Sordid ja vajadus rakendada uuringuid PCR abil

Share Tweet Pin it

C-hepatiidi viirus on viirus, mis sisaldab RNA molekuli. Ta suudab vältida organismi immuunvastust, kuna tal on suur muteerumisvõime. Viirust on kuus peamist genotüüpi ja palju alamtüüpe. Meie regioonis jagatakse peamiselt 1, 2 ja 3 genotüüpi.

75-80% ulatuses muutub haigus krooniliseks, mis põhjustab maksafibroosi - seisundit, kus maksa koe asendatakse sidekoega. Fibroos põhjustab omakorda vähki või tsirroosi. Haiguse edasikandumise peamine režiim on läbi vere. Kui isikul on hepatiit C testi läbiviimise tunnuseid, antakse talle kaks peamist testi. Määratakse viiruse antikehad ja nende puudumisel arvatakse, et neil puudub hepatiit. Kui hepatiidi viiruse antikehade olemasolu tuvastatakse veres, viiakse läbi PCR-analüüs.

Selle meetodiga RNA määratakse veres 10-12 päeva pärast nakatamist ja näitab, et viirus aktiivselt organismis kordub. Selle aja jooksul on viirust lihtsalt võimatu avastada muul viisil, kuna see ei tekita ikka veel spetsiifilisi antikehi ja biokeemiliste testide ja biopsiatega ei ole näha maksakahjustusi.

Erinevad uuringud, kasutades PCR-i

Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsil on teatud eelised:

  1. Selles uuringus määratakse kindlaks viirus ise, mitte selle ainevahetusproduktid. Sellisel juhul on võimalik patogeeni tüüp määrata.
  2. Sellel meetodil on kõrge spetsiifilisus sellepärast, et uuritakse ainult teatavat DNA-sektsiooni, väheneb tõenäosus saada ekslikke tulemusi.
  3. Sellel on väga kõrge tundlikkus, määratakse isegi minimaalne viiruse hulk veres.

PCR-iga on kasutatud kaht peamist C-hepatiidi verd testimismeetodit: PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Kvalitatiivse meetodi abil määratakse kindlaks viirus olemasolu. Igaüks, kellel on hepatiidi antikehad, on veres tuvastatud, selline analüüs tehakse. Tulemuseks võib olla ainult kaks tüüpi: "tuvastatud" ja "ei tuvastatud", viimane väärtus loetakse normiks.

Positiivne testi tulemus tähendab, et proovis leiti viiruse RNA fragmente, mis omakorda näitab, et isik oli hepatiidi nakkusega. Negatiivse tulemuse korral on võimalikud kaks võimalust: infektsiooni puudumine ei olnud või selle kontsentratsioon on nii madal, et seda meetodit ei tuvastata.

Kvantitatiivne meetod erineb uuringu sisust, selle ülesannetest ja näidustustest. Kõik patsiendid, kellel ei ole hepatiiti, läbivad sellise analüüsi. Tal on, nagu igaüks, teatud eesmärgid. Viirusliku koormuse määramine või PCR-i kvantitatiivne analüüs viiruse RNA jaoks:

  • et määrata viiruse RNA veres ja "viirusliku hepatiidi" diagnoos;
  • prognoosida hepatiidi kroonilist levikut ja haiguse kulgu;
  • viirusevastase ravi jälgimiseks ja selle ravi laiendamise, ravi vähendamise või muutmise otsustamine.

Uuring viiakse läbi selliste näidustuste juuresolekul:

  • Kvaliteetse uuringuga avastati C-hepatiit ja vereringes tuvastati antikehad;
  • segatüüpi hepatiit;
  • kui viirusevastane ravi on planeeritud;
  • hepatiit C ravi ajal ja pärast seda;
  • kroonilise ja ägeda hepatiidi C esinemisel.

Katse viiakse läbi, et hinnata viiruse ühikute arvu vereproovi 1 cm3 või 1 ml täpsusega. Tulemused on esitatud numbritega. Kasutatud näitajateks on: IU / ml, mis tähendab rahvusvahelist ühikut milliliitri kohta ja koopiaid milliliitri kohta, RNA koopiate arvu 1 ml proovis. Mida suurem on analüüsi kvantitatiivne näitaja, seda suurem on viiruse ülekandmise tõenäosus teisele isikule.

R-DNA on hargnenud DNA-meetod. Lihtne ja odavam meetod. Suuremate proovide arv on madal, tundlikkus on 500 RÜ / ml. Sellise tundlikkuse korral on võimalus viirust mitte tuvastada, isegi kui see on veres.

TMA on transkriptsioonilise võimendamise meetod. See meetod tuvastab veres nukleiinhapped. See on odav ja kõrge tundlikkusega, 5-10 RÜ / ml. Suhteliselt uus meetod, mis võimaldab kiirendada ja vähendada katsetamise kulusid.

Laboratooriumi esitatud viiruse RNA määratluse kvantitatiivse analüüsi tulemused tõlgendatakse järgmiselt:

Mis on hepatiit C RNA?

Hepatiit C viiruse RNA uuring on kõige olulisem protseduur, mis võimaldab teil täpselt määrata patsientide kestust ja ravimeetodeid. Haiguse diagnoos koosneb mitmest erinevast vereanalüüsist, näiteks:

  • hepatiit C markerid (anti-HCV);
  • hepatiit C viiruse RNA (HCV RNA) määramine.

Esimene uuring tehti esimesel hepatiidi kahtlusel. Teine võimalus on kõige olulisem HCV RNA ravis, nii et seda on üksikasjalikumalt käsitletud.

Mis on viirushepatiit C?

Viiruse hepatiit C või HCV on nakkushaigus, mis mõjutab maksa. Viirus nakatub läbi vere. Te võite nakatuda, tehes vereülekannet, kui meditsiiniseadmete steriliseerimise eeskirju ei järgita. Vähem sagedamini esineb juhtumeid, kui haigus saadakse sugulisel teel või rase emalt lootele. Hepatiit C võib olla kahte tüüpi.

Krooniline hepatiit C on kõige ohtlikum. See on haigus, mis võib kesta kogu elu. See põhjustab tõsiseid probleeme maksatalitluse, nagu tsirroos või vähk. 70-90% nakatunud inimestest muutub haigus krooniliseks.

Kõige olulisem C-hepatiidi oht on see, et see toimub salaja, ilma ikteriliste märkideta. Sel juhul kaebavad kõige sagedamini palavik, iiveldus ja oksendamine, füüsiline nõrkus, väsimus, isutus ja kehakaal. Samal ajal leiab ta pahatahtlikku degeneratsiooni takskoe väikese kõvenemise taustal üsna sageli. Sel põhjusel nimetatakse C-hepatiidi tihtipeale "ajapommi" või "kangekaelse tapjana".

Haiguse teine ​​tunnus on selle väga aeglane areng, mida hinnatakse kümneid aastaid.

Reeglina ei tunne nakatunud inimesed mingeid sümptomeid ja ei tea nende tegelikust seisundist. Tihti saab haigust tuvastada ainult siis, kui pöördute mõne teise isiku arsti poole.

