Hepatiit C viiruse diagnoosimine
Hepatiit C viirus (HCV) on Flaviviridae perekonnast pärinev RNA-d sisaldav viirus. See nakk suudab korrutada vererakkudesse (monotsüüdid, neutrofiilid, B-lümfotsüüdid ja makrofaagid) ning mõjutada ka maksa enda rakke - hepatotsüüte. Selle mutatsioonide aktiivsuse tõttu on seda tüüpi hepatiit võimeline vältima kokkupuudet inimese immuunsüsteemiga.
Selles viiruses on 11 genotüüpi ja selle alamtüüpide mass, mis erinevad maksakahjustuse tasemest ja mõjutavad hepatiidi ravi kestust. Sellised mitmesugused C-hepatiidid nõuavad erinevaid viirusevastase ravimeetodeid. Näiteks tuleb hepatiit 1 ja 4 genotüüpe ravida 48 nädala vältel ja 2. ja 3. tüüpi viiruste raviks, võib see kesta ainult 24 nädalat.
Pärast seda, kui hepatiidi C kiire katse tulemus oli positiivne, viidi läbi viiruse RNA tuvastamiseks vereproovides PCR-analüüs.
PCR-diagnostika
Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on eksperimentaalne meetod viiruste tuvastamiseks. Selline C-hepatiidi analüüs võib märkimisväärselt suurendada mõnede DNA fragmentide või RNA viiruse kontsentratsiooni ülekantud proovides. See võimaldab neid ära tunda ja isegi numbrit lugeda.
See C-hepatiidi test viiakse läbi vastavalt järgmisele protseduurile:
- Proovitorusse sisestatakse vereproov (geneetiline materjal), mis võib sisaldada soovitud hepatiidi geeni. Sellel on paigutatud spetsiaalsed ained, praimerid, need on lühiajalised segmendid soovitud geenist, mis on keemiliselt sünteesitud. Sellele anumile on lisatud ka DNA või RNA polümeraas, mis suudab luua nukleiinhappe ahelaid, mis on täiesti identsed originaaliga. Saadud kompositsioonile lisati valikut vabu nukleotiide, mis on DNA ja RNA spetsiifilised ehitusmaterjalid, millest üks sisaldab radioaktiivse fosfori väikseid osakesi.
- Saadud segu kuumutatakse esialgu 95 kraadini, mille tagajärjel lahustuvad mõlemad DNA helikellid omavahel normaalses olekus.
- Analüüsi jätkamiseks jahutatakse ravimit, mille järel praimerid kinnituvad hepatiit-viiruse genoomi soovitud sektsioonile, takistades DNA moodustumist topelt-heeliksiks. Kui segu jahtub, otsib polümeraas nukleotiidide ahelaid. Selle ensüümi kinnitamise ajal libiseb see DNA ahelaga (plokina mööda köi) ja kahekordsel heeliksil ei saa seda "töödelda", segu soojendatakse sel eesmärgil.
- Analüüsi pikendamiseks viiakse uuesti läbi kuumutamine, mis viib nukleotiidide ahelate eraldumiseni. Kui proovid viiakse läbi sellistes PCR-tsüklites, suureneb soovitud hepatiidi geenide arv geomeetrilises proportsioonis ja ülejäänud geneetilised materjalid toodetakse (moodustatakse) ainult lineaarsel kujul.
- Uuringu lõpetamiseks puhastatakse lahus jääk-nukleotiidiosakestest. Need eraldatakse elektroforeesiga, eraldades DNA ahela molekulmassi parameetrid. Sellised hepatiit C testid, kasutades PCR-i, võimaldavad teil määrata, kas proovis on olemas soovitud viiruse geenid või mitte.
Selle testi eeliseks on PCR reaktsiooni väga kõrge künnis. Ideaaljuhul on sellise diagnoosi tehnika vaja kogu proovi jaoks ainult ühe viiruse genoomi kohta.
Lisaks on see PCR täiesti spetsiifiline. Igas geenis on unikaalne nukleotiidide järjestus, mis nagu sõrmejälge ei saa kuidagi korrata. Selle C-hepatiidi analüüsi jaoks sünteesitakse praimerid nii, et need vastavad absoluutselt soovitud geenide ainulaadsetele piirkondadele, mida pole teisel järjestusel.
See meetod võimaldab teil analüüsida ka hepatiit C ja määrata need, aidates lõpliku diagnoosi kindlaks teha.
Selline laborianalüüs annab rohkem teavet kui üksnes C-hepatiidi viiruse või muu tüüpi RNA olemasolu või puudumise vereproovides. Radioaktiivse kiirguse parameetri määramisel on võimalik kindlaks teha, kui palju soovitud geneetiline materjal oli algselt uuritavas proovis. See võimaldab teil määrata nn viiruse koormuse parameetri - hepatiidi RNA osakeste kontsentratsiooni teatud koguses.
PCR-i kvalitatiivne analüüs
See analüüs võimaldab määrata hepatiit B viiruse esinemist vereproovides. See peaks toimuma kõigile inimestele, kellel on leitud hepatiidi antikehasid.
Selliste uuringute tulemusel võib olla ainult kaks väärtust:
- "Tuvastatud". Sellist positiivset testi tulemust tõlgendatakse järgmiselt: hepatiidi viiruse RNA bioloogilise materjali fragmentide analüüsitud proovist leiti. Sellest järeldub, et patsiendil oli see viirus nakatunud. See võib viidata sellele, et patogeeni hepatiit korvab kehas ja nakatab uusi rakke, hävitab maksa.
- "Ei leitud." See tulemus näitab, et selles laboris analüüsitud proovis ei leitud C-hepatiidi viirusele spetsiifilisi RNA fragmente. Samuti on olemas võimalus, et patogeeni viiruse RNA kontsentratsioon uuritavas proovis oli nii väike, et test ei suutnud seda tuvastada.. Sellistel juhtudel öeldakse, et kontsentratsioonitase on analüüsi tundlikkuse läve madalam.
Selline test võib olla valepositiivne või valenegatiivne ka biomaterjali saastumise tõttu või analüüside jaoks vajalike keemiliste komponentidega reageerivate konkreetsete ainete olemasolust proovides.
Tuleb rõhutada, et hepatiit C ägedates faasides võib kvalitatiivne uuring, kasutades PCR meetodit, tuvastada selle RNA pärast 1-2 nädala möödumist organismi nakatumise hetkest. See tähendab, et haigust saab tuvastada juba ammu enne selle väliste sümptomite tekkimist või kehas hepatiidi antikehade ilmnemist.
Vereproovide võtmine (veenist) viiakse eelistatult läbi tühja kõhuga.
PCR kvantitatiivne analüüs
Selle analüüsi abil määratakse patsiendi hepatiidi viiruse kontsentratsiooni tase (viiruse koormus). Selline test tuleb läbi viia, et hinnata viiruse RNA kogust teatud koguse ühiku kohta.
Selle meetodi kohaselt läbi viidud hepatiit C-de desinfitseerimiskatsed võivad saada järgmisi tulemusi:
- Kvantitatiivne näitaja (joonistel)
Viiruse kontsentratsioon (kogus) on esitatud arvuliselt. Selleks kasutatakse erinevaid mõõtühikuid: kas IU / ml (rahvusvaheline ühik milliliitri kohta) või koopiad / ml (viiruse RNA koopiate arv milliliitri kohta). Keskmiselt vastab 1 RÜ / ml 4 koopiat / ml, kuna erinevatel katsesüsteemidel on selliste ühikute jaoks erinevad ümberarvestuskoefitsiendid.
Madalad viiruse koormuse väärtused loetakse alla 400 000 RÜ / ml ja 8 000 000 RÜ / ml on kõrge.
