter nähtuks silma.

Hepatotsüütide kahjustus räägib transaminaaside aktiivsuse tõusust - ALAT ja AST, mis sisenevad kahjustatud membraanide kaudu maksarakkudesse. Samuti on spetsiifilised testid vere hüübimissüsteemi seisundi kohta, kus osalevad maksas sünteesitud valgud. Uriini positiivne reaktsioon urobiliinile on diagnostilise väärtusega.

Maksa funktsiooni kahjustuse tõendid on tümooli test. Protrombiiniindeksi muutus iseloomustab viirusliku hepatiidi raskust ja leelisfosfataasi, üldbilirubiini aktiivsuse suurenemine viitab maksa sekretoorse funktsiooni rikkumisele. Uriini reageerimine sapiga pigmentidele haiguse alguses on positiivne palju vähem.

Vähese tähtsuse diagnoosimisel antakse viirusliku hepatiidi ägedad ja kroonilised vormid kõhuõõne organite ultraheliuuringule. Selle meetodi abil saavad arstid kindlaks teha selliseid muutusi, mida välise uuringu käigus ei tuvastata: suurenenud maks, maksaensüümide kitsenemine, seinte induratsioon ja paksenemine, sapipõie ja pankrease põletiku tunnused, dilateeritud portaal ja põrnaveenid, suurenenud põrn, laienenud lümfisõlmed. Kõige olulisem diagnostiline meetod, eriti krooniline hepatiit, on maksa biopsia.

Meetodid antikehade ja antigeenide tuvastamiseks veres ja teistes kehavedelikes hõlmavad seroloogilist diagnostikat. Viirusliku hepatiidi varajaseks diagnoosimiseks, kaasaarvatud antikehalised asümptomaatilised vormid, määratakse seerumis viiruse valkude (antigeenid, mida nimetatakse ka viirushepatiidi markeriteks) või nende antikehade määramiseks immunoensüümide analüüsi (ELISA) abil. Lisaks sellele täiendatakse ELISA-d võimaluse piires polümeraasi ahelreaktsiooniga (PCR), mis võimaldab kindlaks teha viirusnukleiinhapete esinemist B-hepatiidi viiruse, teise hepatiidi RNA viiruste seerumis, mis on eriti tähtis õigeaegse ravi alustamiseks.

Ensüümseotud immunosorbentanalüüs (ELISA) on universaalne immunoloogilise diagnoosi meetod, mida praktikas laialdaselt kasutatakse. Selle eesmärk on tuvastada viiruslikud valgud (antigeenid) või antikehad, mis tekivad immuunsüsteemis vastusena viiruste tungimisele inimkehasse. Need valkud on omapärased markerid (sildid) või märgid, mille olemasolu võimaldab teil teha täpset diagnoosi, hinnata haiguse olemust ja aidata arstil valida õige ravi. See meetod põhineb hästi tuntud antigeeni-antikeha interaktsioonil.

Antigeenide tuvastamiseks toodavad mitmesugused kaubandusettevõtted katsesüsteeme, mis on 96-süvendiga polüstüreenplaadid. Kaevude põhjas on antikehad eelnevalt adsorbeeritud ("õmmeldud") ühe või teise patogeeni antigeeni, näiteks hepatiit B viiruse - HBs-antigeeni pinnaantigeeni.

Esimeses etapis lisatakse igasse süvendisse proovi, näiteks patsiendi vereseerumit erinevatel lahjendustel, mis sisaldavad veel määramata viiruse valku (antigeeni). Kui see valk (antigeen) "tunnustab" selle antikeha, siis nende sidumine tekib. See tähendab, et patsiendi seerum sisaldab antigeeni, mille antikehad sorteeritakse plaadi põhjas.

Selle reaktsiooni tulemuste nägemiseks on järgmine etapp, milles antikehale seostub "antigeeni-antikeha" kompleksile lisatud ühend. See ühend sisaldab ensüümi nagu mädarõika peroksüdaas. Kui sellele lisatakse substraat, lõhustatakse viimane, millele järgneb lahuse värvimine kollakaspruuni värvusega.

Järgmisel etapil pestakse igast auku põhjalikult reageerimata komponentidest. Nendes süvendites, kus antigeen, nagu meie juhul, on täiesti seotud antikehaga, ei saa see enam ühendatud ühendiga toimida.