Riski hulka kuuluvad:

  • lapsed, kes said oma emadest C-hepatiidi viiruse;
  • sõltlased;
  • inimesed, kes läbisid kehaosi või tätoveerisid mittesteriilsete vahenditega;
  • doonorvere või elundite saamine (kuni 1992. aastani, kui hemodialüüsi ei tehtud);
  • HIV nakatunud inimesed;
  • meditsiinitöötajad, kes puutuvad kokku nakatunud patsientidega.

Hepatiidi C RNA määramine

Hepatiit C viiruse RNA määratlus, mida nimetatakse ka C-hepatiidi PCRiks, on bioloogilise materjali (veri) uuring, mida saab kasutada hepatiidi viiruse genoomsete ainete otsese esinemise tuvastamiseks organismis (ükski viirus on üksiku RNA tükk).

Peamine katsemeetod on PCR või polümeraasi ahelreaktsiooni meetod.

HCV RNA jaoks on olemas kahte tüüpi vereanalüüsid:

Kvaliteedikontroll

Kvalitatiivse analüüsi tegemine võimaldab kindlaks teha, kas viirus on veres. Kõik patsiendid, kellel on leitud C-hepatiidi antikehad, peavad selle testi läbima. Selle tulemuste põhjal saate 2 vastust: "olemas" või "puudub" viirus. Positiivse testitulemusega (tuvastatud) saab hinnata viiruse aktiivset reproduktsiooni, mis nakatab maksas terveid rakke.

Kõrgekvaliteedilise PCR-iga läbiviidud test on kohandatud spetsiifilise tundlikkusega vahemikus 10 kuni 500 RÜ / ml. Kui hepatiidi viirus avastatakse veres, mille konkreetne sisaldus on väiksem kui 10 RÜ / ml, võib viiruse tuvastamine muutuda võimatuks. Vähese spetsiifilise viiruse sisaldus on täheldatud patsientide seas, kellel on välja töötatud viirusevastane ravi. Seepärast on oluline, et meditsiinilise süsteemi tundlikkus oleks kõrge, et diagnoosida ja määrata polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne tulemus.

Sageli viiakse C-hepatiidi polümeraasi ahelreaktsioon kohe pärast vastavate antikehade leidmist. Järgmised testid viirusevastase ravikuuri ajal viiakse läbi 4., 12. ja 24. nädalal. Ja pärast HTP lõpetamist tehakse veel 24 nädalat pärast analüüsi. Siis - kord aastas.

Kvantitatiivne test

PCR-RNA kvantitatiivne analüüs, mida mõnikord nimetatakse viiruse koormuseks, määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni (spetsiifiline sisaldus) veres. Teisisõnu, viiruslik koormus on defineeritud teatud viirusliku RNA kogusena, mis võib olla teatud koguses verd (tavaliselt on 1 ml, mis on võrdne 1 cm kuubikuga). Katse tulemuste ühikud on rahvusvahelised standardseadmed, mis on jagatud ühe milliliitri (RÜ / ml). Viiruse sisu tundub mõnikord erinevalt, see sõltub laboratooriumidest, kus uurimistööd läbi viiakse. Hepatiidi C puhul kasutatakse kvantitatiivselt mõnikord mõnda väärtust, näiteks koopiaid / ml.

Peate mõistma, et C-hepatiidi raskusastme puudumine selle tüve kontsentratsioonis veres ei sõltu.

Kontrollige viiruse laadimist, et saaksite määrata haiguse nakkushaiguse määra. Seega võib viirusega nakatumise oht suureneda hepatiidi kontsentratsiooni tõusuga veres. Lisaks vähendab viiruse kõrge sisaldus ravi mõju. Seetõttu on väike viiruskoormus edukaks raviks väga soodsa tegurina.

Lisaks sellele on C-hepatiidi katse ja selle kindlaksmääramine PCR-iga olulist rolli haiguse ravi rakendamisel ja ravi edukuse kindlaksmääramisel. Katsetulemuste põhjal on planeeritud rehabilitatsioonikursus. Näiteks, kui hepatiidi viiruse spetsiifiline kontsentratsioon on liiga aeglane, viirusevastane ravi on pikenenud ja vastupidi.

Tänapäeva meditsiinis arvatakse, et koormus on suurem kui 800000 ME / ml. Üle 10 000 000 ME / ml koormust peetakse kriitiliseks. Kuid erinevatest riikidest pärit ekspertidelt ei ole ikka veel arvamust viiruse koormuse piiride kohta.

Kvantitatiivse testi sagedus

Üldjuhul tehakse hepatiidi kvantitatiivne analüüs enne viirusevastast ravi ja 3 kuud pärast meditsiiniliste protseduuride lõppu tehtud ravi kvaliteedi määramiseks.

Selle tulemusena loetakse kvantitatiivseteks testideks eespool esitatud proovide tulemuste kvantitatiivseks hindamiseks. Selle tulemusel väljastatakse otsus "mõõdetud vahemiku all" või "ei tuvastata veres".

Kvalitatiivse testi tundlikkuse parameeter on tavaliselt väiksem kui kvantitatiivse analüüsi tundlikkus. "Kadunud" transkript näitab, et mõlemat tüüpi testid ei leidnud viiruse RNA-d. Kui testi indeks oli "mõõdetud vahemikust madalamal" madalam, ei leitud kvantitatiivset tüüpi analüüsi tõenäoliselt hepatiidi RNA-d, kuigi see kinnitab väga väikese spetsiifilise sisaldusega viiruse olemasolu.

C-hepatiit ja selle genotüübid

Hepatiit C viiruse RNA genotüüpide diagnoosimisel esinevad erinevad C-hepatiidi geneetilised tüübid. Teadust on teada rohkem kui 10 viirusliku genoomi tüüpi, kuid meditsiinipraktikal on piisav, et välja selgitada mitmed genotüübid, millel on selles piirkonnas suurim osa. Geneetilise tüübi kindlaksmääramine mängib olulist rolli ravi ajastamise valimisel, mis on väga vajalik, kui arvestada hepatiidi ravimite suure hulga kõrvaltoimetega.

Viirusliku hepatiidi C ravimeetodid

Ainuke tõhus viis hepatiidi viiruse raviks on reeglina kahe ravimiga: interferoon-alfa koos ribaviriiniga. Üksikult ei ole need ravimid sama tõhusad. Ravimite soovitatav annus ja kasutamise aeg tuleks määrata ainult arst ja individuaalselt iga patsiendi jaoks. Nende ravimitega võib ravi kesta võtta 6-12 kuud.

Täna ei leiutata ravimeid, mis tagavad sajaprotsendilise viiruse taastumise. Õige ravi korral võib patsientide paranemine ulatuda kuni 90% juhtudest.

Rna hepatiit koos kvantifitseeritud normiga

C-hepatiidi viirus on võimeline vereringes paljunema ja põhjustada lümfoproliferatiivseid haigusi. Mitmete mutatsioonide tõttu väheneb keha immuunsuskaitse ning ilmnevad viiruse genotüübid ja alatüübid. Kindla tüüpi õige ja õigeaegne määramine sõltub viirusevastase ravi efektiivsusest. Infektsiooni oht on see, et haigus on asümptomaatiline. Ainult 15 protsenti 100-st võivad tunda iiveldust ja oksendamist, kehakaalu langust ja palavikku.