Selline kvantitatiivne hindamine võimaldab kindlaks teha patsiendi haiguse (nakkusohu) nakkushaiguse taset. Mida rohkem see analüüsinäitaja on, seda suurem on patogeeni ülekandmise tõenäosus teistele inimestele (seksuaalse kontakti kaudu või vertikaalselt).
See kohtuotsus tähendab, et kvantitatiivne meetod ei suuda tuvastada hepatiidi RNA-d, kuid viirus ise on organismis olemas ainult väga madalates kontsentratsioonides. Seda kinnitas PCR täiendav kvalitatiivne analüüs ja selle positiivne tulemus kinnitab hepatiidi esinemise fakti.
Analüüsi positiivne tõlgendamine näitab, et vereproovis sisalduv kvantitatiivne test ei suutnud tuvastada C-hepatiidi viiruse spetsiifilisi RNA osakesi.
Kvantitatiivne PCR analüüs, mida tehakse erinevatel viirusevastase ravi perioodidel (1., 4., 12. ja 24. nädal), võimaldab meil hinnata ravi efektiivsust ja teha vajalikud muudatused.
Analüüsi spetsiifilisus
See test tuleb läbi viia hepatiidi C erinevate genotüüpide kindlaksmääramiseks. Praegu on selle patogeeni ja selle paljudest alatüüpidest 11 genotüüpi. Meie riigis on I, II ja III liigi hepatiidi C genotüübid tavalised. Laboratooriumides on nad võimelised tuvastama nende liikide erinevaid alatüüpe: 1a, 1b, 2a, 2b või 3, 4, 5, 6 genotüübid koos erinevate alamtüüpide modifikatsioonidega. Kõigi nende hepatiidide korral on määramise eripära 100%.
Genotüübi muutmise täpsustamine võimaldab valida sobiva ravi. Kindlat tüüpi genotüübi esinemine patsiendil ei viita sellele, et haigus on lihtsam või keerukam, need on ainult hepatiidi viiruse sortid ja mitte enam.
Nendel juhtudel, kui viiruse genotüüpi ei saa laboris eraldada, võib tulemuseks olla: "pole kirjutatud. Uuriti genotüüpe: sellised-ja-sellised "(näiteks 1a, 2c, 3av). See dekodeerimine näitab, et selles laboris ei olnud sobivaid reagente, mis võiksid kindlaks määrata hepatiidi viiruse genotüübi. Uuringut testiti viiruste, loendi andmetega, kuid nende vastavust RNA proovidega ei tuvastatud.
Lõpliku diagnoosi tegemiseks on ainult üks tüüpi analüüs ebapiisav. Iga katse võib anda valepositiivse tulemuse. Hepatiidi tüübi ja selle infektsiooni kahjustuse ulatuse täpseks määramiseks viige läbi põhjalik uuring. Selleks tehakse maksa biopsia ja testitakse ensüüme: ALT, ASAT, samuti leeliseline fosfataas ja LDH. Samuti võib läbi viia bilirubiini ja protrombiini indeksi analüüsi.
Ainult selliste testide ja laboratoorsete testide kogum, milles on üldiselt analüüsitud patsiendi seisundit, aitab määrata kindlaks hepatiidi esinemist kehas, selle vormis ja raskusastmest. Nende põhjal saab arst määrata edasise ravi ja teha patsiendi jaoks võimalik prognoos.
Hepatiidi C kvalitatiivne analüüs
Jäta kommentaar 7,180
Polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne analüüs - C-hepatiidi PCR-i määramine määrab kindlaks HCV olemasolu või puudumise organismis. Laboratoorsetes tingimustes uuritakse RNA struktuuri, mis sisaldab viirust. Viiruse C avastamise korral on vaja läbi viia ravikuuri, sest maksa tähelepanuta jäetud seisund põhjustab tõsiseid tagajärgi. Kõrgekvaliteetne PCR viiakse läbi ka pärast taastumist, et kinnitada antikehade puudumist. Määratud tavapäraseks kontrollimiseks. PCR (kvalitatiivne), mis põhjustab vereseerumis madalat kontsentratsiooni, ei pruugi midagi tuvastada, kuna diagnostilise süsteemil on oma tundlikkuse piirväärtused. Haiguse esialgse või kerge vormi korral viiakse PCR ultra-diagnostika läbi ultra-tundlikes seadmetes.
Mis on RNA viirus?
C-hepatiidi viiruse (või C-hepatiidi viiruse RNA) termin RNA on maksahaigus ise. Viirus C seostub organismi tervete rakkudega sissetungimise kaudu. Aja jooksul levib kogu keha, on vaja ainult sattuda verdesse. Selle tulemusel tungib patogeen maksa sisse, kaitseb selle rakke ja teeb kõvasti tööd. Maksa rakud (hepatotsüüdid) töötavad selle mõju all, muutuvad ja sellest surevad nad. Mida kauem on viirus C maksas, seda suurem on rakkude arv. Aja jooksul arendada ohtlikke haigusi, mis põhjustavad pahaloomulise degeneratsiooni ja surma.
Maksa infektsioon selle tüüpi viirusega ei pruugi ilmneda väljastpoolt. Paljude aastate või aastakümnete vältel tunneb nakatunud inimene täiesti tervislikku seisundit ja sagedamini näitab patoloogiat ainult juhusliku uurimisega. Hepatiidi veres annetamisel uuritakse osa inimese RNA (ribonukleiinhappe) ahelast, mis on inimese geeni osa (DNA). Laboratoorsete uuringute tulemusi ei tohiks kasutada enesehoolduseks, sest see on ainult näitaja. Täpne pilt ja täiendav diagnoos on arsti poolt paremini kindlaks määratud.
Kui see on valmis: teadustöö näited
HCV kinnitamisel viiakse läbi PCR analüüs (polümeraasi ahelreaktsioon). PCR-uuringud aitavad patogeenset materjali leida RNA struktuuris ja määrata tõhus ravi. Nimetatud järgmistel juhtudel:
- maksa põletiku tunnuste avastamine;
- profülaktika uuringud ennetamiseks;
- kokkupuutuvate inimeste uurimine;
- segapärase hepatiidi diagnoos (peamise patogeeni kindlaksmääramine);
- viiruse paljunemisvõime taseme kindlaksmääramine kroonilises vormis;
- maksa tsirroos;
- et määrata ettenähtud ravi tõhusus.
PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs on olemas. Kvantitatiivne PCR näitab RNA protsentuaalset suhet viiruse kandjate hulka veres ja kvalitatiivne viiruse olemasolu või puudumine. Kvalitatiivne positiivne näitaja (C-hepatiidi RNA olemasolu) vajab ka kvantitatiivseid uuringuid. Hepatiidi põhjustava toimeaine kõrge kontsentratsioon seondub selle ülekandumise riskiga, teiste nakatamisega. Madal arv on paremini ravitav. RNA viiruste hulk veres ei ole seotud haiguse intensiivsusega. PCR-analüüs tehakse ka interferoonravi puhul, et määrata ravikuuri kestus ja keerukus.
Hepatiit C kõrge kvaliteediga PCR-analüüsi omadused
Polümeraasi ahelreaktsiooni indeksiga kvalitatiivne analüüs määratakse kõikidele patsientidele, kellel on veres C-hepatiidi antikehad. Haigestunud ja taastunud isikud peavad katse uuesti proovima. Soovitatav on läbida B-hepatiidi test, siis positiivse järelduse korral ja hepatiit D. Samuti tuleks kvalitatiivselt analüüsitud reaktsioon viia läbi koos teiste vereanalüüsidega. Analüüsid näitavad täielikku pilti viiruse levikust.