Seepärast eemaldatakse see pesu pesemise ajal. Seerumi lahjendamisel väheneb antikehade sisaldus ja nad ei suuda antigeeni täielikult siduda. Neis süvendites seotakse ensüümi sisaldav ühend antigeeniga ja jääb pärast pesemist kaevu. Järgmisel etapil lisage substraat ja vaadake reaktsiooni tulemusi, mida hinnatakse visuaalselt või kasutage spektrofotomeetrit.

Seega leidsime, et patsiendi seerumiproov sisaldab HBs antigeeni. Saate teada saada ka selle koguse või tiiteri, määrates seerumi viimase lahjenduse, kus ilmnes kollane värv. Mida suurem lahjendusaste, seda suurem on viirus patsiendi veres.

Samuti võib kindlaks määrata viirusliku hepatiidi konkreetse haigusetekitaja antikehade olemasolu. Ainult nendel juhtudel kasutatakse süvendite põhjaga "õmmeldud" diagnostilisi katsesüsteeme, mitte antikehadega, vaid teadaolevate antigeenidega. Selle meetodi eelised on suure tundlikkusega ja spetsiifilisusega, reaktsioonivõimega, võimalusega uurida samaaegselt suurt hulka patsiente. Meetodi puudujääkide hulka kuuluvad vajadus spetsiaalsete kallite seadmete ja vastava personali kvalifikatsiooni järele.

Polümeraasi ahelreaktsiooni meetod

Kaasaegses laboratoorses diagnostikas on PCR eriline koht. PCR-meetod tõstis kliinilise laboratoorse diagnostika põhimõtteliselt erinevat kõrgust - nukleiinhapete (DNA ja RNA) määramise taset, mis võimaldab nakkuslikku ainet või geneetilisi mutatsioone vahetult avastada igas bioloogilises keskkonnas.

Selles PCR-meetodis on teoreetiliselt võimalik tuvastada üks soovitud nukleiinhappemolekul miljoneid teisi. Kliinilise meditsiini vaatepunktist on nukleiinhappe definitsioon samaväärne patogeeni avastamisega uuringu objektis.

Bioloogiast on teada, et nukleiinhapetel (DNA või RNA) omane reproduktsioon (paljunemine). See põhimõte põhineb PCR-i meetodil, kui seda protsessi tehakse laboris kunstlikult. Selleks eraldatakse patsiendilt saadud koeproovist (näiteks viirusliku hepatiidi kahtluse korral) nukleiinhape.

See täidab mingi "maatriksi" rolli, millele süntees viiakse läbi. Nukleiinhape omab oma "jäljendit" - unikaalset nukleotiidide järjestust, millest see koosneb. Iga patogeeni jaoks on sellist järjestust uuritud, on koostatud mingi "kaart".

PCR-i kõige olulisem element on praimer (DNA-d, mis on komplementaarsed (vastavad proovile eraldatud nukleiinhapete piirkondadele). Praimerid tagavad reaktsiooni käivitumise ja spetsiifilisuse.

Seega koosneb PCRi katsesüsteem testproovi nukleiinhapete, praimerite ja spetsiifiliste ensüümide (polümeraasid) segust, mille kaudu see reaktsioon on võimatu. PCR-analüüs hõlmab mitu tsüklit (astmeid), mille tulemusena saadakse malli nukleiinhappe tuvastatava piirkonna täpsed koopiad. Neid tsüklit korratakse 30-50 korda vastavalt antud programmile. Selle reaktsiooni lõppsaadust tuntakse ära geel-elektroforeesiga.

"Tundlikkuse" indikaator

Mõni laborianalüüsi diagnostilise efektiivsuse üks tähtsamaid kriteeriume on tundlikkuse indikaator. See peaks eristama analüütilist ja diagnostilist tundlikkust. Analüüsitav tundlikkus PCRi suhtes on DNA või RNA koopiate minimaalne arv 1 ml proovilahuses, mida saab määrata selle testimissüsteemi abil.

Enamik kommertskatsesüsteeme suudavad tuvastada soovitud nukleiinhapet bioloogilises proovis, isegi kui selle kontsentratsioon on mitusada eksemplari 1 ml proovi kohta. See on seotud üldise olukorraga, mis määrab kindlaks mis tahes laboratoorsete diagnostiliste meetodite või testimissüsteemide kliinilise sobivuse - meetodi diagnostiline tundlikkus ei tohiks olla väiksem kui 95-98%.