C-hepatiidi viiruse määratlus

Hepatiidi C normaalne määr on 40-60 nm suurune, kusjuures enamik lipiide on maksakahjustus, mis on tingitud ägeda või kroonilise haigusseisundi tekkimisest. C-hepatiit, täpsemalt Togaviridae perekonna RNA viirus, on äärmiselt püsiv, edastatakse vereülekandega või mittesteriilsete esemete, ebasobivate hügieenitarvete jms kaudu. Kvantitatiivne analüüs võimaldab teil uurida verd ja tuvastada nakatunud viiruse geneetiline struktuur.

Hepatiidi C ja selle genotüüpide määramiseks viiakse läbi kvantitatiivne analüüs. Sõltuvalt analüsaatorist saab määrata RNA viiruse esinemise kolme taseme.

Alatüübid võivad tekitada erinevaid modifikatsioone, seega peab analüsaatori spetsiifilisus ja tundlikkus olema sada protsenti. Lisaks haiguse tuvastamisele patsiendil on vaja määrata selle raskusaste. Mõnes laboris ei ole kõiki andmeid RNA viiruse dekodeerimise kohta, võib olla valepositiivne reaktsioon.

Nende näitajate uurimisel on hepatiit C uuringud täpsemad:

AlAT, AsAT; Leelispatare; LDH.

Nende näitajate tulemuste ja kehasüsteemi üldise seisundi jälgimiseks on kuvatud tulemus, mis näitab infektsiooni määra, veres C-hepatiidi rakkude arvu ja kuju ja arvu. See aitab kaasa paranemisele ja viirusevastase ravi efektiivsusele.

Hepatiidi C analüüsi liigid

Mitmemõõtmeline ahelreaktsioon (PCR) annab ideele DNA osakeste arvu patsiendianalüüsides ja tuvastab nakkusohu õigesti.

Nakkushaiguste tekitatud ained võivad esineda. Maksa infektsioon, näiteks C-hepatiit, on ravitav meie aja jooksul, kui see avastatakse õigeaegselt. Kui kahtlustatakse viirust, viiakse läbi PCR-analüüs.

Arvestades, et viiruse sümptomeid võib pikka aega maskeerida, ei pruugi inimene haiguse tekkimist tunda. Kuid põhjalikult uurides 60-70% juhtudest tuvastatakse C-hepatiit, esimene analüüs, mis on ELISA, siis PCR-diagnoos järgneb. Analüüs viiakse läbi teatud perioodidel, et määrata haiguse staadium ja määrata sobiv ravi. Selle tegemata ilma kõigi nende protseduuride rakendamiseta on võimalik vaktsineerida hepatiidi vastu.

Analüüs, mis hõlmab PCR-diagnoosi, annab pildi haigusest, kui aktiivne on viirus erinevates arenguperioodides.

Esiteks on olemas kvalitatiivne analüüs, mis üksnes kinnitab infektsiooni hüpoteesi ja seejärel kvantitatiivset, mis määrab maksa koormuse. Ideaalne võimalus oleks patsiendi geneetilisele materjalile C-hepatiidi negatiivne tulemus.

Kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs

On olemas kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Esimene on sisuliselt see, et see määrab infektsiooni esinemise veres. Ja see tähendab, et viirus nakatab terveid maksarakke. Kui patsiendil leitakse C-hepatiidi antikehad, viiakse kohe läbi kvalitatiivne test. Tulemuste määra peaks "veres mitte tuvastama". Viiruse kontsentratsiooni määramisel on vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkust, kuna patsiendid, kes saavad viirusevastast ravi, saavad analüüsi teha. Analüsaatori tundlikkuse määr ei tohiks olla väiksem kui 50 RÜ / ml.

Kui viirus avastatakse, tehakse kvantitatiivne analüüs, teisisõnu viiruse koormus, mis määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni veres ja haiguse raskusastme.

Viiruse RNA, mis on teatud koguses verd, määratletakse normina kiirusega 1 ml 1 sentimeetri kuubiku kohta. Pärast viiruskoormuse kvantifitseerimist on võimalik hinnata veel nakatamata keskkonda nakatumise määr. Niipea kui hepatiit C kontsentratsioon veres tõuseb, tuleb see eraldada keskkonda.

Esimestel etappidel on tähtis hepatiidi kontsentratsiooni kindlaksmääramine rehabilitatsiooni kiiruse kindlaksmääramiseks. Kui hepatiit C tõuseb üle 800000 RÜ / ml, siis peetakse seda liiga kõrgeks ja selle suurenemine on kuni 1 miljon - kriitiline. Kui kvantitatiivne vahemik on väiksem kui 400 tuhat RÜ / ml, siis leitakse, et nende ümbruse nakatumine on vähem tõenäoline. See näitaja selgitab, et C-hepatiit esineb väga väikestes annustes kehas. Analüüs ei suutnud määrata viiruse RNA osakeste kvantitatiivset väärtust, mistõttu on diagnoosi õigsuses korduvalt mitu korda määratud.

Kvantitatiivse analüüsi tulemused

Viirusliku koormuse hulga kindlaksmääramine patsiendi veres on nakkuse määra kindlakstegemine teistele.

Hepatiit C test

võimaldab hinnata viirusevastase ravi efektiivsust, infektsiooni taset ja nakatunud kudede arvu.

On oluline hoida ära haiguse progresseerumine, võtta õigeaegselt ennetusmeetmeid ja määrata PCR diagnostikale tuginev õige ravi. Kui tulemuste kohaselt on viiruse koormuse tase alla 400 tuh IU / ml, siis võib see kontsentratsioon olla minimaalne, mis näitab võimalikku täielikku taastumist. Positiivse tulemuse normiks on nakkuse puudumine.

PCR analüüsi tulemused:

Positiivne vastus tähendab, et bioloogilises materjalis esineb infektsioon. Analüüs võimaldab kindlaks määrata nakatunud rakkude täpse arvu. Negatiivne vastus viitab nakkuse puudumisele, mida hoolikalt läbi vaadatakse kehas.

Hepatiidi C kvantitatiivse määramise meetod on täpne ja informatiivne, mis viiakse läbi kõrgtundlikele seadmetele. Analüüsi tulemuste lahtikrüptimine võimaldab teil teada saada, kas nakkus ja selle eripära, et näha vähimat nakatunud rakkude arvu väga tundlikes analüsaatorites.

Analüüsimisel on harva antud valepositiivseid või vastupidiseid tulemusi, sagedamini toimub see immuunanalüüside uuringutes.

Viimasel ajal hakatakse otsimootorit "hepatiidi kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega" otsima Interneti-ressursside otsingumootorites.

Tõepoolest, hepatiidi viirus levib ja on ohtlik, haigus mõjutab maksa. Selle nimi pärineb latt. hepatiit on maksapõletik. Infektsioon toimub vere või sugulisel teel, sagedamini täiskasvanud on vanuses 25-50 aastat.

