C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivne analüüs
Hepatiit on tõsine haigus, millel on palju põhjuseid. Selle arengu alus on maksa otsene või kaudne kahjustus. Arvestades selle tähtsust kogu organismi jaoks, saab ainult arvata, kui raske on patoloogia. Käesolevas artiklis uurime üksikasjalikult hepatiidi C kursuse tunnuseid ja laboratoorset diagnoosimist.
Selle haiguse põhjus on viirusne agens, mis viitab RNA-d sisaldavatele patogeenidele. Sellel on oma eripära - võime muteeruda, st muuta oma struktuuri. Selle tagajärjel põeb infektsioon immuunsüsteemi rünnakust ja põhjustab enamikul juhtudest maksa kroonilist põletikku.
Võttes arvesse viiruse erinevate alatüüpide olemasolu, peaks ravimite valimine põhinema genotüpiseerimise tulemustel. Vaatamata haiguse ja HCV struktuuri pikaajalisele uuringule ei ole veel võimalik välja töötada spetsiifilist vaktsiini haiguse jaoks.
Varasema diagnoosimise raskused seisnevad hepatiidi asümptomaatilises suunas, mille tagajärjel viibib inimene arst tsirroosi ajal. Selle haiguse tuvastamiseks on vaja regulaarseid terviseuuringuid. Vere laboratoorsete uuringute abil on võimalik tuvastada HCV-d ja vältida teiste saastumist. Fakt on see, et nakkuse kandja võib pikka aega patoloogiat unustada ja jätkata viiruse edastamist tervetele inimestele.
Edastamise viisid
Enamikul juhtudel levib viirus läbi vere, kuna see sisaldab kõige rohkem patogeensete ainete kontsentratsiooni. Seega nakatumine edastatakse:
- hemodialüüsi teel;
- nakatunud nõelaga;
- võitluses, kui nahk on vigastatud, ja vere kokkupuude toimub;
- vereülekanne (vereülekanne).
Infektsiooni tõenäosus intiimsuses on ebaoluline, sest sperma ja tupe väljalangemine sisaldavad väheses koguses patogeene. Nakatumise oht on oluliselt suurenenud, rikkudes sellega suguelundite limaskestade terviklikkust. Seda täheldatakse agressiivsel ja anaalseks.
Mis puudutab vertikaalset edastusviisi, siis seda tehakse tööprotsessis. Loote rinnaga toitmise perioodil ei pruugi patogeen sisestada platsenta embrüost. Loodusliku sünnituse ajal suunatakse patogeenne aine lapsele, kui nahk on vigastatud, kui täheldatakse kokkupuudet emade verega.
Pärast patogeeni tungimist tervislikule organismile algab antikehade süntees, mis kaitsevad nakkust ja kuuluvad immuunsüsteemi. Neid leidub ELISA esialgses uuringus.
Patsiendi diagnoosi kinnitamiseks tehakse polümeraasi ahelreaktsioon. See on patogeense toimeaine geneetilise materjali analüüs ja viiruse koormuse määramine.
Hepatiidi C laboratoorsed diagnoosid
Laboratoorsed diagnoosid algavad ensüümi immuunanalüüsiga. Selle peamine ülesanne on avastada patogeeni vastu toodetud antikehasid. Selle efektiivsus on peaaegu 95%. Tänu sellele uuringule on viiruse kandja võimalik kindlaks määrata prekliinilises faasis ja saata selle edasiseks uurimiseks.
ELISA kvalitatiivne analüüs näitab immunoglobuliinide esinemist või puudumist patsiendi veres. Selle tulemus võib olla positiivne või negatiivne. Esimene vastus on saadetud, saadeti järgmine eksam - PCR. Selle hind sõltub reaktiivide ja labori kvaliteedist. Polümeraasi ahelreaktsiooni maksumus võib ulatuda 4000 rubla juurde.
PCR-funktsioonid
Kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni, võimaldab isegi väike kogus bioloogilist materjali hinnata viiruse koormust veres, see tähendab patogeenide kontsentratsiooni arvutamiseks ühe milliliitri vedeliku kohta.