Laboratoorset tõhusust käsitlev teine ​​universaalne kriteerium on "spetsiifilisus", mis määratakse tervete inimeste osakaaluga, kellel on tõeliselt negatiivsed analüüsitulemused. PCR-meetodil on kõrgeim spetsiifilisus, mis ulatub 99-100% -ni.

PCR-i diagnostiline tundlikkus ja spetsiifilisus on võrreldavad ja sageli suuremad kui need, mida pakuvad muud meetodid, mis on nakkushaiguste diagnoosimisel "kullastandardid".

PCR-analüüsi tulemusi saab saavutada ühe tööpäeva jooksul, samal ajal kui analüüsideks võetud proove saab säilitada (koguneda) isegi mitme nädala jooksul, järgides samal ajal asjakohaseid temperatuuri norme. Mitme välisriigi uurimiskeskuses hiljuti läbiviidud mitmesuguste diagnostiliste meetodite tundlikkuse kokkuvõte näitas, et ELISA-l on tundlikkus 50-70% ja PCR - 90-100%.

PCR-ga võrreldes ELISA-ga ja teiste meetoditega on kaks olulist eelist: kõrge tundlikkus ja lühike analüüsi aeg, st arst ja patsient on uurimistulemuste saamiseks asjakohased.

Enne teiste kliinilise laboratoorse diagnostika meetodeid on PCR-i eelised:

- meetod võimaldab DNA-d ja RNA-d tuvastada, isegi siis, kui teiste meetodite kasutamisel on võimatu seda teha;

- meetodil on kõrge spetsiifilisus (kuni 100%). Selle põhjuseks on asjaolu, et uuritavas materjalis leitakse ainulaadne nukleiinhappefragment, mis on iseloomulik ainult antud patogeenile või geenile;

- võimalus teha mitte ainult kvalitatiivset (kättesaadavus), vaid ka nukleiinhappe koguse (kontsentratsiooni) hindamist. Praegu on kommertskatsesüsteemide abil võimalik uurida valimis mitu sada eksemplari;

- meetodi kõrge tootlikkus ja automatiseerimine võimaldavad arstil saada uuringu tulemusi ja jagada nendega patsiendi analüüsi päeval;

- PCR võimaldab tuvastada patogeeni organismis enne haiguse arengut, näiteks inkubatsiooniperioodil;

- PCR-analüüsi tegemiseks piisab minimaalsest proovi mahust (kuni mikrolitrid);

- PCR-analüüs võimaldab teil ühe proovi samaaegselt diagnoosida mitut patogeenset ainet, ilma et see mõjutaks tulemuse tundlikkust või spetsiifilisust;

- PCR-i saadud tulemusi saab sisestada arvutiandmekandjatele või pildistada sõltumatute ekspertide edasiseks hindamiseks.

Hoolimata eelpool toodud eelistest ei ole PCR-meetodil veel mingeid puudusi, mida tuleks uurimistulemuste hindamisel arvestada:

- laboratoorsete seadmete kõrgeimad nõuded, katsesüsteemide kvaliteet ja rangem uurimistöö eeskirjade järgimine, et vältida valesid tulemusi. Analüüside kvaliteedi probleemi lahendamine on võimalik vastava personali kvalifikatsiooniga ja labori kohustusliku sertifitseerimisega;

- Positiivse PCR-i tulemuse ebaselge hindamine. See on see asjaolu, et sageli on praktikute põhjendamatu väide, et tekib saadud tulemus ja PCR-meetodi tõhusus. Näiteks üksikisikute puhul, kelle patogeeni DNA tuvastatakse veres PCR-meetodi abil, haigus ei pruugi kliiniliselt areneda.

Selles olukorras peaks PCR-i analüüsi hindamisel rääkima nakatunud patsiendist, mitte nakkushaiguste tekkimisest. PCR-analüüsi meetod võimaldab kindlaks teha patogeeni olemasolu või puudumise, vastab suures osas küsimusele "ravida mitte ravida" ja võimaldab ka hinnata ravi kvaliteeti, jälgides patogeeni olemasolu või puudumist. Arst, kes hindab PCR-analüüsi tulemust, mõistab, et see tulemus ei ole ainus argument töötlemise alustamise otsuse langetamiseks või selle keeldumiseks.