Selle haiguse on mitut tüüpi. C-hepatiit ei ereda raskusastmega, kuid 40-70% juhtudest muutub see krooniliseks, võib põhjustada tsirroosi ja vähki. See haigus nõuab andmete täpset diagnoosi ja tõlgendamist, mille jaoks on välja töötatud tehnikad. Üks neist on HCV RNA analüüs RNA abil PCR abil.

HCV RNA RNA analüüs PCR abil

RNA (ribonukleiinhape) on makromolekuli tüüp, mis on elusrakkude üks komponente. RNA vastutab geneetilise teabe kodeerimise eest. C-hepatiidi viirus sisaldab RNA molekuli ja kipub muteeruma. Tuntud on 6 selle alamtüübist, samuti paljudest alatüüpidest.

Sellel kroonilisel staadiumil esinev haigus põhjustab maksa fibroosi - sidekoed kasvavad, elundi struktuur laguneb järk-järgult. Fibroos on võimeline õigeaegseks raviks, kuna maks ei ole veel läbinud hävitavaid protsesse. Erinevalt tsirroosist, raske pöördumatu maksahaigus, mille korral fibroos võib tekkida, võtmata vajalikke meetmeid õigeaegselt.

Isik, kellel on kahtlus hepatiit B viiruse suhtes, määratakse selle antikehadega. Kui neid ei ole, siis haigus on välistatud, kui nad on kättesaadavad, siis nad kasutavad PCR-i (polümeraasi ahelreaktsiooni) meetodit. Molekulaarbioloogias on see eksperimentaalne, kuid nakkushaiguste diagnoosimise meetodite hulgas on see juhtiv koht. Sellega saate oluliselt suurendada molekulaarsete fragmentide kontsentratsiooni proovis. 10 päeva pärast nakatumist on RNA juba juba veres leidnud.

See meetod on ainus, mis suudab varases staadiumis haigust avastada. Muul viisil (näiteks biokeemiliste vereanalüüsidega) seda ei saa teha, kuna maks ei ole veel mõjutatud.

C-hepatiidi testid dekodeerimisega (PCR) on usaldusväärne näitaja viiruse olemasolust inimveres.

Seda meetodit avastas 1993 biokeemik Kerry Mullis, mille eest ta võitis Nobeli preemia. PCR oli läbimurre meditsiinis ja teaduses, kuna see võimaldas kiiresti ja täpselt tuvastada nakkusi veres ja teistes inimeste bioloogilistes materjalides. Teisisõnu on see meetod kiirendanud nakkushaiguste diagnoosimist.

HCV RNA RNA analüüs PCR abil on efektiivne järgmistel põhjustel:

on hästi tundlik - isegi väheses koguses viirust veres on tuvastatud; määratakse kindlaks viirus ise, mitte selle poolt loodud kõrvalsaadused; Kindla patogeeni tüüp on kindlaks määratud.

HCV RNA kvantitatiivse analüüsi erinevused kvalitatiivselt

PCR meetod hõlmab kahte peamist viisi, kuidas uurida bioloogilist materjali C-hepatiidi viiruse otsimiseks:

Nendel uuringutel on erinevad ülesanded.

Hepatiidi kvalitatiivne analüüs dekodeerimisega kinnitab viiruse olemasolu pärast haiguse antikehade leidmist juba veres. Kui uuring andis positiivse tulemuse, tuvastatakse haigus. Teisisõnu, inimene on nakatunud. Kui saadakse negatiivne tulemus, tähendab see seda, et inimene pole nakatunud või viiruse kontsentratsioon on liiga väike. Sellist kontsentratsiooni ei tuvastata.

Lisaks sellele põhineb haiguse kliiniline pilt hepatiit C markeritel ja analüüsi tõlgendamisel. Peamised markerid on immunoglobuliinid (antikehad) M ja G. Nende esinemine patsiendi veres näitab tervislikule organismile iseloomuliku protsessi. Nende antikehade olemasolu alusel määrab patsient reeglina esmase diagnoosi.

Kvantitatiivne analüüs on ette nähtud antikehade esmaseks avastamiseks ja vajadusel raviks.

Hepatiidi C kvantitatiivne analüüs on ette nähtud segatüüpi hepatiidi avastamiseks (mitmete viirustega nakatamine korraga).

Kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega toimub selleks, et:

lõpliku diagnoosi selgitamine; hoone prognoosid haiguse kulgu ja selle ravi - pikendamine, ravi vähendamine või taktika muutmine; jälgimisravi.

Rahvusvaheline IU / ml näitaja tähendab, et uuritakse RNA kogust 1 ml veres. Kõrge kvantitatiivne näitaja näitab teise inimese nakatumise suuremat tõenäosust.

Selleks, et tulemused oleksid tõesed, peate enne vere annetamist järgima kehtestatud režiimi:

tungida laborisse tühja kõhuga, viimane kord, kui võite süüa 8 tundi enne protseduuri; kaks päeva enne uuringut on keelatud alkohol, rasv ja praetud toidud; ultraheli, massaaži, füsioteraapiat enne uuringut ei saa läbi viia; ravim on päevas keelatud, kui teatud ravimite sissevõtmist on võimatu tühistada, teatatakse sellest enne vereproovide võtmist; enne protseduuri soovitatakse vähendada füüsilist ja närvi koormust nii palju kui võimalik.

Nende nõuete täitmine aitab saavutada hepatiidi C kvantitatiivse analüüsi õigeid tulemusi.

Kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine

Pärast kvantitatiivsete analüüsi indikaatorite saamist on vaja hepatiidi C testide tulemuste dešifreerida. Tulemused arvutatakse nii IU / ml ühikutes kui ka koopiatel ml kohta. Tulemuste saamiseks koopiateks teisendamiseks kasutage mitut tehnikat.

HCV monitor (konversioonitegur ME-le - 2,7); LCX HCV RNA (ümberarvestustegur ME-le - 3,8).

Tabel HCV RNA kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine PCR abil.

Millised on hepatiit C sisalduse määramise normid?

C-hepatiidi viirus on võimeline vereringes paljunema ja põhjustada lümfoproliferatiivseid haigusi. Mitmete mutatsioonide tõttu väheneb keha immuunsuskaitse ning ilmnevad viiruse genotüübid ja alatüübid. Kindla tüüpi õige ja õigeaegne määramine sõltub viirusevastase ravi efektiivsusest. Infektsiooni oht on see, et haigus on asümptomaatiline. Ainult 15 protsenti 100-st võivad tunda iiveldust ja oksendamist, kehakaalu langust ja palavikku.

C-hepatiidi viiruse määratlus

Hepatiidi C normaalne määr on 40-60 nm suurune, kusjuures enamik lipiide on maksakahjustus, mis on tingitud ägeda või kroonilise haigusseisundi tekkimisest. C-hepatiit, täpsemalt Togaviridae perekonna RNA viirus, on äärmiselt püsiv, edastatakse vereülekandega või mittesteriilsete esemete, ebasobivate hügieenitarvete jms kaudu. Kvantitatiivne analüüs võimaldab teil uurida verd ja tuvastada nakatunud viiruse geneetiline struktuur.