PCR-i tulekuga on hepatiidi diagnoos muutunud palju lihtsamaks. Analüüs võimaldab kindlaks teha HCV RNA, et kindlaks teha nakkusprotsessi faas ja viiruse kandja nakkuslikkus.
Geneetiline diagnoos on mitu liiki:
- Hepatiit C PCR-i kvalitatiivne analüüs - kinnitab HCV olemasolu või puudumist isiku veres:
- mille abil saate arvutada viiruste kontsentratsiooni ja kindlaks teha haiguse staadium. Tulemuseks on IU / ml või koopiad / ml (olenevalt laborist);
- genotüpiseerimine - vajalik HCV genotüübi määramiseks. See on vajalik ravimite täpse valimise jaoks, mis on käesoleval juhul kõige tõhusamad. Analüüs kaudselt näitab patoloogilise protsessi raskust maksas. Seega, patogeeni kolmanda genotüübiga vaadeldakse kõige sagedamini steatoosi, mille aluseks on rasvade kogunemine hepatotsüütides (selle rakkudes). Lisaks sellele mõjutab viiruse tüüp terapeutilise ravikuuri tulemust ja kestust.
C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivne analüüs
Kõigepealt uuritakse laboratooriumis bioloogilist materjali HCV RNA olemasolu kohta. On oluline meeles pidada, et C-hepatiidi kvalitatiivsel analüüsil on teatav tundlikkus ja seetõttu ei pruugi see alati õige vastuse anda. Sellisel juhul soovitatakse laboratoorne diagnostika uuesti läbi viia, kasutades teisi reaktiive.
Usaldusväärsete tulemuste saamiseks tuleks kasutada katsesüsteeme, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml.
Diagnostiline tulemus võib olla kas "positiivne" või "negatiivne". Kui patogeeni ei leita verest, on uuring lõpule viidud. Kui proovi tuvastatakse patogeenset ainet, siis mõõdetakse viiruse koormus.
Kui protsessi rikutakse, saadakse valenegatiivne vastus, näiteks aktiivsed komponendid, mis takistavad patogeeni koopiate konstrueerimist keskkonda. Seega ei ole võimalik tõestada verepildi, mistõttu inimese infektsiooni ei diagnoosita.
Valepositiivseid tulemusi on võimalik saada, kui bioloogilise materjali kogumise toru ja uuringu keskkond on saastunud. Lisaks sellele on sellise analüüsi vastus võimalik segatüüpi infektsioonidega, kui maksa mõjutavad mitmed viirused, näiteks C- ja D-hepatiit.
Kvalitatiivsete uuringute näitajad
Arst võib välja kirjutada patsiendi kvalitatiivse uuringu hepatiit C viiruse RNA identifitseerimise kohta:
- positiivse või kahtlase ensüümi immuunanalüüsi vastuse saamisel;
- diagnoosi kontrollimiseks;
- viiruse koormus;
- haigusseisundi kindlaksmääramine;
- segainfektsiooni diagnoosimine. C-hepatiit nakatab sageli maksa samaaegselt "D-viirusega";
- terapeutilise taktika määramine, võttes arvesse põhjustava toimeaine genotüübi;
- viirusevastaste ravimitega ravi ajal muutuste dünaamika hindamine.
Polümeraasi ahelreaktsiooni eelised hõlmavad järgmist:
- tehnika ülitundlikkus, mis võimaldab tuvastada nakkuste faktilist staadiumi;
- patogeeni geneetilise materjali identifitseerimine, mitte selle antikehad;
- võimalust luua patogeense toimeaine alamtüüp;
- diagnoosimise kiire kiirus, sest see ei nõua toitainekeskkonna materjali külvamist ja piisab spetsiifiliste katsesüsteemide kasutamisest. Isik saab tulemuse 5 tunni pärast;
- mitmekülgsus. Analüüs võimaldab kindlaks teha mis tahes geneetilist materjali (RNA, DNA). Seetõttu võib arst kinnitada C-hepatiidi ja teiste haiguste tüüpe (B);
- võime tuvastada latentset infektsiooni.