Katsetulemustest nähtub, et ainult C-hepatiidi positiivne test on nähtav või negatiivne, see tähendab viiruse olemasolu või puudumine. Kui väljund on "tuvastatud", siis viirus on ja on endiselt aktiivne. Nimetus "ei tuvastata" tähistab viiruse või selle väikese koguse puudumist. Selle indikaatoriga tuleks meeles pidada, et diagnostiliste süsteemide analüütiline tundlikkus on erinev ja et RNA hepatiit C võib ikkagi veres olla, kuid ei avaldu analüüsis.
Eriti tundlik PCR-meetod ultrahepatiit C avaldub isegi vähesel määral. Kasutatakse fluorestsentsi hübridisatsiooni uuringut, mis on mitu korda kõrgem kui tavalised PCR-süsteemid. Seda meetodit kasutatakse mitmel juhul:
- kahtlustatud peidetud C-hepatiidi vormid;
- PCR-diagnostika ei kinnita patogeeni, kuid seal on antikehi;
- tagasinõudmise korral;
- varajase nakkuse tuvastamiseks.
Dekodeerimisanalüüs
HCV dekodeerimine PCR-iga mõjutab lõplikku otsust diagnoosi andmisel eelkõige ultrametodmeetodil. Selle uuringu peamine puudus on proovi ja materjalide steriilsete tingimuste rangelt kinnipidamine. Väike kõrvalekalle mõnikord annab ebaõigeid analüütilisi järeldusi, raskendab diagnoosi ja järgnevat ravi. Hepatiidi RNA määramiseks PCR-i analüüs ei pruugi alati kindlalt näidata haiguse pilti, mõnikord on mõnikord ebatäpsed ja mõlemas suunas.
Hepatiidi viiruse diagnoosimisel soovitatakse kasutada terviklikku uuringut.
Näitajate norm
Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsi puhul peetakse uuringu tulemuste kohaselt viiruse hepatiit C JgM antikehade puudumist. Samal ajal näitavad seroloogilise analüüsi tulemused, et C-viiruse antikehade esinemine on samuti normaalne. Kvalitatiivne määratlus ei näita haiguse intensiivsust, see näitab ainult R-hepatiidi C põhjustatud agensit. Seda analüüsi korratakse pärast ravi, et kinnitada tegelikku taastumist.
Kõrvalekalded
Kui JgM antikehad esinevad HCV RNA-le, siis see viitab arenevale infektsioonile. Samaaegselt haigus jätkub ägedalt või krooniliselt, avaldub erinevates etappides. Kui antikehade arvu vähenemist registreeritakse, näitab analüüs, et ravitulemused saadi taastumise ajal. Diagnoosides leitakse ainult väga haruldasi valepositiivseid juhtumeid. Neid leidub naistel raseduse ajal ja teiste nakkushaigustega inimestel.
Hepatiidi viiruse RNA koos kvalitatiivsete uuringutega
Igaüks võib nakatuda hepatiit C-ga. Paljud inimesed elavad seda haigust juba aastaid ja isegi ei mõista, et neil on mehhanism, mis töötab nende sees, mis varem või hiljem toob kaasa kurb tagajärjed. Sellised isikud nakatavad aktiivselt teisi ja suremus suureneb pidevalt. Nende näitajate vähendamiseks peaksid kõik kehtestama reeglina perioodilise hepatiit C analüüsi läbiviimise, eriti kui see on ohustatud.
C-hepatiidi viirus (HCV) sisaldab RNA-molekuli, mis kannab geneetilisi andmeid ja spetsiifilisi valke, mis suhtuvad inimese keha. Edastatakse peamiselt soo ja verise kaudu. Mõnel juhul on vertikaalne edastus võimalik (st ema lapseni).
Injumeneb kehasse, see hoitakse erinevates vererakkudes (neutrofiilid, monotsüüdid, lümfotsüüdid) ja maks (hepatotsüütidest).
Salajane nakkus on ägeda faasi sümptomite puudumine. See muutub viivitamatult kroonilisteks asümptomaatilisteks ja viib aeglaselt oma hävitavat toimet.
Alates C-hepatiidi viiruse RNA sisenemisest kehasse võivad esimesed sümptomid kesta mitu aastat, mõnikord 15-20 aastat või kauem. Kaebuste tekkimine on iseloomulik C-hepatiidi tähelepanuta jäetud vormile, kui maks on juba oluliselt mõjutatud. Enamus neist patsientidest on diagnoositud järgmiste maksapatoloogiatega:
- tsirroos;
- nekroos;
- healoomulised tsüstid;
- onkoloogia
Enne komplikatsioonide tekkimist võib patsient märkida kerge ebamugavustunne, mis tavaliselt ei anna tähtsust.
Hepatiit C viiruse RNA analüüs on näidustatud inimestele, kes on nakkust enam vastuvõtlikud. Sellesse rühma kuuluvad:
- sõltlased;
- promiscuous seksitöötajad;
- kõik, kes töötavad kaitsmata seksuaalvahekorras, eriti uue partneriga;
- tätoveeringute fännid, augustamine, ilusalongid (juuksurid);
- kirurgiliste sekkumiste käigus (sealhulgas sünnitus, hambapatoloogia);
- enne 1990. aastat sündinud laste emad (asjaolu, et sel ajal ei olnud haigus veel kindlaks tehtud, seetõttu olid sellised naised infektsiooniga infektsiooni saanud, kui vere oli transfekteeritud);
- haigete emade lapsed;
- sugulased ja seksuaalpartnerid;
- kellel on seletamatu iseloomuga krooniline maksahaigus.
Nimekiri on üsna lai, nii vähesed võivad kindlalt öelda, et nakatumisoht on null.
Paljud sooviksid testida C-hepatiidi viiruse RNA määramisel, kuid ei pöördu arstile piirangu, ajapuuduse, haiglate vaenulikkuse jne tõttu.
Spetsiaalne kiire katse (ELISA) abil lihtsustatud diagnoos aitab probleemi lahendada. Sellisel juhul kasutatakse kvalitatiivset meetodit, mis määrab ainult viiruse antikehade esinemise.
See toimib raseduse määramise katse põhimõtte alusel, kuid see nõuab testmaterjalina verd:
- Plastikust riba (tulemuse hindamiseks jälgimisega) komplekt on spetsiaalne lansett, mis läbib sõrme ühe nupuvajutusega.
- Pipeti abil paigutatakse vere spetsiaalsesse sektsiooni ja 10-15 minutit saate vastuse hinnata.
- Kaks riba näitavad positiivset tulemust, millest üks - negatiivne. Teise kahvatu koha välimus testpiirkonnas näitab haiguse esinemist, kuid antikehade kontsentratsioon veres on liiga madal.
Kui haigus on tuvastatud, peaksite minema edasiseks uurimiseks arsti juurde.
Selliste tulemustega on vaja kontakteeruda nakkushaiguste spetsialistiga ja hepatoloogiga, kes määrab täiendavaid uuringuid.
Järgnevate analüüside läbiviimisel peamine on tuvastada, milline genotüüp hõlmab tuvastatud hepatiiti ja määrab selle hulga veres. Edasine ravi sõltub saadud andmetest, kuna kõik liigid on üksteisest erinevad ja võivad reageerida ravimitele erinevalt. Lisaks sellele on mikroorganismid võimelised osavalt maskeerima.
HCV diagnoosimisel kasutatakse ühte järgmistest meetoditest:
- PCR. Sel juhul räägime patogeeni geneetilistest materjalidest.