Hepatiidi C ja selle genotüüpide määramiseks viiakse läbi kvantitatiivne analüüs. Sõltuvalt analüsaatorist saab määrata RNA viiruse esinemise kolme taseme.

Alatüübid võivad tekitada erinevaid modifikatsioone, seega peab analüsaatori spetsiifilisus ja tundlikkus olema sada protsenti. Lisaks haiguse tuvastamisele patsiendil on vaja määrata selle raskusaste. Mõnes laboris ei ole kõiki andmeid RNA viiruse dekodeerimise kohta, võib olla valepositiivne reaktsioon.

Nende näitajate uurimisel on hepatiit C uuringud täpsemad:

Nende näitajate tulemuste ja kehasüsteemi üldise seisundi jälgimiseks on kuvatud tulemus, mis näitab infektsiooni määra, veres C-hepatiidi rakkude arvu ja kuju ja arvu. See aitab kaasa paranemisele ja viirusevastase ravi efektiivsusele.

Hepatiidi C analüüsi liigid

Mitmemõõtmeline ahelreaktsioon (PCR) annab ideele DNA osakeste arvu patsiendianalüüsides ja tuvastab nakkusohu õigesti.

Nakkushaiguste tekitatud ained võivad esineda. Maksa infektsioon, näiteks C-hepatiit, on ravitav meie aja jooksul, kui see avastatakse õigeaegselt. Kui kahtlustatakse viirust, viiakse läbi PCR-analüüs.

Arvestades, et viiruse sümptomeid võib pikka aega maskeerida, ei pruugi inimene haiguse tekkimist tunda. Kuid põhjalikult uurides 60-70% juhtudest tuvastatakse C-hepatiit, esimene analüüs, mis on ELISA, siis PCR-diagnoos järgneb. Analüüs viiakse läbi teatud perioodidel, et määrata haiguse staadium ja määrata sobiv ravi. Selle tegemata ilma kõigi nende protseduuride rakendamiseta on võimalik vaktsineerida hepatiidi vastu.

Kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs

On olemas kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Esimene on sisuliselt see, et see määrab infektsiooni esinemise veres. Ja see tähendab, et viirus nakatab terveid maksarakke. Kui patsiendil leitakse C-hepatiidi antikehad, viiakse kohe läbi kvalitatiivne test. Tulemuste määra peaks "veres mitte tuvastama". Viiruse kontsentratsiooni määramisel on vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkust, kuna patsiendid, kes saavad viirusevastast ravi, saavad analüüsi teha. Analüsaatori tundlikkuse määr ei tohiks olla väiksem kui 50 RÜ / ml.

Kui viirus avastatakse, tehakse kvantitatiivne analüüs, teisisõnu viiruse koormus, mis määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni veres ja haiguse raskusastme.

Viiruse RNA, mis on teatud koguses verd, määratletakse normina kiirusega 1 ml 1 sentimeetri kuubiku kohta. Pärast viiruskoormuse kvantifitseerimist on võimalik hinnata veel nakatamata keskkonda nakatumise määr. Niipea kui hepatiit C kontsentratsioon veres tõuseb, tuleb see eraldada keskkonda.

Esimestel etappidel on tähtis hepatiidi kontsentratsiooni kindlaksmääramine rehabilitatsiooni kiiruse kindlaksmääramiseks. Kui hepatiit C tõuseb üle 800000 RÜ / ml, siis peetakse seda liiga kõrgeks ja selle suurenemine on kuni 1 miljon - kriitiline. Kui kvantitatiivne vahemik on väiksem kui 400 tuhat RÜ / ml, siis leitakse, et nende ümbruse nakatumine on vähem tõenäoline. See näitaja selgitab, et C-hepatiit esineb väga väikestes annustes kehas. Analüüs ei suutnud määrata viiruse RNA osakeste kvantitatiivset väärtust, mistõttu on diagnoosi õigsuses korduvalt mitu korda määratud.

Kvantitatiivse analüüsi tulemused

Viirusliku koormuse hulga kindlaksmääramine patsiendi veres on nakkuse määra kindlakstegemine teistele.

PCR analüüsi tulemused:

  1. Positiivne vastus tähendab, et bioloogilises materjalis esineb infektsioon. Analüüs võimaldab kindlaks määrata nakatunud rakkude täpse arvu.
  2. Negatiivne vastus viitab nakkuse puudumisele, mida hoolikalt läbi vaadatakse kehas.

Hepatiidi C kvantitatiivse määramise meetod on täpne ja informatiivne, mis viiakse läbi kõrgtundlikele seadmetele. Analüüsi tulemuste lahtikrüptimine võimaldab teil teada saada, kas nakkus ja selle eripära, et näha vähimat nakatunud rakkude arvu väga tundlikes analüsaatorites.

Analüüsimisel on harva antud valepositiivseid või vastupidiseid tulemusi, sagedamini toimub see immuunanalüüside uuringutes.

C-hepatiidi markerid ja HCV RNA kvantitatiivsete tulemuste tõlgendamine

Viimasel ajal hakatakse otsimootorit "hepatiidi kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega" otsima Interneti-ressursside otsingumootorites.

Tõepoolest, hepatiidi viirus levib ja on ohtlik, haigus mõjutab maksa. Selle nimi pärineb latt. hepatiit on maksapõletik. Infektsioon toimub vere või sugulisel teel, sagedamini täiskasvanud on vanuses 25-50 aastat.

Selle haiguse on mitut tüüpi. C-hepatiit ei ereda raskusastmega, kuid 40-70% juhtudest muutub see krooniliseks, võib põhjustada tsirroosi ja vähki. See haigus nõuab andmete täpset diagnoosi ja tõlgendamist, mille jaoks on välja töötatud tehnikad. Üks neist on HCV RNA analüüs RNA abil PCR abil.

HCV RNA RNA analüüs PCR abil

RNA (ribonukleiinhape) on makromolekuli tüüp, mis on elusrakkude üks komponente. RNA vastutab geneetilise teabe kodeerimise eest. C-hepatiidi viirus sisaldab RNA molekuli ja kipub muteeruma. Tuntud on 6 selle alamtüübist, samuti paljudest alatüüpidest.

Sellel kroonilisel staadiumil esinev haigus põhjustab maksa fibroosi - sidekoed kasvavad, elundi struktuur laguneb järk-järgult. Fibroos on võimeline õigeaegseks raviks, kuna maks ei ole veel läbinud hävitavaid protsesse. Erinevalt tsirroosist, raske pöördumatu maksahaigus, mille korral fibroos võib tekkida, võtmata vajalikke meetmeid õigeaegselt.

Isik, kellel on kahtlus hepatiit B viiruse suhtes, määratakse selle antikehadega. Kui neid ei ole, siis haigus on välistatud, kui nad on kättesaadavad, siis nad kasutavad PCR-i (polümeraasi ahelreaktsiooni) meetodit. Molekulaarbioloogias on see eksperimentaalne, kuid nakkushaiguste diagnoosimise meetodite hulgas on see juhtiv koht. Sellega saate oluliselt suurendada molekulaarsete fragmentide kontsentratsiooni proovis. 10 päeva pärast nakatumist on RNA juba juba veres leidnud.