Kvantitatiivsed uuringud
Polümeraasi ahelreaktsiooni abil vere uuringus võib arvutada patogeenide arvu fikseeritud bioloogilise materjali koguses. Indikaator on esitatud RÜ / ml kohta. Analüüsi abil on võimalik määrata patsiendi nakatumise määr, kindlaks määrata nakkusprotsessi staadium ja hinnata ka ravimi teraapia efektiivsust.
PCR põhjal otsustab spetsialist, millised ravimite annused võivad patogeenide paljunemist blokeerida. Lisaks määratakse viirusevastase ravi kestus ja elu prognoos. On oluline meeles pidada, et testimissüsteemidel on kõrge tundlikkus, seega võimaldab meetod kinnitada inimese infektsiooni prekliinilises staadiumis.
Genotüüpimine
Võttes arvesse patogeeni võime muteeruda, on selle genotüüp vajalik ravivõtmise taktikaks ja viirusevastaste ravimite valimiseks. Näiteks B-hepatiidi HCV 1 ravi kestab 48 nädalat, kusjuures ainult 60% juhtudest täheldati positiivset suundumust. Genotüübid 2 ja 3 on soodsamad prognoosid. Viirusevastaseid ravimeid on ette nähtud 8 kuud ja nende efektiivsus jõuab 85% -ni.
Statistika kohaselt on enamikul juhtudel HCV 1, 2 ja 3 registreeritud Vene Föderatsioonis.
Laboratooriumi testide dekodeerimiseks võib selle vastuse näidata - "pole kirjutatud". See tähendab, et viirus tsirkuleerib patsiendi vereringesüsteemi ja seda ei saa testimissüsteem tunnustada. Antud juhul tehtud analüüsi tulemus näitab, et patogeen ei ole antud geograafilise piirkonna jaoks tüüpiline.
Kuidas saada usaldusväärseid tulemusi?
Et kvalitatiivne PCR-uuring PCR-i tuvastamiseks C-hepatiidi tekitaja jaoks näitas õigeid tulemusi, tuleb labori diagnostikat ette valmistada:
- vereproovi võtmine toimub tühja kõhuga ja "näljane" tühimik ei tohiks olla lühem kui 8 tundi;
- kaks päeva enne uuringut on soovitatav lõpetada alkohoolsete jookide joomine ja loobuda vürtsikastest, rasvunud ja suitsutatud roogadest;
- tühistada verehüübimist vähendavaid ravimeid, näiteks hepariini. Kui need ravimid on välja kirjutatud tervislikel põhjustel, peate sellest teatama arstile. Lisaks peab spetsialist olema teadlik teiste ravimite lubamisest, mis võivad mõjutada laboriuuringute tulemusi;
- Bioloogilise materjali kogumise eelõhtul ei tohiks füsioterapeutilisi protseduure läbi viia ning neid ei tohiks mõjutada tõsiselt füüsilist koormust.
Analüüsi tulemusi võib mõjutada mitte ainult veri annetav inimene, vaid ka muud tegurid, nimelt:
- halva kvaliteediga vereproovi võtmine;
- bioloogilise materjali transportimise soovituste mittetäitmine;
- laboritöötajate ebapiisav koolitus;
- uurimismetoodika mittevastavus;
- antikoagulantide (hepariini) sisseviimine vereproovi võtmise eel. See rühma ravimid vähendavad hüübimist, aeglustades seega reagentide tööd.
Erinevates laborites võib diagnostiline vastus veidi erineda, kuid need vead ei mõjuta uuringu lõpptulemust.
Erilist tähelepanu pööratakse katsesüsteemide tüüpidesse, mida laboris kasutatakse. Tihti eelistatakse kõrge tundlikkusega reaktiive. See on oluline madala viiruskoormusega patsientide jaoks, kuna seda on raske tuvastada.
Kui tihti tehakse laborikatset?
Primaarne polümeraasi ahelreaktsioon viiakse läbi inimestel, kes on hepatiidi patogeeni immunoloogiliste analüüside abil avastatud. Sellisel juhul määratakse kindlaks isiku nakatumise fakt ja haiguse staadium. Lisaks võimaldab analüüs analüüsida viiruse alamtüüpi, mis on eriti tähtis ravimite valimisel.