- C-hepatiidi viiruse (R-DNK, TMA) RNA kvantitatiivne analüüs. See analüüs viiakse läbi pärast patogeeni olemasolu kinnitamist organismis. Seda nimetatakse ka viiruslikeks koormaks. See võimaldab teil tuvastada haigust põhjustavate esindajate arvu 1 ml veres. Need näitajad sõltuvad ravi kestusest ja patsiendi nakkavuse tasemest. R-DNK teostab testimist üle 500 ME ja TMA 5-10 ME jooksul. Mõlemad meetodid on lihtsad ja odavad.
- Genotüüpimine See viiakse läbi viimati ja võimaldab selgitada, millistele liikidele tuvastatud haigus kuulub.
Kui C-hepatiidi viiruse RNA analüüsi tulemus on positiivne PCR-i ja ELISA-ga, kinnitatakse diagnoos. Kuid negatiivne tulemus ei taga infektsiooni puudumist. Kahjuks juhtub see sageli, kuna selles protsessis võib kasutada erinevaid tundlikkusega reagente.
Paljud on huvitatud sellest, mida "C-hepatiidi viiruse RNA-d ei tuvastata." Selline näitaja võib tõepoolest näidata haiguse puudumist või selle madalat kontsentratsiooni. Näiteks annab PCR 200 ME / ML vale tulemuse, kui patsiendil on väike viiruskoopiate arv. See võib juhtuda hiljutise infektsiooni või ravi ajal.
Sageli pole patsiendil sellist teavet vaja, sest raviarst peab neid punkte arvesse võtma.
C-hepatiidi viiruse RNA tuvastamine kvantitatiivses uuringus 400 000 RÜ või üle selle viitab sellele, et viirus ei esine ainult veres, vaid ta ka aktiivselt taastub ja nakatab teisi. Kui näitaja on ligikaudu 800 000, siis see näitab ägedat faasi ja aktiivset kahju maksarakkudele.
Kuigi siin erinevad ekspertide arvamused. Mõned neist väidavad, et haiguse progresseerumise määra ja viiruse koopiate arvu vahel puudub seos.
Sellised patsiendid peavad suhtlema oma lähedastega eriti ettevaatlikult.
Pärast hepatiit C viiruse RNA määramist võib patsiendile määrata teisi uuringuid, sealhulgas:
- hepatiit B avastamine;
- üldine vere ja uriini analüüs;
- biokeemia;
- Kõhuorganite ultraheli;
- MRI või maksa skaneerimine (vastavalt näidustustele).
Pärast kogu vajaliku teabe saamist uurib arst hoolikalt tulemusi, patsiendi tervislikku seisundit ja seejärel valib talle individuaalse raviskeemi.
Õigeaegse avastamise korral ei ole maksakahjustus tavaliselt olemas.
Ravi kestus sõltub genotüübist. Tänaseks on teada 11 liiki, millest 6 on kõige tavalisemad. Venemaal on kõige levinum tüüp 1, 2, 3.
Alles paar aastat tagasi oli C-hepatiit üks ravitavatest haigustest. Ravi, mida teostatakse peamiselt interferoonidega, võib märkimisväärselt parandada patsiendi seisundit, kuid mitte täielikult ravida.
Haiguse raviks oli läbimurre narkootikumide Sofosbuvir, mis ilmnesid erinevates kaubamärkides Sovaldi asuvates apteekides. Tänaseks on mitmeid tõhusaid vahendeid:
Sageli patsiendid neid hästi talutavad, kuid mõnel juhul on täheldatud:
- peavalu;
- iiveldus;
- unetus;
- isukaotus;
- krambid;
- migreen;
- depressioon;
- suukuivus;
- valu rinnus;
- juuste väljalangemine.
Sellise ravi üheks puuduseks on äärmiselt kõrge hind (keskmiselt 10 000-12 000 rubla paki kohta), mis sõltuvalt valitud ravimist võib varieeruda üles või alla.
Pärast ravi lõppu, mis kestab 12 kuni 24 nädalat, määratakse patsiendile uuesti viirusliku RNA olemasolu veres.
Sellisel juhul on vaja rakendada meetodit, mille minimaalne tundlikkuspiir on, sest pärast kokkupuudet ravimitega võib HCV kontsentratsioon olla ebaoluline. Sellisel juhul tuleb ravi jätkata.
Negatiivne tulemus on C-hepatiidi viiruse puudumine, kui patogeeni RNA ei tuvastata. Selline uuring tuleb läbi viia mitu korda (lühikese ajaga), et tagada ravi edukus.
Igaüks, kes on läbinud kestva ja kalli ravi C-hepatiidi raviks, on väärt meeles pidada, et keha ei arenda selle immuunsust, seega on võimalik taasinfektsioon.
Seda haigust on kergem vältida kui ravimist. Kindlustada end täielikult võimaliku ohu eest ei toimi, kuid selleks, et mitte hiljem küsida, mida tähendab "Hepatiit C viiruse RNA tuvastamine", peate järgima järgmisi ettevaatusabinõusid:
- Ärge kasutage muid isiklikke hügieenivahendeid (habemeajamisvahendeid, käärid, hambavalu);
- vältida kaitsetut seksi;
- osaleda hambaarstil, salongidel (ilu, tätoveeringud jne) ainult hea mainega;
- katta kõik nahakahjustused kipsi või sidemega;
- võimaluse korral vältida kokkupuudet nakatunud inimestega.
PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs hepatiit C jaoks: negatiivne, positiivne transkript
C-hepatiit on viiruse maksahaigus, mis on põhjustatud flaviviiruse HCV-st (ingliskeelne sõna "hepatiit C-viirus"), mille struktuur sisaldab ribonukleiinhappemolekuli (RNA). RNA kannab viiruse geneetilist koodi. Selle olemasolu võimaldab hepatiidi C PCR-i analüüsi.
HCV oht inimesele seisneb selles, et nn seroloogiline aken (infektsiooni aeg ja immuunsüsteemi reaktsiooni ilmnemine) võib olla üsna pikk - mitme nädala kuni kuue kuu jooksul.
See ei tuvasta nakkusi ega alusta ravi õigeaegselt.
Sõltuvalt organismi individuaalsetest omadustest võib HCV kandja esineda akuutses vormis ja esineda kroonilise haigusena, mis nõuab pikka ja kulukat ravi. Kui tuvastatakse HCV-vastased antikehad, tehakse laboratoorsed testid, sealhulgas PC-viirushepatiid C-ga. Seda katset tehakse kõigile inimestele, kelle veres on leitud HCV-vastased antikehad.
Mis on PCR-analüüs?
PCR-i laboratoorsed analüüsid hepatiit C jaoks - bioloogilise materjali uurimine, et tuvastada flavaviiruse esinemine.
Polümeraasi ahelreaktsioon (lühendina tähistab) näitab keha viirusliku kahjustuse kvantitatiivset väärtust, selle kvalitatiivseid omadusi ning RNA-viirust sisaldava genotüübi.
Nende põhjal ja täiendavate analüüside põhjal määratakse kindlaks ravi meetod ja kestus ning epidemioloogiline tegur (teisele kandjale edastamise oht).
Mis on hepatiit C RNA analüüs?
Hepatiit C PCR nimetatakse ka RNA analüüsiks (HCV RNA), kuna Flavaviirus sisaldab RNA osakest, mille virioni suurus on 30-60 nm. Selle mikroorganismi üks omadusi on mutatsioonide suur kalduvus.
Igale viiruse alamliigile (genotüübile) on erinev vastupanu, mis põhjustab patsiendi jaoks erinevaid ravimeetodeid ja edasise prognoosi olemust.
Bioloogiline materjal (venoosne veri) antakse tühja kõhuga ja seda reeglina testib reaalajaline PCR meetod (väga tundlik reaalajaline diagnostika, mille madalam tuvastuspiir on 15 IU / ml, kasutades suletud automatiseeritud süsteeme).