See meetod on ainus, mis suudab varases staadiumis haigust avastada. Muul viisil (näiteks biokeemiliste vereanalüüsidega) seda ei saa teha, kuna maks ei ole veel mõjutatud.

Seda meetodit avastas 1993 biokeemik Kerry Mullis, mille eest ta võitis Nobeli preemia. PCR oli läbimurre meditsiinis ja teaduses, kuna see võimaldas kiiresti ja täpselt tuvastada nakkusi veres ja teistes inimeste bioloogilistes materjalides. Teisisõnu on see meetod kiirendanud nakkushaiguste diagnoosimist.

HCV RNA RNA analüüs PCR abil on efektiivne järgmistel põhjustel:

  • on hästi tundlik - isegi väheses koguses viirust veres on tuvastatud;
  • määratakse kindlaks viirus ise, mitte selle poolt loodud kõrvalsaadused;
  • Kindla patogeeni tüüp on kindlaks määratud.

HCV RNA kvantitatiivse analüüsi erinevused kvalitatiivselt

PCR meetod hõlmab kahte peamist viisi, kuidas uurida bioloogilist materjali C-hepatiidi viiruse otsimiseks:

Nendel uuringutel on erinevad ülesanded.

Hepatiidi kvalitatiivne analüüs dekodeerimisega kinnitab viiruse olemasolu pärast haiguse antikehade leidmist juba veres. Kui uuring andis positiivse tulemuse, tuvastatakse haigus. Teisisõnu, inimene on nakatunud. Kui saadakse negatiivne tulemus, tähendab see seda, et inimene pole nakatunud või viiruse kontsentratsioon on liiga väike. Sellist kontsentratsiooni ei tuvastata.

Lisaks sellele põhineb haiguse kliiniline pilt hepatiit C markeritel ja analüüsi tõlgendamisel. Peamised markerid on immunoglobuliinid (antikehad) M ja G. Nende esinemine patsiendi veres näitab tervislikule organismile iseloomuliku protsessi. Nende antikehade olemasolu alusel määrab patsient reeglina esmase diagnoosi.

Kvantitatiivne analüüs on ette nähtud antikehade esmaseks avastamiseks ja vajadusel raviks.

Hepatiidi C kvantitatiivne analüüs on ette nähtud segatüüpi hepatiidi avastamiseks (mitmete viirustega nakatamine korraga).

Kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega toimub selleks, et:

  • lõpliku diagnoosi selgitamine;
  • hoone prognoosid haiguse kulgu ja selle ravi - pikendamine, ravi vähendamine või taktika muutmine;
  • jälgimisravi.

Selleks, et tulemused oleksid tõesed, peate enne vere annetamist järgima kehtestatud režiimi:

  • tungida laborisse tühja kõhuga, viimane kord, kui võite süüa 8 tundi enne protseduuri;
  • kaks päeva enne uuringut on keelatud alkohol, rasv ja praetud toidud;
  • ultraheli, massaaži, füsioteraapiat enne uuringut ei saa läbi viia;
  • ravim on päevas keelatud, kui teatud ravimite sissevõtmist on võimatu tühistada, teatatakse sellest enne vereproovide võtmist;
  • enne protseduuri soovitatakse vähendada füüsilist ja närvi koormust nii palju kui võimalik.

Nende nõuete täitmine aitab saavutada hepatiidi C kvantitatiivse analüüsi õigeid tulemusi.

Kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine

Pärast kvantitatiivsete analüüsi indikaatorite saamist on vaja hepatiidi C testide tulemuste dešifreerida. Tulemused arvutatakse nii IU / ml ühikutes kui ka koopiatel ml kohta. Tulemuste saamiseks koopiateks teisendamiseks kasutage mitut tehnikat.

  • HCV monitor (konversioonitegur ME-le - 2,7);
  • LCX HCV RNA (ümberarvestustegur ME-le - 3,8).

Tabel HCV RNA kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine PCR abil.

Medinfo.club

Portaal maksa kohta

HCV kvantitatiivne analüüs ja dekodeerimine

C-hepatiit on haigus, mis võib paljuneda tervete maksarakkudega ja provotseerida proliferatiivsete haiguste ilmnemist. Kaasaegses maailmas, kui hepatiidi viirus on läbinud teatud mutatsiooni, on inimese immuunsüsteem ohustatud, sest võrreldes infektsiooniga on see tähtsusetu. Samuti väärib märkimist, et mitte kõigil patsientidel ei esine esmakordselt haiguse esimesi tunnuseid, eriti varases staadiumis.

C-hepatiidi viiruse RNA-analüüs on kvantitatiivne uuring, mille norm on patsiendi veres viiruserakkude esinemise mõõdukas arv. Statistika kohaselt on ligikaudu 31% patsientidest sellest haigusest täielikult ravitud, kui see on algstaadiumis.

Meditsiinipraktikas märgivad arstid, et 4 miljonit nakatatud sümptomit ja esimest sümptomeid ei esine üldse, kuigi tähelepanuta jäetud hepatiidi vorm võib põhjustada maksatsirroosi või vähki.

Praegu kontrollitakse "vereülekande" protseduuri ajal seda verd C-hepatiidi viiruse esinemise suhtes, kuna see haigus levib doonorverega.

Täna on C-hepatiidi ravimid juba maailmas ilmnenud, kusjuures efektiivsus on lähedane 100% -le. Kaasaegne farmaatsiatööstus on loonud ravimeid, mis praktiliselt ei sisalda kõrvaltoimeid. Paljud patsiendid saavad esimesi tulemusi, mis leevendavad sümptomeid ja vähendavad viiruse koormust pärast nädala möödumist. Lisateavet hepatiidi ravimite kohta India tootest leiate meie eraldi artiklist.

Sofosbuvir Express on osutunud India hepatiit C ravimite transportimise turul. See ettevõte edukalt aitab inimestel haigusest enam kui kaks aastat taastuda. Siit leiate rahulolevate patsientide arvustused ja videod. Nende kontol on rohkem kui 4000 inimest, kes taastunud tänu ostetud ravimitele. Ärge jätke oma tervist kinni, minge www.sofosbuvir-express.com või helistage 8-800-200-59-21

PCR-uuringute liigid

PCR (polümeraasi ahelreaktsioon) on kõige kaasaegsem ja efektiivsem viis viiruse geeni ja selle võimaluste uurimiseks. Selline diagnostika on võimeline kindlaks määrama haiguse tüübi ja määrama selle edasise mutatsiooni patsiendi kehas.

Analüüs viiakse läbi, võttes vere, mis seejärel paigutatakse spetsiaalsetele reagentidele, milles toimub rakkude kloonimine.

Ühelt lahtrilt selgub kaks ja nii edasi. Selle tulemusena on sadu DNA-d, mille kaudu saate patogeeni diagnoosida ja varakult tuvastada viiruse.