Iga liigi haigustekitajat viirushepatiidi katsesüsteemi, kuid kõige väärtuslikum PCR meetodiga tõestas diagnoosimiseks viirushepatiit B, C, D, G. PCR meetodiga on kriitiline diagnoosimiseks hepatiit B See on tingitud asjaolust, et ühed paljudest sorti viirus seal on mutantsed (muutunud tunnustega), mida tavapärased seroloogilised testid ei määra.

PCR-analüüsi meetod võimaldab tuvastada ja millisel kujul on hepatiit viirus, kas see on võimeline iseseisvat reproduktsiooni või on integreeritud (integreeritud) peremeesraku DNA-sse. See on kriitiliselt kliiniliselt tähtis, kuna selle infektsiooni integreerivas vormis ei ole inimene teistele nakkav (seksuaalse partneri ohutus, kutsealane sobivus, puudub viiruse vertikaalse ülekande oht emalt lootele jne).

Lisaks sellele ei ole selliste patsientide jaoks viirusevastane ravi näidustatud, pealegi on see isegi ohtlik. Integreeritud infektsiooni korral suureneb aga maksakasvajate tekke tõenäosus järsult (rohkem kui 200 korda). Sellised inimesed peavad läbima tervikliku kliinilise, laboratoorse ja instrumentaalse uuringu vähemalt kord aastas.

PCR-meetod võib olla arbitraator, mis määrab vajaduse ravi alustamiseks ja selle tõhususe kontrollimiseks. B-hepatiidi viiruse DNA kiire kadumine verest on otsene ja usaldusväärne test viirusevastase ravi edukaks tulemuseks.

Seega on kõige olulisem analüüs hepatiit B viiruse DNA määramiseks vereplasmas, mis võimaldab koos teiste laboritestidega infektsiooni objektiivselt diagnoosida, määrata nakkusprotsessi olemust, tegutseda teraapia läbiviimise kriteeriumina ja hinnata selle tõhusust.

PCR-analüüsi meetod ei ole võrreldav C-hepatiidi viiruse poolt põhjustatud infektsiooni diagnoosimise, prognoosi ja viirusevastase ravi edukuse hindamisega. PCR-i kasutamine võimaldab tuvastada C-hepatiidi viirust infektsiooniprotsessi esimesel etapil, sest C-hepatiidi viiruse RNA-d saab tuvastada vereseerumis üks nädal pärast nakatumist. Selle meetodiga määratakse kindlaks selle viiruse geneetilised sordid, mis võimaldavad arstil määrata õiget ravi.

D viirusliku hepatiidi puhul võimaldab PCR analüüsimeetod määrata patsiendi seerumis viirusliku RNA määramise, samuti B- ja D-hepatiidi segu nakkuste segu. Seetõttu saab seda uurimismeetodit kasutada ravi tõhususe jälgimiseks, haiguse kulgu ja selle tulemuste prognoosimiseks. On oluline, et arst määrab, kas on segatud nakkus, kuna D-hepatiit suurendab B-hepatiidi nekrootilist toimet ja suurendab seega selle arengut.

Praegu on PCR-analüüsi meetod ainus võimalus C-hepatiidi viirusega nakatumise tõendamiseks.

Mõelge erinevate hepatiidide diagnostiliste meetodite kasutamisele.

Hepatiit E. Peamiseks diagnostika märke E-viirushepatiit on: vesi- eeldusel ülekandemehhanismi, patsiendi vanusest 20 kuni 40 aastat, leviku peamiselt piirkondades troopiliste ja subtroopiliste tsooni, kliinilised nähud, nagu A-hepatiidi levimus kerge, registreerimise tõsist ohtu surmav raseduse teisel poolel, raseduse ajal raseduse ajal ja rasedate emadele (esinevad intensiivse hemolüüsi, hemoglobinuuria, ägedate neerudega piisavus ja raske tromboemorraagiline sündroom). Kinnitab antikehade avastamise diagnoosi veres.