On ka muid katseid, näiteks COBAS AMPLICOR, mille tundlikkus on 50-100 RÜ / ml. Iga laboriuuringu jaoks on oluline tundlikkuse künnis, st reagendi võime tuvastada viiruse miinimumkontsentratsioon bioloogilises materjalis.
Hepatiit C analüüsi tüübid PCR abil
Hepatiit C PCR sisaldab kolme olulist komponenti:
- kvalitatiivne analüüs;
- kvantitatiivne analüüs;
- genotüpiseerimine.
Need testid võimaldavad teil määrata viiremia olemust ja patogeeni geneetilisi omadusi. Sõltuvalt diagnostilise süsteemi tundlikkusest tehakse uuring üks kord ja mõnikord tehakse teine katse tundlikuma reagendiga tulemuste kinnitamiseks või täpsustamiseks.
Hepatiidi C kõrge kvaliteediga PCR
Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsi teine tavaline nimetus on hepatiit C PCR-analüüs kvalitatiivne. Katse standardne tundlikkus, mis võimaldab tuvastada viiruse kahjustusi, on vahemikus 10-500 RÜ / ml.
Hepatiidi C negatiivne PCR-analüüs näitab, et viiruse kontsentratsioon patsiendi veres on alla diagnostilise süsteemi tundlikkuse läve.
Kui kõrgekvaliteetne PCR annab vastuse "ei tuvastatud", siis on edasiseks raviks oluline teada reaktiivi tundlikkuse künnis.
Flavaviiruse valkude fraktsioonid ilmuvad palju hiljem.
C-hepatiit, kvantitatiivne PCR
PCR-hepatiidi C kvantitatiivne näitaja on viiruse koormus, mis peegeldab kehas flavaviiruse RNA kontsentratsiooni taset. See on näitaja, mis näitab, kui palju viiruse RNA fragmente on võetud vere kuupsentimeetri kohta. Hepatiit C RNA PCR-i tulemused tavapärases süsteemis kvantitatiivses testis on näidatud rahvusvaheliste ühikutes milliliitri kohta (RÜ / ml) ja neid saab registreerida erineval viisil, näiteks 1,7 miljonit või 1,700,000 RÜ / ml.
Hepatiidi C kvantitatiivne PCR-diagnostika tuleb patsientidele enne viirusevastase ravi alustamist ja 12. ravinädalal, et hinnata valitud HCV-ga tegelemise meetodi tulemusi. Viiruslik koormus võimaldab kindlaks teha kolm olulist haigusseisundit:
- nakkavus, st viiruse edasikandumise oht ühelt kandjalt teisele (mida kõrgem on flavaviiruse RNA kontsentratsioon, seda suurem on tõenäosus nakatada teist inimest, näiteks seksuaalse kontakti kaudu);
- ravi meetod ja tõhusus;
- viirusevastase ravi kestus ja prognoos (seda kõrgem on viiruskoormus, seda kauem ravi kestab).
Hepatiidi C kvantitatiivne PCR-diagnostika sõltub laboratoorse testi tüübist ja selle tundlikkuse piirist. Norma alumist piiri peetakse näitajaks kuni 600 000 RÜ / ml, keskmine väärtus jääb vahemikku 600 000-700 000 RÜ / ml. 800 000 RÜ / ml ja kõrgemate tulemuste hulka peetakse RNA-d sisaldava viiruse kõrge taseme.
Genotüüpimine
Tänu kõrgele HCV mutatsioonilisele aktiivsusele looduses, on katsetamisel oluline kindlaks teha, milline viiruse genotüüp on patsiendi veres. Kokku on planeedil registreeritud 11 C-hepatiidi viiruse genotüüpi, mis sisaldavad paljusid alamliike (alatüüpe). Vene Föderatsiooni territooriumil jagunesid 1,2 ja 3.
Kuna C-hepatiidi C PCR RNA koos genotüpiseerimisega on väga oluline analüüsi komponent võimaldab arstil määrata viiruse resistentsust (resistentsust), valida sobivad ravimid ja määrata ravikuur.
Genotüpiseerimine võimaldab ka kaudselt määrata maksa seisundit. Näiteks kaasneb HCV-i 3 genotüübiga sageli steatoos, milles rasv kogub elundi rakkudes.
C-hepatiidi PCR-i vereanalüüs peaks andma näitaja, mis määrab genotüübi. Laboratoorsed reaktsioonid võivad öelda, et "ei ole kirjutatud" - ja see tähendab, et viirus on inimveres, mida katsesüsteem ei tuvasta. See võib viidata sellele, et antud geograafilises piirkonnas ei ole genotüüp tüüpiline. Antud juhul peaksite analüüsi korrata diagnostilise süsteemi suurema tundlikkusega.
C-hepatiidi PCR-analüüsi dekodeerimine
C-hepatiidi PCR kvantitatiivne dekrüpteerimine võib põhineda ülalnimetatud andmetel. Laboratoorsete testide tulemuste saamisel kirjutavad tavaliselt järgmised andmed:
- "Leitud" / "ei leitud" (kõrgekvaliteetne C-hepatiidi PCR);
- RNA-d sisaldavate fraktsioonide arv, näiteks 831,680 ME / ml (kvantitatiivne PCR-analüüs);
- arv, mis määrab HCV genotüübi, näiteks - 1, 2, 3, 4;
- Katse nimi on enamasti reaalajas.
Kõige olulisem PCR-i hepatiidi C analüüsiks detekteerimisel on teine lõik, mis näitab viiruse koormust, mis määrab ravi prognoosi, meetodi ja kestuse.
Kui hepatiit C PCR-test on negatiivne ja ELISA on positiivne - mida see tähendab?
Laboratoorsete analüüside dekodeerimiseks on oluline pöörduda hepatoloogi või nakkushaiguste spetsialisti poole, kes selgitab saadud teavet vastavalt diagnostilise süsteemi tüübile ja selle tundlikkuse piirväärtusele. Meditsiinipraktikas on palju andmeid vereanalüüside kohta, mis võivad inimesi meditsiinilise hariduse puudumisel eksitada.
Näiteks kui hepatiit C-vastane PCR-test on negatiivne ja ELISA on positiivne, võib see tähendada, et patsiendi veres ei esine HCV-d praegu, kuid varem oli ta saanud hepatiidi C ägedat kuju. Arvatakse, et positiivne ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) näitab, et on veres antikehad, mis on toodetud pärast viiruse sissetungi minevikus. Kuid tänapäeva meditsiinipraktikas peetakse ELISA-analüüsi ebapiisavalt usaldusväärseks ja see annab sageli ebatüüpilisi tulemusi, nii et arstid kasutavad seda primaarse sõeluuringuna. Haiguse diagnoosimisel lähtuvad spetsialistid täpselt PCR-testiga.
Kasulik video
Järgnev video annab väga üksikasjaliku ja huvitava kirjelduse PCR-meetodi olemusest, kuidas analüüsimine toimub:
Järeldus
PCR-i analüüsimiseks C-hepatiidi korral võetakse tavaliselt verevere. Enamasti on bioloogilise materjali kahekordne kogus - ELISA ja otseselt PCR-testi jaoks. Korrektsete katsetulemuste jaoks on vajalik vastavus bioloogilise materjali laboriproovide võtmise põhireeglitele:
- analüüsitava veri on tühja kõhuga esimesel poolel;
- jahu ja vereproovi võtmine peaks võtma vähemalt 8 tundi;
- Alkoholi ja praetud toidud tuleks enne testi sooritamist välja jätta;
- päeva jooksul enne vere annetamist on vajalik vältida suurt füüsilist koormust.
Vereanalüüsi tulemused on tavaliselt järgmisel päeval valmis.