Järgmine kohustuslike laboratoorsete uuringute periood on 3 kuud viirusevastase ravi algusest peale. Diagnostika võimaldab hinnata ravimite efektiivsust, reguleerida annust või asendada need.
Lisaks põhilistele testidele võib PCR-i täiendavalt teha 4 ja 24 nädala jooksul alates ravi algusest. Haiguse positiivset prognoosi kinnitab viiruse koormuse langus pärast kolme ravikuumi. Näiteks peaks see vähenema 1 miljonilt RÜ / ml kuni mitusada tuhandeni.
Kui patogeensete ainete kontsentratsioon veres jääb samal tasemel või veidi suureneb, viitab see viirusevastaste ravimite ebaefektiivsusele ja nõuab nende asendamist. PCR-i kasutamine ravi lõpus on võimalik kinnitada patsiendi taastumist.
Laboratoorse diagnostika tulemuste korrektseks tõlgendamiseks on vaja konsulteerida hepatoloogide või nakkushaiguste spetsialistiga. Võttes arvesse ELISAs vale vastuse sagedust, kasutatakse analüüsi ainult esialgse sõeluuringu jaoks. Patsiendi kasutatud polümeraasi ahelreaktsiooni põhjalikumaks uurimiseks.
Kas teie arvates on C-hepatiidi ravimine võimatu?
Tänapäeval on uued põlvkonnad Sofosbuvir ja Daclatsvir kaasaegsed uimastid 97-100% -lt hepatiit C-i raviks. Uued ravimid saab Venemaalt India farmatseutilise hiiglaskonna Zydus Heptiza ametlikust esindajast. Tellitud ravimid toimetatakse kulleriga 4 päeva jooksul, maksmine saabub kättesaamistõendiga. Hankige tasuta konsultatsioon tänapäevaste uimastite kasutamise kohta, samuti saate teada omandamise viiside kohta, saate seda tarnija Zyduse ametlikul veebisaidil Venemaal.
Rnk hepatiit C viirus, mis see on
Hepatiit C viirus (HCV) põhjustab umbes 20% ägedast hepatiidist, 60-70% kroonilisest hepatiidist ja umbes 30% tsirroosist ja maksavähist. 1989. aastal avastatud HCV on Togaviridae perekonna perekonna Flaviviirus, suurus 40-60 nm, RNA-viirusega lipiidide sisalduse ülekaalulisus. On vähemalt 6 genotüüpi ja 50 serotüüpi HCV-st. HCV genotüübi või serotüübi (spetsiifilised genotüübi antikehad) tundmine on kasulik ravi soovitamiseks ja määramiseks. HCV levib nakatunud vere või saastunud veretoodete kaudu kokkupuutel: vereülekanne, nõelte ja süstalde kasutamine teise isiku järel ilma steriliseerimiseta või halvasti steriliseeritud, tätoveeringud, vaktsineerimine steriliseerimata seadmetega, hambaharja jagamine, raseerimiskomplekt, pintsetid, maniküüri komplekt. Esineb bioloogilistes keskkondades (sülg, piim, tupest eemaldamine, sperma jne), kuid madalam kontsentratsioon kui viirus B. Võib edastada emalt lootele. HCV-positiivse antihüpertensiivse veritsuse tase on hinnanguliselt 2,7-4,4%. HCV-HIV-koinfektsiooniga rasedatel on see näitaja 5,4-8,6%. Ligikaudu 85% akuutsest vormist muutub krooniliseks. Hepatotsellulaarne vähk võib esineda ligikaudu 20% -l maksa tsirroosiga patsientidest (keskmiselt üle 30 aasta) ja 1-5% neist on nakatunud HCV-ga.