Viiruslik Hepatiit B arstid kahtlustatakse kui haige 45-180 päeva enne haiguse avaldumist vereülekandeid vere või selle komponentide (erütrotsüütide, leukotsüütide, trombotsüütide massi) viidi läbi operatsiooni, uuringud sisemiste mitmekordne süstimiseks (kaasa arvatud ravimi ) või, mis juhtub palju harvemini, kui patsiendil on olnud B-hepatiidi patsiendil seksuaalne või tihe kontakt. Diagnoosi ennetähtaegse kinnitamise kriteeriumiks on hobuste, HBe ja HBc-vastaste antigeenide tuvastamine veres ja viiruslik DNA.

Akuutse hepatiidi B seroloogilised markerid

C-hepatiit. Erinevalt B-hepatiidist, mille antigeensete ja antikehade markerite diagnoosimisel võetakse arvesse C-hepatiidi vastu, kogutakse ainult ELISA-vastased antikehad, mis on seotud viiruse madala kontsentratsiooniga veres. Maksa biopsia proovides saab tuvastada C-hepatiidi viiruse antigeene.

Laboratoorsed diagnoosid hõlmavad kolme peamist tüüpi katseid.

Ägeda hepatiit C seroloogilised markerid

Antikehade tuvastamine. Vaatamata kõrgele spetsiifilisusele ei ole tänapäeva diagnostiliste ensüümide immuunanalüsi süsteemid ülemäärase diagnoosimise eest kindlustatud, see tähendab, et viivitusega on positiivsed tulemused. Nende väljajätmiseks on vaja ka hinnanguid, mis põhinevad eri ajavahemike järel saadud analüüside tulemustel. Valenegatiivsed tulemused on võimalikud ka siis, kui viirusevastaseid antikehi ei saa tuvastada, vaatamata viiruse olemasolule organismis. See juhtub järgmistel juhtudel:

- haiguse esialgne periood;

- kui patsiendid kasutavad immunosupressante - immuunsüsteemi pärssivad ravimid;

- teatud genotüüpidega (kõigepealt 3 ja 4).

Praegu toodetakse kaubanduslikke katse süsteeme, et tuvastada 1. genotüübi hepatiit C viiruse antikehad. Kuid sellised testid ei pruugi olla piisavalt tõhusad antikehade usaldusväärseks tuvastamiseks, kui nad on nakatunud teise genotüübi viirusega. See on väga tähtis piirkondades, kus valitsevad muud tüüpi viirused. Seega on C-hepatiidi tõhusaks diagnoosimiseks vaja väga tundlikku test, mis võib reageerida mis tahes genotüübi hepatiidi C viiruse antikehadega.

Viirusliku RNA määramine. Diagnostilisel eesmärgil avastati C-hepatiidi viiruse RNA. Praeguseks peetakse seda testi hepatiidi C diagnoosiks "kullastandardiks". Selleks kasutatakse polümeraasi ahelreaktsiooni klassikalist versiooni (PCR) kõige laialdasemalt. Selle abiga on võimalik jälgida viiruse reproduktsiooni, samuti hinnata selle esinemist maksa ja teiste kudede puhul. Määramine RNA kõige sagedamini kasutatav tulemuse kinnitab antikehade tuvastamiseks, kujutades varajane diagnoos akuutne hepatiit (viiruse RNA võib tuvastada juba 7-21 päeva pärast nakatamist, see tähendab ammu enne esimese antikeha), et jälgida rase perinataalse nakkuse ja viirusevastase ravi efektiivsuse jälgimine.

Nende kahe katse andmed täiendavad teineteist hästi. Mõne akuutse hepatiidi perioodi puhul on iseloomulikud PCR analüüsi positiivsed tulemused ja viirusevastaste antikehade negatiivsed tulemused. Positiivse antikehade testi taustal PCR-analüüside negatiivsed näitajad võivad olla tingitud vähestest (PCR-i ei tuvastata) viiruse kontsentratsioonis veres. Korduvad positiivsed PCR-i vereanalüüsid peegeldavad viiruse aktivatsiooni maksa või teiste organite rakkudes.

Samuti kasutatakse PCR-i viiruse tuvastamiseks biopsia ajal võetud maksakoes. See annab infektsiooniprotsessi arengust täielikuma teabe, sest viirus on pikka aega hepatotsüütidega peatuda ilma vere sisse sattumiseta või madala kontsentratsiooniga. See esineb kõige sagedamini nakkuse varases staadiumis, kuid seda võib täheldada ka kroonilise hepatiidi korral.