Mis on hepatiit C RNA?
Hepatiit C viiruse RNA uuring on kõige olulisem protseduur, mis võimaldab teil täpselt määrata patsientide kestust ja ravimeetodeid. Haiguse diagnoos koosneb mitmest erinevast vereanalüüsist, näiteks:
- hepatiit C markerid (anti-HCV);
- hepatiit C viiruse RNA (HCV RNA) määramine.
Esimene uuring tehti esimesel hepatiidi kahtlusel. Teine võimalus on kõige olulisem HCV RNA ravis, nii et seda on üksikasjalikumalt käsitletud.
Mis on viirushepatiit C?
Viiruse hepatiit C või HCV on nakkushaigus, mis mõjutab maksa. Viirus nakatub läbi vere. Te võite nakatuda, tehes vereülekannet, kui meditsiiniseadmete steriliseerimise eeskirju ei järgita. Vähem sagedamini esineb juhtumeid, kui haigus saadakse sugulisel teel või rase emalt lootele. Hepatiit C võib olla kahte tüüpi.
Krooniline hepatiit C on kõige ohtlikum. See on haigus, mis võib kesta kogu elu. See põhjustab tõsiseid probleeme maksatalitluse, nagu tsirroos või vähk. 70-90% nakatunud inimestest muutub haigus krooniliseks.
Kõige olulisem C-hepatiidi oht on see, et see toimub salaja, ilma ikteriliste märkideta. Sel juhul kaebavad kõige sagedamini palavik, iiveldus ja oksendamine, füüsiline nõrkus, väsimus, isutus ja kehakaal. Samal ajal leiab ta pahatahtlikku degeneratsiooni takskoe väikese kõvenemise taustal üsna sageli. Sel põhjusel nimetatakse C-hepatiidi tihtipeale "ajapommi" või "kangekaelse tapjana".
Haiguse teine tunnus on selle väga aeglane areng, mida hinnatakse kümneid aastaid.
Reeglina ei tunne nakatunud inimesed mingeid sümptomeid ja ei tea nende tegelikust seisundist. Tihti saab haigust tuvastada ainult siis, kui pöördute mõne teise isiku arsti poole.
Riski hulka kuuluvad:
- lapsed, kes said oma emadest C-hepatiidi viiruse;
- sõltlased;
- inimesed, kes läbisid kehaosi või tätoveerisid mittesteriilsete vahenditega;
- doonorvere või elundite saamine (kuni 1992. aastani, kui hemodialüüsi ei tehtud);
- HIV nakatunud inimesed;
- meditsiinitöötajad, kes puutuvad kokku nakatunud patsientidega.
Hepatiidi C RNA määramine
Hepatiit C viiruse RNA määratlus, mida nimetatakse ka C-hepatiidi PCRiks, on bioloogilise materjali (veri) uuring, mida saab kasutada hepatiidi viiruse genoomsete ainete otsese esinemise tuvastamiseks organismis (ükski viirus on üksiku RNA tükk).
Peamine katsemeetod on PCR või polümeraasi ahelreaktsiooni meetod.
HCV RNA jaoks on olemas kahte tüüpi vereanalüüsid:
Kvaliteedikontroll
Kvalitatiivse analüüsi tegemine võimaldab kindlaks teha, kas viirus on veres. Kõik patsiendid, kellel on leitud C-hepatiidi antikehad, peavad selle testi läbima. Selle tulemuste põhjal saate 2 vastust: "olemas" või "puudub" viirus. Positiivse testitulemusega (tuvastatud) saab hinnata viiruse aktiivset reproduktsiooni, mis nakatab maksas terveid rakke.
Kõrgekvaliteedilise PCR-iga läbiviidud test on kohandatud spetsiifilise tundlikkusega vahemikus 10 kuni 500 RÜ / ml. Kui hepatiidi viirus avastatakse veres, mille konkreetne sisaldus on väiksem kui 10 RÜ / ml, võib viiruse tuvastamine muutuda võimatuks. Vähese spetsiifilise viiruse sisaldus on täheldatud patsientide seas, kellel on välja töötatud viirusevastane ravi. Seepärast on oluline, et meditsiinilise süsteemi tundlikkus oleks kõrge, et diagnoosida ja määrata polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne tulemus.
Sageli viiakse C-hepatiidi polümeraasi ahelreaktsioon kohe pärast vastavate antikehade leidmist. Järgmised testid viirusevastase ravikuuri ajal viiakse läbi 4., 12. ja 24. nädalal. Ja pärast HTP lõpetamist tehakse veel 24 nädalat pärast analüüsi. Siis - kord aastas.
Kvantitatiivne test
PCR-RNA kvantitatiivne analüüs, mida mõnikord nimetatakse viiruse koormuseks, määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni (spetsiifiline sisaldus) veres. Teisisõnu, viiruslik koormus on defineeritud teatud viirusliku RNA kogusena, mis võib olla teatud koguses verd (tavaliselt on 1 ml, mis on võrdne 1 cm kuubikuga). Katse tulemuste ühikud on rahvusvahelised standardseadmed, mis on jagatud ühe milliliitri (RÜ / ml). Viiruse sisu tundub mõnikord erinevalt, see sõltub laboratooriumidest, kus uurimistööd läbi viiakse. Hepatiidi C puhul kasutatakse kvantitatiivselt mõnikord mõnda väärtust, näiteks koopiaid / ml.
Peate mõistma, et C-hepatiidi raskusastme puudumine selle tüve kontsentratsioonis veres ei sõltu.
Kontrollige viiruse laadimist, et saaksite määrata haiguse nakkushaiguse määra. Seega võib viirusega nakatumise oht suureneda hepatiidi kontsentratsiooni tõusuga veres. Lisaks vähendab viiruse kõrge sisaldus ravi mõju. Seetõttu on väike viiruskoormus edukaks raviks väga soodsa tegurina.
Lisaks sellele on C-hepatiidi katse ja selle kindlaksmääramine PCR-iga olulist rolli haiguse ravi rakendamisel ja ravi edukuse kindlaksmääramisel. Katsetulemuste põhjal on planeeritud rehabilitatsioonikursus. Näiteks, kui hepatiidi viiruse spetsiifiline kontsentratsioon on liiga aeglane, viirusevastane ravi on pikenenud ja vastupidi.
Tänapäeva meditsiinis arvatakse, et koormus on suurem kui 800000 ME / ml. Üle 10 000 000 ME / ml koormust peetakse kriitiliseks. Kuid erinevatest riikidest pärit ekspertidelt ei ole ikka veel arvamust viiruse koormuse piiride kohta.
Kvantitatiivse testi sagedus
Üldjuhul tehakse hepatiidi kvantitatiivne analüüs enne viirusevastast ravi ja 3 kuud pärast meditsiiniliste protseduuride lõppu tehtud ravi kvaliteedi määramiseks.
Selle tulemusena loetakse kvantitatiivseteks testideks eespool esitatud proovide tulemuste kvantitatiivseks hindamiseks. Selle tulemusel väljastatakse otsus "mõõdetud vahemiku all" või "ei tuvastata veres".
Kvalitatiivse testi tundlikkuse parameeter on tavaliselt väiksem kui kvantitatiivse analüüsi tundlikkus. "Kadunud" transkript näitab, et mõlemat tüüpi testid ei leidnud viiruse RNA-d. Kui testi indeks oli "mõõdetud vahemikust madalamal" madalam, ei leitud kvantitatiivset tüüpi analüüsi tõenäoliselt hepatiidi RNA-d, kuigi see kinnitab väga väikese spetsiifilise sisaldusega viiruse olemasolu.