Seetõttu on PCR jaotatud mitut tüüpi:

  • kvalitatiivne analüüs - tunneb ära geenide infektsiooni veres. Kui patsiendi kvalitatiivse analüüsi ajal kinnitatakse haigust, siis tuleb nakkuse ulatuse kindlakstegemiseks läbi viia kvantitatiivne analüüs. Selle diagnoosi tulemusena kirjutavad eksperdid "avastatud / mitte tuvastatud". "Tuvastatud" - ütleb, et haigus esineb kehas ja selle RNA on juba identifitseeritud. "Ei leitud" - näitab viiruse geeni puudumist proovis, see tähendab, et hepatiidi RNA puudub. Kuid arstid soovitavad uuesti testida 10 päeva pärast.
  • kvantitatiivne analüüs - määratakse vere infektsiooni geneetilise materjali kogus. Selline diagnoos aitab kindlaks teha haiguse tõsiduse ja kogu kliinilise ajaloo. Sellise analüüsi tulemusena saab kirjutada ainult "Positiivne / negatiivne / kehtetu". "Positiivne" - tähistab nakkavat koormust. Arst määrab haiguse diagnoosimise meetodi, et määrata ravi tõhusus 4, 12, 16 ja 24 nädala jooksul. Kui viiruse indikaator jääb vahemikku 8x10 RÜ / ml, on ravi efektiivne, kui määr on kõrgem, siis ei. "Negatiivne" - nakkusgeeni ei leitud. "Kehtetu" - see juhtub, kui viiruse geen avastati kvalitatiivselt, kuid see ei tuvastatud kvantitatiivse analüüsi käigus. Sarnane on tingimusel, et infektsioonide tase on madalam.

Erinevused kvalitatiivsel ja kvantitatiivsel analüüsil

C-hepatiidi viirust diagnoositakse peamiselt kvantitatiivse analüüsi tegemiseks, mille dekodeerimine on vajalik haiguse õigeks tõlgendamiseks. Kuid vaatamata sellele on kvalitatiivsetel ja kvantitatiivsetel diagnostilistel meetoditel erinevused, näiteks: uurimisele määratud roll ja ülesanded - kvalitatiivsed - kinnitavad infektsiooni esinemist pärast viiruse tuvastatud antikehade olemasolu ja kvantitatiivset - sekundaarset meetodit, mis leevendab või kinnitab haigust, et teha õige ja ainus diagnoos.

Kvantitatiivsete uuringute tõlgendamine

Pärast diagnoosi saavad tulemust tõlgendada ainult arstid, kuna neid ei tohiks näidetes näidata, vaid sõnades. Statistika järgi on kõige tundlikum proovimaterjal kvantitatiivne PCR. Selleks, et mõista, kas organismis esineb viirus, on vaja mõista ja teada, et hepatiidi C kvantitatiivset analüüsi tõlgendatakse infektsiooni digitaalse nimetuse (standardi) abil:

C-hepatiidi viiruse RNA ja kvantitatiivne määramine

"Hepatiit C viiruse (HVC) geenide identifitseerimine patsiendi veres on selle nakkusliku patoloogia laboratoorse diagnoosi teine ​​etapp. Selle patogeeni tuvastamiseks, millel puudub rakumembraan ja järelikult pinnaantigeenid, kasutatakse polümeraasi ahelreaktsiooni meetodit. Selle meetodi abil määratakse molekul otseselt, kus kogu selle geneetiline teave on kodeeritud - RNA.

RNA - Ribonukleiinhape koos DNA-ga on osa kõigi elusorganismide rakkudest. C-hepatiidi viirus sisaldab RNA molekuli ja on võimeline selle muteeruma.

HVC genoomi test on tavaliselt välja kirjutatud pärast üldist, biokeemilist vereanalüüsi ja positiivset vastust antikehadele (anti-HVC).

Mida see tähendab?

HVC-vastaste antikehade uurimine on skriinimine, st seda saab kasutada inimeste suurte populatsioonide uurimiseks (arstid, rasedad, haiglahaiged, doonorid, süstivad uimastitarbijad, HIV-nakkusega inimesed). Anti-HVC laboranalüüsi negatiivne tulemus näitab, et patsiendi veres ei tuvastatud viiruse immuunvastust. Sellistel juhtudel saab negatiivset tulemust:

Kui inimene pole kunagi olnud nakatunud hepatiit C vastu

Kui laborikatsete süsteemi tundlikkus oli madalam HVC-vastase kontsentratsioonist.

Kui nakkus tekkis vähem kui 2 kuud tagasi ja HVV-vastane veri ei piisa, et määrata. Kui inimtegurite tõttu on vale negatiivne reaktsioon.

Kui tulemuseks on see, et patsiendil leiti HVC-vastased antikehad, tähendab see seda, et C-hepatiidi viirus oli uuringu ajal patsiendi kehas või mõni aeg tagasi veres. Anti-HVC-ga positiivse tulemuse korral on vaja täiendavaid laboratoorseid uuringuid, mis tuvastavad patogeeni enda geneetilise materjali, määravad kindlaks tema geenide kontsentratsiooni (viiruse koormus, vireemia) ja genotüübi loomist.

Hepatiit C viiruse RNA analüüs

Laboratoorsetes tingimustes võib HVC genoomi tuvastada mitmete uuringute abil:

hargnenud DNA (p-DNA);

transkriptsiooni amplifikatsioon (TMA);

polümeraasi ahelreaktsioon (PCR).

P-DNA meetod on odav ja hõlbus viis viiruse genoomi avastamiseks paljudes uuritud inimestest. Selle peamine puudus on madal tundlikkus: see näitab HVC ainult siis, kui selle kontsentratsioon ületab 500 RÜ / ml.

Transkriptsioonilise amplifitseerimise meetod tuvastab seerumis viiruse nukleiinhapped. Analüüsil on suur tundlikkus (5-10 RÜ / ml), kuid see ei ole veel piisavalt integreeritud üldlevinud laboripraktikasse.

Venemaal PCR-meetod on kõige suurema tundlikkusega (50-60 RÜ / ml) kõige tavalisem ja ligipääsetav laborianalüüs.

PCR-uuring tehakse igas kliinilises laboris, millel on asjakohane akrediteering. Selle diagnostilise meetodi väga oluline nüanss, mis mõjutab analüüsi tulemust, on laboris kasutatava katsesüsteemi tundlikkus. Näiteks võimaldab diagnostiline tundlikkus 60 RÜ / ml, nagu Invitro Laboratories'is, viirusliku RNA avastamist 3 kuud pärast nakatumist. Katsesüsteemi madalal tundlikkusel ei pruugi patogeeni geene isegi 4 kuud pärast nakatumist avastada.

Hepatiit C viiruse RNA: PCR-meetod

PCR-meetodil on mitmeid eeliseid teiste HVC geenide tuvastamisel tehtavate laboratoorsete testide järele:

kõrge tundlikkus. Meetod võimaldab määrata patogeeni geneetilist materjali isegi selle minimaalse kontsentratsiooniga proovis;

suur spetsiifilisus. Määrab konkreetse genotüübi viiruse geenide seas erinevate DNA-de ja teiste patogeenide RNA-de, mis võimaldab patogeeni genotüpiseerimist;

hoidmise kiirus. Patogeeni pika protsessi puudumine lühendab tulemuse saavutamise aega kuni mitu tundi; analüüsi universaalsus.