C-hepatiidi viiruse valkude (antigeenide) määratlus. C-hepatiidi viiruse valkude avastamise peamine võimalus tuvastati vahetult pärast viiruse avastamist immuunfluorestsentsuuringus, mille käigus saadi krooniline hepatiit C-ga inimestelt saadud kudesid, kellel oli kimpidega nakatunud ja nakatunud selle viirusega.

Seedes sisalduvate viirusvalkude (antigeenide) määramine nende vähese sisalduse tõttu polnud pikka aega võimalik. Alles hiljuti on välja töötatud metodoloogilised lähenemisviisid sisemise C-valgu immuunsüsteemi tuvastamiseks veres ja korraldatud on esimesed kaubanduslikud katsesüsteemid. Nende kasutuselevõtt võimaldab lahendada vastuolulisi diagnostikaküsimusi majanduslikult vähem kui viirusliku RNA määratlus. AlATi taseme määramine on C-hepatiidi liikumise aktiivsuse hindamise kõige odavam meetod. Siiski, kui saadud andmed ei pruugi haiguse raskuse kindlaksmääramiseks piisav olla.

Maksakahjustusega seotud olulisemat teavet saab määrata, määrates ALAT kontsentratsiooni mitu kuud. Selleks, et saada teavet maksakahjustuse ulatuse kohta, mida teiste uurimismeetoditega ei ole võimalik kasutada, võib arst anda maksa biopsia. Selle menetluse tulemusena saadud andmed võimaldavad otsustada viirusevastase ravi alustamiseks või tühistamiseks.

Artiklis kasutatakse avatud lähtekoodiga materjale: Autor: Trofimov S. - Raamat: "Maksa haigused"

/ Akuutse ja kroonilise B- ja C-hepatiidi antikoagrid

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

Distsipliin "Nakkushaigused"

Ägeda ja kroonilise hepatiidi B ja C marki diagnoosimine.

Pea Osakond: professor.

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

Viirusliku hepatiidi seroloogiliste markerite tuvastamine.... 3 lehekülge

Viirusliku hepatiidi B serodiagnostika.............................. 4 lehekülge

Viirushepatiidi C serodiagnostika.................................... 10 p

Kasutatud kirjanduse loetelu................................. 19 lk.

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

Viirusliku hepatiidi seroloogiliste markerite tuvastamine

Hepatiidi viiruslikku olemust on võimalik kindlaks teha ja teavet selle etioloogia kohta saada ainult hepatiidi viiruste seroloogiliste markerite abil. Sellised markerid hõlmavad viiruse valke (antigeene), spetsiifilisi antikehi, mida organism toodab infektsiooni korral, ja viiruse nukleiinhappeid (DNA või RNA), mis esindavad selle genoomi. Spetsiifiliste viiruslike või bakteriaalsete valkude (antigeenid) või antikehade tuvastamiseks peremeesorganismis ühe või teise patogeeni manulusel bioloogilistes kudedes ja vedelikes viidatakse immunoloogilistele laboratoorsete analüüside meetoditele. Viimastel aastakümnetel on immunoloogilised uurimismeetodid laialt levinud. Selle põhjuseks oli immunoloogia ja biotehnoloogia tihe liitmine, mis võimaldas välja töötada ja praktikas rakendada mitmesuguseid testimissüsteeme, mis põhinevad antigeeni antikeha vastastiktoimel. Viiruse hepatiidi puhul viitab ELISA kaudsetele patogeeni tuvastamise meetoditele, võimaldades tuvastada haiguse etioloogiat. Suhteliselt hiljuti on kliiniliste diagnostiliste laborite praktikasse sisse viidud geniandiagnostika meetodid, mis võimaldavad geenide või mõttetute DNA ja / või RNA järjestuste avastamist ja iseloomustamist. Nende areng tuleneb polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) põhimõtte arendamisest 1983. aastal. Esimesed aruanded PCR-i praktilise rakendamise kohta ilmusid 1985. aastal ja sellest ajast peale on väljaannete arv, kus PCR-i kasutatakse üheks uurimismeetodiks, on üks maailma teadus-kirjanduse esimesi kohti. Need lähenemisviisid on rakendatavad nakkuslike genoomide avastamiseks ja uurimiseks

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

ained, onkoloogiliste haiguste markerite avastamine, geneetiliste muutuste tuvastamine inimese genoomis, mis on seotud teatud funktsionaalsete häiretega. Erinevalt ELISA-st viitab PCR-analüüs otsesetele meetoditele patogeeni avastamiseks kliinilises materjalis, mis võimaldab hinnata viiruseprotsessi aktiivsust ja tuvastada patogeeni levikut erinevates elundites ja kudedes.