C-hepatiit ja selle genotüübid
Hepatiit C viiruse RNA genotüüpide diagnoosimisel esinevad erinevad C-hepatiidi geneetilised tüübid. Teadust on teada rohkem kui 10 viirusliku genoomi tüüpi, kuid meditsiinipraktikal on piisav, et välja selgitada mitmed genotüübid, millel on selles piirkonnas suurim osa. Geneetilise tüübi kindlaksmääramine mängib olulist rolli ravi ajastamise valimisel, mis on väga vajalik, kui arvestada hepatiidi ravimite suure hulga kõrvaltoimetega.
Viirusliku hepatiidi C ravimeetodid
Ainuke tõhus viis hepatiidi viiruse raviks on reeglina kahe ravimiga: interferoon-alfa koos ribaviriiniga. Üksikult ei ole need ravimid sama tõhusad. Ravimite soovitatav annus ja kasutamise aeg tuleks määrata ainult arst ja individuaalselt iga patsiendi jaoks. Nende ravimitega võib ravi kesta võtta 6-12 kuud.
Täna ei leiutata ravimeid, mis tagavad sajaprotsendilise viiruse taastumise. Õige ravi korral võib patsientide paranemine ulatuda kuni 90% juhtudest.
C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivne analüüs
Hepatiit on tõsine haigus, millel on palju põhjuseid. Selle arengu alus on maksa otsene või kaudne kahjustus. Arvestades selle tähtsust kogu organismi jaoks, saab ainult arvata, kui raske on patoloogia. Käesolevas artiklis uurime üksikasjalikult hepatiidi C kursuse tunnuseid ja laboratoorset diagnoosimist.
Selle haiguse põhjus on viirusne agens, mis viitab RNA-d sisaldavatele patogeenidele. Sellel on oma eripära - võime muteeruda, st muuta oma struktuuri. Selle tagajärjel põeb infektsioon immuunsüsteemi rünnakust ja põhjustab enamikul juhtudest maksa kroonilist põletikku.
Võttes arvesse viiruse erinevate alatüüpide olemasolu, peaks ravimite valimine põhinema genotüpiseerimise tulemustel. Vaatamata haiguse ja HCV struktuuri pikaajalisele uuringule ei ole veel võimalik välja töötada spetsiifilist vaktsiini haiguse jaoks.
Varasema diagnoosimise raskused seisnevad hepatiidi asümptomaatilises suunas, mille tagajärjel viibib inimene arst tsirroosi ajal. Selle haiguse tuvastamiseks on vaja regulaarseid terviseuuringuid. Vere laboratoorsete uuringute abil on võimalik tuvastada HCV-d ja vältida teiste saastumist. Fakt on see, et nakkuse kandja võib pikka aega patoloogiat unustada ja jätkata viiruse edastamist tervetele inimestele.
Edastamise viisid
Enamikul juhtudel levib viirus läbi vere, kuna see sisaldab kõige rohkem patogeensete ainete kontsentratsiooni. Seega nakatumine edastatakse:
- hemodialüüsi teel;
- nakatunud nõelaga;
- võitluses, kui nahk on vigastatud, ja vere kokkupuude toimub;
- vereülekanne (vereülekanne).
Infektsiooni tõenäosus intiimsuses on ebaoluline, sest sperma ja tupe väljalangemine sisaldavad väheses koguses patogeene. Nakatumise oht on oluliselt suurenenud, rikkudes sellega suguelundite limaskestade terviklikkust. Seda täheldatakse agressiivsel ja anaalseks.
Mis puudutab vertikaalset edastusviisi, siis seda tehakse tööprotsessis. Loote rinnaga toitmise perioodil ei pruugi patogeen sisestada platsenta embrüost. Loodusliku sünnituse ajal suunatakse patogeenne aine lapsele, kui nahk on vigastatud, kui täheldatakse kokkupuudet emade verega.
Pärast patogeeni tungimist tervislikule organismile algab antikehade süntees, mis kaitsevad nakkust ja kuuluvad immuunsüsteemi. Neid leidub ELISA esialgses uuringus.
Patsiendi diagnoosi kinnitamiseks tehakse polümeraasi ahelreaktsioon. See on patogeense toimeaine geneetilise materjali analüüs ja viiruse koormuse määramine.
Hepatiidi C laboratoorsed diagnoosid
Laboratoorsed diagnoosid algavad ensüümi immuunanalüüsiga. Selle peamine ülesanne on avastada patogeeni vastu toodetud antikehasid. Selle efektiivsus on peaaegu 95%. Tänu sellele uuringule on viiruse kandja võimalik kindlaks määrata prekliinilises faasis ja saata selle edasiseks uurimiseks.
ELISA kvalitatiivne analüüs näitab immunoglobuliinide esinemist või puudumist patsiendi veres. Selle tulemus võib olla positiivne või negatiivne. Esimene vastus on saadetud, saadeti järgmine eksam - PCR. Selle hind sõltub reaktiivide ja labori kvaliteedist. Polümeraasi ahelreaktsiooni maksumus võib ulatuda 4000 rubla juurde.
PCR-funktsioonid
Kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni, võimaldab isegi väike kogus bioloogilist materjali hinnata viiruse koormust veres, see tähendab patogeenide kontsentratsiooni arvutamiseks ühe milliliitri vedeliku kohta.
PCR-i tulekuga on hepatiidi diagnoos muutunud palju lihtsamaks. Analüüs võimaldab kindlaks teha HCV RNA, et kindlaks teha nakkusprotsessi faas ja viiruse kandja nakkuslikkus.
Geneetiline diagnoos on mitu liiki:
- Hepatiit C PCR-i kvalitatiivne analüüs - kinnitab HCV olemasolu või puudumist isiku veres:
- mille abil saate arvutada viiruste kontsentratsiooni ja kindlaks teha haiguse staadium. Tulemuseks on IU / ml või koopiad / ml (olenevalt laborist);
- genotüpiseerimine - vajalik HCV genotüübi määramiseks. See on vajalik ravimite täpse valimise jaoks, mis on käesoleval juhul kõige tõhusamad. Analüüs kaudselt näitab patoloogilise protsessi raskust maksas. Seega, patogeeni kolmanda genotüübiga vaadeldakse kõige sagedamini steatoosi, mille aluseks on rasvade kogunemine hepatotsüütides (selle rakkudes). Lisaks sellele mõjutab viiruse tüüp terapeutilise ravikuuri tulemust ja kestust.
C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivne analüüs
Kõigepealt uuritakse laboratooriumis bioloogilist materjali HCV RNA olemasolu kohta. On oluline meeles pidada, et C-hepatiidi kvalitatiivsel analüüsil on teatav tundlikkus ja seetõttu ei pruugi see alati õige vastuse anda. Sellisel juhul soovitatakse laboratoorne diagnostika uuesti läbi viia, kasutades teisi reaktiive.
Usaldusväärsete tulemuste saamiseks tuleks kasutada katsesüsteeme, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml.
Diagnostiline tulemus võib olla kas "positiivne" või "negatiivne". Kui patogeeni ei leita verest, on uuring lõpule viidud. Kui proovi tuvastatakse patogeenset ainet, siis mõõdetakse viiruse koormus.
Kui protsessi rikutakse, saadakse valenegatiivne vastus, näiteks aktiivsed komponendid, mis takistavad patogeeni koopiate konstrueerimist keskkonda. Seega ei ole võimalik tõestada verepildi, mistõttu inimese infektsiooni ei diagnoosita.
Valepositiivseid tulemusi on võimalik saada, kui bioloogilise materjali kogumise toru ja uuringu keskkond on saastunud. Lisaks sellele on sellise analüüsi vastus võimalik segatüüpi infektsioonidega, kui maksa mõjutavad mitmed viirused, näiteks C- ja D-hepatiit.