Universaalne uurimisprotseduur võimaldab ühe inimese vereproovi samaaegset kasutamist erinevate patogeenide geneetilise materjali avastamiseks. Need eelised võimaldavad pidada PCR-i viirusliku hepatiit C laboratoorsel diagnoosimisel "kullastandardiks" koos anti-HVC ensüümi immunoloogilise testiga.

PCR on uuring, mida kasutatakse indiviidi veres HVC geenide määramiseks. Uuring koosneb mitmest etapist:

Biomaterjali proovide võtmine.

RNA koopiate kontsentratsiooni suurendamine korduvalt valitud proovis.

Geneetilise materjali avastamine spetsiaalsete katsesüsteemide abil.

Pärast patsiendi venoosse vere võtmist viiakse läbi kunstlikult HVC geenide mitmekordse replikatsiooni (amplifitseerimine, kopeerimine) protsessi käivitamine.

Selleks, et mõnel juhul muuta mitu korda tuumamaterjali koos biomaterjaliga. Kui katseklaasis oleva RNA koopiate arv jõuab soovitud väärtusele, viiakse patogeenide tuvastamine läbi spetsiaalse katse diagnostika.

kvalitatiivne (tuvastab viiruse olemasolu),

kvantitatiivne (määrab viiruse geenide kontsentratsiooni mahuühiku kohta)

genotüpiline (määrab patogeeni genotüübi).

Hepatiit C RNA: kvalitatiivne analüüs

Kvaliteetse PCR-i ülesanne on kindlaks määrata HVC esinemine esitatud biomaterjalis. See uuring viiakse tavaliselt läbi haiguse diagnoosimise või veo tuvastamiseks. Määrake see pärast HVC-vastase antikeha tuvastamist ELISA-ga.

Hepatiidi C diagnoosimiseks piisab, kui tuvastada HCV geenimaterjal kvalitatiivselt, st loendamata selle kontsentratsiooni veres. Kvaliteetse PCR-i tulemus võib olla: "RNA tuvastatakse" või "RNA ei tuvastata".

Meetodi täpsus vastab 95% -le. Samal ajal jõuab testi diagnostika iseenesest täpselt 100% ja laboratoorseteks uuringuteks on alati 5% inimfaktor. Vale negatiivse analüüsi vältimiseks, eriti madala vireemiaga inimestel, on uuringus kasutatud diagnostilise süsteemi kõrge tundlikkus vajalik. Katsesüsteemi tundlikkus ei tohiks olla väiksem kui 60 RÜ / ml.

Hepatiit C RNA: kvantitatiivne analüüs

Kvantitatiivne analüüs on ette nähtud, kui peate teadma vireemia taset inimkehas. Selle uuringu tegemise näpunäited on järgmised:

kõrge kvaliteediga PCR-i positiivne tulemus tingis viiruse antikehade tuvastamise;

patoloogia faas;

hepatiidi viiruse koormuse määramine;

kombineeritud viirusevastaste ravimite valik;

viroloogilise vastuse jälgimine viirusevastasele ravile;

ägeda hepatiit C ülemineku tõenäosuse hindamine kroonilisele.

Analüüsi tulemus väljendatakse IU / ml (rahvusvahelised ühikud 1 ml seerumis) või koopiate / ml (viiruse geenide koopiate arv 1 ml seerumis). Kvantitatiivne PCR ei ole normaalne: tavaliselt ei tohiks tuvastada HVC geeni inimveres. Uuringu tulemusi võrreldakse võrdlusväärtustega, mis on kehtestatud erineva viirusliku koormuse taseme jaoks.

Seega näitavad näitajad (RÜ / ml):

alla 4 x 10 x 5 peetakse madalaks vireemiaks;

alates 4 × 10 * 5 kuni 8 × 10 * 5 - keskmine;

üle 8 × 10 * 5 - kõrge.

Rohkem viiruse RNA koopiaid veres, seda agressiivsem haigus ja seda suurem on viiruse ülekandumise risk teistele inimestele. Kuid viiruse koormuse tase pole ainus näitaja, mis mõjutab patoloogia raskust ja patsiendi edasist prognoosimist: samuti on oluline patogeeni genotüüp.

Õige ravirežiimi määramiseks on vajalik genotüübi määramine. Samuti määrab see kindlaks patsiendi tervise ja elu prognoosi. Näiteks põhjustab viiruse genotüüp 3 sageli maksa fibroosi või maksatsirroosi, võrreldes genotüübi 1 kandjatega.

C-hepatiit: analüüsid ja transkriptsioon

RNA C-hepatiidi diagnoosimist ei saa teha ainult PCR-i kvalitatiivse ja / või kvantitatiivse analüüsi tulemustega: HVC määramine ja viiruse koormuse määramine ei ole piisav, et välja pakkuda piisavat viirusevastast ravi. Potentsiaalset patsienti tuleb uurida põhjalikult (kliiniliselt, laboratoorselt, instrumenteeritud), et saada objektiivne pilt patoloogilisest olukorrast. Hepatiidi C diagnoosi tuvastamiseks määrake õigesti uuringute kogum, mille tulemusi saab õigesti arendada ainult arst.

Hepatiidi C RNA kvantifitseerimine

Praegu mõõdetakse HCV RNA kontsentratsiooni (viiruse koormus) CHC-s rahvusvahelistes ühikutes milliliitri plasmas (RÜ / ml). Erinevates uuringutes peetakse madala viiruskoormusega väärtusi alla 400 000-800 000 RÜ / ml.

Maksakahjustuse määr CHC-s ei sõltu viiruse koormusest, aga enne ravi alustamist viiruse suure koormusega patsiendid reageerivad vähem interferooniravimite viirusevastasele ravile. Madal viiruskoormus on iseseisev tegur, mis mõjutab püsiva viroloogilise ravivastuse saavutamist.

HCV RNA kvantitatiivne määramine vereplasmas enne CHC viirusevastase ravi algust ja 12. ravinädalat kasutatakse ravi efektiivsuse jälgimiseks.

Eksami näited. Kroonilise hepatiit C-ga patsiendid enne viirusevastase ravi alustamist ja 12. ravinädalal.

Laboratoorsete tulemuste tõlgendamise tunnused. Vähendatud HCV RNA kontsentratsioon alla 2 μg10 12-nda ravinädala esialgsest tasemest näitab ravimi ebaefektiivsust ja näitab ravi katkestamist.

HCV RNA kontsentratsiooni vähendamine rohkem kui 2 μg10 12-nda ravinädala esialgsest tasemest näitab see ravi efektiivsust ja on näidustuseks, et jätkata ravi.

Võimalike vastunäidustuste korral on vaja konsulteerida spetsialistiga

Autoriõigus FBUN Kesk Epidemioloogiauuringute Instituut, Rospotrebnadzor, 1998-2018


Seotud Artiklid Hepatiit