Viirusliku hepatiidi B serodiagnostika

Hepatiit B viirus (hepatiit B viirus, HBV) kuulub Hepadnoviridae perekonda. Viiruse genoomi esindab osaliselt kahekordne 3200 bp suurune ümmargune DNA molekul. Valgusmikroskoobi all näeb HBV välja nurga all oleva osakese läbimõõduga 42 nm (Dane'i osake), mis koosneb tuumast - nukleoonist, mis on kujutatud iososedriga diameetriga 28 nm, mille sees on kaheahelaline DNA, terminaalne valk ja DNA polümeraasi ensüüm. Nukleoidvalk sisaldab HBcAg ja HBeAg. Väliskest (7 nm paksune) moodustab HBV pinnaantigeen - HBsAg. B-hepatiidi viirus on pseudoretroviirus, s.t. selle DNA võib osaliselt sisestada hepatotsüütide genoomi.

AVH-iga ja kroonilise hepatiidi ägenemise korral võib patsiendi hepatotsüütides ja seerumis avastada viirusosakesed. Kroonilise hepatiit B integratiivse vormi ja remissiooni staadiumis HBV seerumis ei tuvastata. HBV infektsiooni labori diagnoosimise aluseks on viiruse nakkuse seroloogiliste markerite määramine: HBsAg, HBeAg, anti-HBc klass IgM ja IgG, anti-HBe ja anti-HBs, HBV DNA ja viiruse DNA polümeraasi aktiivsus. Sõltuvalt viirushepatiidi B käigust tundub seroloogiliste markerite muutuste spekter teistsugune.

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

HBsAg on HBV nakkuse peamine marker. Ägeda viiruse B korral (90-80%) võib HBsAg-i tuvastada inkubatsiooniperioodil, alates infektsiooni 3-5-ndast nädalast. Antigeenide tsirkulatsiooni keskmine kestus on 70-80 päeva. HBsAg kiire kadumine (kollatõbi esimestel päevadel) antiBB-de ilmnemisega on halb prognostiline märk. Kroonilises B-hepatiidis võib HBsAg tsirkuleerida patsiendi veres paljude aastate jooksul. Tuleb märkida, et praegu kasutatavatel meetoditel HBsAg, sealhulgas ELISA määramiseks, on tundlikkuse piirväärtus. Seepärast on hepatiidi kliiniliste tunnuste ja HBsAg puudumise korral seerumis vaja uurida teisi HBV infektsiooni markereid. HBsAg esinemine veres viitab viiruse esinemisele maksas ja on väga tõenäoline veres. Mitte iga HBsAg sisaldav seerum ei sisalda B-hepatiidi viirust. Mõnel juhul ei sisalda viiruse DNA täielikult hepatotsüütide DNA-d, vaid osaliselt ainult HBsAg-i sünteesi kodeerivat piirkonda. Neil juhtudel sünteesitakse HBsAg ilma virioni teiste komponentideta (st ilma teiste antigeenita). Arvatakse, et selline olukord tekib siis, kui "tervislik" kandja HBsAg. B-hepatiidi viiruse HBeAg iseloomustab kõrge vere nakkavust, mis on HBV aktiivse replikatsiooni indikaator. HBeAg tsirkuleerub patsiendi veres ainult HBsAg manulusel. Kõhulihase perioodi esimesel nädalal tuvastatakse see 85-95% patsientidest. HBeAg detekteerimine kaheks kuuks või kauemaks on prognostiline märk kroonilise hepatiidi tekkest. Enamikul kroonilise hepatiidiga patsientidel, kellel on kõrge aktiivsus HBeAg-protsessis, püsib see pikka aega (kuni mitu aastat). B-hepatiidi viiruse klassi M (anti-HBc IgM) nukleaarse antigeeni antikehad - HBV aktiivse replikatsiooni marker ja äge infektsioon. Tuvastati 1-2 nädalat pärast HBsAg avastamist ja püsib 2-18 kuud. Ägeda hepatiidi B patsientidel on 4-20% -l HBc-vastane IgM-i ainus infektsiooni marker. Kell