Kvalitatiivsete uuringute näitajad
Arst võib välja kirjutada patsiendi kvalitatiivse uuringu hepatiit C viiruse RNA identifitseerimise kohta:
- positiivse või kahtlase ensüümi immuunanalüüsi vastuse saamisel;
- diagnoosi kontrollimiseks;
- viiruse koormus;
- haigusseisundi kindlaksmääramine;
- segainfektsiooni diagnoosimine. C-hepatiit nakatab sageli maksa samaaegselt "D-viirusega";
- terapeutilise taktika määramine, võttes arvesse põhjustava toimeaine genotüübi;
- viirusevastaste ravimitega ravi ajal muutuste dünaamika hindamine.
Polümeraasi ahelreaktsiooni eelised hõlmavad järgmist:
- tehnika ülitundlikkus, mis võimaldab tuvastada nakkuste faktilist staadiumi;
- patogeeni geneetilise materjali identifitseerimine, mitte selle antikehad;
- võimalust luua patogeense toimeaine alamtüüp;
- diagnoosimise kiire kiirus, sest see ei nõua toitainekeskkonna materjali külvamist ja piisab spetsiifiliste katsesüsteemide kasutamisest. Isik saab tulemuse 5 tunni pärast;
- mitmekülgsus. Analüüs võimaldab kindlaks teha mis tahes geneetilist materjali (RNA, DNA). Seetõttu võib arst kinnitada C-hepatiidi ja teiste haiguste tüüpe (B);
- võime tuvastada latentset infektsiooni.
Kvantitatiivsed uuringud
Polümeraasi ahelreaktsiooni abil vere uuringus võib arvutada patogeenide arvu fikseeritud bioloogilise materjali koguses. Indikaator on esitatud RÜ / ml kohta. Analüüsi abil on võimalik määrata patsiendi nakatumise määr, kindlaks määrata nakkusprotsessi staadium ja hinnata ka ravimi teraapia efektiivsust.
PCR põhjal otsustab spetsialist, millised ravimite annused võivad patogeenide paljunemist blokeerida. Lisaks määratakse viirusevastase ravi kestus ja elu prognoos. On oluline meeles pidada, et testimissüsteemidel on kõrge tundlikkus, seega võimaldab meetod kinnitada inimese infektsiooni prekliinilises staadiumis.
Genotüüpimine
Võttes arvesse patogeeni võime muteeruda, on selle genotüüp vajalik ravivõtmise taktikaks ja viirusevastaste ravimite valimiseks. Näiteks B-hepatiidi HCV 1 ravi kestab 48 nädalat, kusjuures ainult 60% juhtudest täheldati positiivset suundumust. Genotüübid 2 ja 3 on soodsamad prognoosid. Viirusevastaseid ravimeid on ette nähtud 8 kuud ja nende efektiivsus jõuab 85% -ni.
Statistika kohaselt on enamikul juhtudel HCV 1, 2 ja 3 registreeritud Vene Föderatsioonis.
Laboratooriumi testide dekodeerimiseks võib selle vastuse näidata - "pole kirjutatud". See tähendab, et viirus tsirkuleerib patsiendi vereringesüsteemi ja seda ei saa testimissüsteem tunnustada. Antud juhul tehtud analüüsi tulemus näitab, et patogeen ei ole antud geograafilise piirkonna jaoks tüüpiline.
Kuidas saada usaldusväärseid tulemusi?
Et kvalitatiivne PCR-uuring PCR-i tuvastamiseks C-hepatiidi tekitaja jaoks näitas õigeid tulemusi, tuleb labori diagnostikat ette valmistada:
- vereproovi võtmine toimub tühja kõhuga ja "näljane" tühimik ei tohiks olla lühem kui 8 tundi;
- kaks päeva enne uuringut on soovitatav lõpetada alkohoolsete jookide joomine ja loobuda vürtsikastest, rasvunud ja suitsutatud roogadest;
- tühistada verehüübimist vähendavaid ravimeid, näiteks hepariini. Kui need ravimid on välja kirjutatud tervislikel põhjustel, peate sellest teatama arstile. Lisaks peab spetsialist olema teadlik teiste ravimite lubamisest, mis võivad mõjutada laboriuuringute tulemusi;
- Bioloogilise materjali kogumise eelõhtul ei tohiks füsioterapeutilisi protseduure läbi viia ning neid ei tohiks mõjutada tõsiselt füüsilist koormust.
Analüüsi tulemusi võib mõjutada mitte ainult veri annetav inimene, vaid ka muud tegurid, nimelt:
- halva kvaliteediga vereproovi võtmine;
- bioloogilise materjali transportimise soovituste mittetäitmine;
- laboritöötajate ebapiisav koolitus;
- uurimismetoodika mittevastavus;
- antikoagulantide (hepariini) sisseviimine vereproovi võtmise eel. See rühma ravimid vähendavad hüübimist, aeglustades seega reagentide tööd.
Erinevates laborites võib diagnostiline vastus veidi erineda, kuid need vead ei mõjuta uuringu lõpptulemust.
Erilist tähelepanu pööratakse katsesüsteemide tüüpidesse, mida laboris kasutatakse. Tihti eelistatakse kõrge tundlikkusega reaktiive. See on oluline madala viiruskoormusega patsientide jaoks, kuna seda on raske tuvastada.
Kui tihti tehakse laborikatset?
Primaarne polümeraasi ahelreaktsioon viiakse läbi inimestel, kes on hepatiidi patogeeni immunoloogiliste analüüside abil avastatud. Sellisel juhul määratakse kindlaks isiku nakatumise fakt ja haiguse staadium. Lisaks võimaldab analüüs analüüsida viiruse alamtüüpi, mis on eriti tähtis ravimite valimisel.
Järgmine kohustuslike laboratoorsete uuringute periood on 3 kuud viirusevastase ravi algusest peale. Diagnostika võimaldab hinnata ravimite efektiivsust, reguleerida annust või asendada need.
Lisaks põhilistele testidele võib PCR-i täiendavalt teha 4 ja 24 nädala jooksul alates ravi algusest. Haiguse positiivset prognoosi kinnitab viiruse koormuse langus pärast kolme ravikuumi. Näiteks peaks see vähenema 1 miljonilt RÜ / ml kuni mitusada tuhandeni.
Kui patogeensete ainete kontsentratsioon veres jääb samal tasemel või veidi suureneb, viitab see viirusevastaste ravimite ebaefektiivsusele ja nõuab nende asendamist. PCR-i kasutamine ravi lõpus on võimalik kinnitada patsiendi taastumist.
Laboratoorse diagnostika tulemuste korrektseks tõlgendamiseks on vaja konsulteerida hepatoloogide või nakkushaiguste spetsialistiga. Võttes arvesse ELISAs vale vastuse sagedust, kasutatakse analüüsi ainult esialgse sõeluuringu jaoks. Patsiendi kasutatud polümeraasi ahelreaktsiooni põhjalikumaks uurimiseks.
Kuidas saada C-hepatiidist 97% tõenäosusega?
Tänapäeval on uued põlvkonnad Sofosbuvir ja Daclatsvir kaasaegsed uimastid 97-100% -lt hepatiit C-i raviks. Uued ravimid saab Venemaalt India farmatseutilise hiiglaskonna Zydus Heptiza ametlikust esindajast. Tellitud ravimid toimetatakse kulleriga 4 päeva jooksul, maksmine saabub kättesaamistõendiga. Hankige tasuta konsultatsioon tänapäevaste uimastite kasutamise kohta, samuti saate teada omandamise viiside kohta, saate seda tarnija Zyduse ametlikul veebisaidil Venemaal.