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

CG Anti-HBc IgM-i võib tuvastada mõnel patsiendil, kellel on madalamad tiitrid kui ägeda infektsiooni korral, kusjuures antikehade tiiter peegeldab hepatiidi raskust. HBcAg klassi G (anti-HBc IgG) antikehad ilmnevad peaaegu samaaegselt anti-HBc IgM-iga. Reeglina jäävad nad kõikideks isikuteks, kellel on elu jooksul B-hepatiit. HBsAg-vastane antikeha levib 95% HBsAg kandjatest koos HBsAg-ga. HBsAg-vastased antikehad (anti-HB-d) viitavad eelmisele infektsioonile või vaktsineerimisjärgsele immuunsusele (kaitse tase - 10 RÜ / ml). Need ilmnevad taastumisperioodil, 4 nädalat pärast HBsAg kadumist, saavutades maksimaalse kontsentratsiooni 1-2 aasta jooksul, millele järgneb ajakohane diagnostiliste meetodite abil avastamiseks ligipääsmatu taseme järkjärguline vähenemine. Mõnedel juhtudel võivad anti-HB-d elada kogu aeg. Hepatiit B-ga patsientide kliinilise paranemise taustal on anti-HB-de esinemine hea prognostiline märk. On oluline märkida, et ägeda HBV infektsiooni dünaamikas on "aken", kui HBsAg ei ole enam määratletud ja anti-HB-sid pole veel ilmnenud. Samal ajal tuvastatakse anti-HBc IgM ja IgG. Sellest järeldub, et on vaja uurida AVH-i patsiente anti-HBc-IgM-i suhtes isegi HBsAg ja anti-HBs-uuringu negatiivsete tulemustega. HBeAg-vastased antikehad (anti-HBe) ilmuvad veres pärast HBeAg eliminatsiooni ja viiruse replikatsiooni viimist. B-hepatiidi ägeda perioodi 9. nädala lõpuks on enam kui 90% -l patsientidest anti-HBe. Taastumisaja jooksul võib anti-HBe kaob. Kuid anti-HBe olemasolu ei viita konkreetse seerumi nakkavuse puudumisele. On näidatud, et paljudel B-hepatiidi (umbes 10%) arengus esinevatel patsientidel esineb viiruse "immuunrõhu" all mutantvormid, mis "vältida" immuunsüsteemi ja ei ole kõrvaldatud. HB-vastase antikeha rakkudest eraldati mutant, mis ei suutnud toota HBeAg-i defektide tõttu eelregiooni piires ja mida nimetati HBeAg-negatiivseks. HBeAg-negatiivse mutandi välimus toob kaasa maksakahjustuse progresseerumise

Federal Education Agency

Riigi kõrgharidusasutus

Ulyanovsk State University

Meditsiini, ökoloogia ja füüsilise kultuuri instituut

Nakkushaiguste ja venereaalsed nahahaigused

jätkuv viiruse replikatsioon (HBV DNA sisaldus seerumis). HBeAg-negatiivse mutandi esmane nakkus suurendab oluliselt fulmitava hepatiidi riski. Kirjeldatud hepatiit B markereid kontrollitakse ELISA abil. Antikehade (anti-HBe, anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBc IgG) ja antigeenide (HBsAg, HBeAg) antikehade spekter võimaldab määrata B-hepatiidi diagnoosi ja määrata haiguse staadium (tabel 3). Selle meetodi puuduseks on see, et seda ei saa kasutada viiruse mutantvormide infektsioonil, immunosupressiooniga (vähipatsiendid, narkomaanid jne) ja organismis esineva patogeeni kvantitatiivseks hindamiseks. Nende probleemide lahendamine sai võimalikuks molekulaarbioloogiliste meetodite kasutuselevõtmise tulemusena kliiniliste diagnostiliste laborite praktikas.

Tabel 3. Hepatiit B viiruse nakkuse seroloogiliste markerite erinevad kombinatsioonid ja nende tõlgendamine


Seotud Artiklid Hepatiit