Haiguse tekkimine on salajane, viirust nimetatakse ajapommiks või õrnaks tapjuseks. Seroloogilised aknad HCV esinemise ja HCV-vastase detektsiooni vahel erinevad erinevatel patsientidel. Praegused immunoloogilised testid avastavad antikehad keskmiselt 7-8 nädalat pärast haiguse algust. Spontaanse taastumise korral võib HCV-vastane antikeha püsida kogu elu jooksul või kahaneda järk-järgult mitme aasta jooksul. Kroonilise HCV-vastase antikehaga patsiendid püsivad määramata aja jooksul. Madala riskiga elanikkonna hulgas on diagnoosist väljalangevate inimeste arv 0,5-1%.
HCV RNA analüüs (hepatiit C viiruse RNA määratlus), mida sageli nimetatakse C-hepatiidi PCR-analüüsiks, on vereanalüüs, mis võimaldab teil otseselt identifitseerida hepatiidi viiruse geneetiline materjal (iga viirus on üks RNA osake). Seda katset tehakse kõige sagedamini PCR meetodi abil, seega on hepatiit C nimetus PCR. HCV RNA jaoks on olemas kvalitatiivsed ja kvantitatiivsed testid.
Kvalitatiivne analüüs näitab viiruse esinemist veres. See test tuleb läbi viia kõigile patsientidele, kellel on leitud C-hepatiidi antikehi. Selle tulemust saab tuvastada või mitte tuvastada. Võrdlusväärtused (väärtus, mis peaks olema normaalne) - ei tuvastatud. Leitud tulemus võib viidata sellele, et viirus paljuneb ja nakatab kõiki uusi maksarakke. Kvalitatiivne PCR-test on teatud tundlikkus. See tähendab, et kui viirus on veres väga madalal kontsentratsioonil (meetodi tundlikkuse lävi all), ei saa tulemust saavutada. Seetõttu on kõrge kvaliteediga PCR-i läbiviimisel madala vireemiaga (viiruse kontsentratsiooniga) patsientidel näiteks viirusevastane ravi vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkusest. Viroloogilise ravivastuse kontrollimiseks viirusevastase ravi ajal on soovitatav kasutada diagnostilist süsteemi, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml.
Patsiendi ettevalmistamine: Veresoonte paastumine
Materjal: vereplasma.
Hepatiit C viiruse RNA, kvantitatiivne määramine
Mis on hepatiit C RNA kvantitatiivne?
Hepatiidi RNA kvantitatiivne määramine PCR abil.
Analüütilised näitajad: C-hepatiidi viiruse RNA tuvastamine polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetodil ja viiruse koormuse määramine vereplasmas.
Määratud fragment on hepatiit C viiruse genoomi konservatiivne piirkond. Selle määramise spetsiifilisus on 98%. Tuvastus tundlikkus on 600 RÜ / ml viiruseosakesi vereplasmas.
Miks on tähtis teha C-hepatiidi viiruse RNA, kvantifitseerimine?
C-hepatiidi viiruse RNA-i kvantitatiivne iseloomustus kliinilistes proovides on oluline viirusevastase ravi efektiivsuse hindamiseks ja selle hepatiidi krooniliseks määramiseks prognostiline tähtsus. Kui viiruse kontsentratsioon on väiksem kui 8x 105 TÜ / ml (2x106 koopiat / ml), siis on raviskeemi prognoos juhul, kui see on suurem, siis on soovitatav kasutada muid raviskeeme. Viiruslik koormus alla 8 x 105 IU / ml (2x10 koopiat / ml) koos viiruse genotüübi määramisega on ravi efektiivsuse sõltumatu ja kõige täpsem parameeter. C-hepatiidi viiruse RNA kontsentratsiooni vähenemine 85% võrra kolmandal päeval pärast ravi alustamist on kiire ja täpne parameeter, mis ennustab ravi tõhusust, viies varakult viroloogilise ravivastuse.
Millised sümptomid kahjustavad C-hepatiidi viiruse RNA-d, kvantitatiivselt?
Analüüsi näitajad:
- Positiivne kvalitatiivne test hepatiit C viiruse RNA olemasolule seerumis.
- Patsientide ravi taktikate kindlaksmääramine.
- Ravi efektiivsuse täpne hindamine.
Kas sulle midagi häirib? Kas soovite rohkem teada saada C-hepatiidi viiruse RNA-d, kvantifitseerimist või muid analüüse? Või kas peate arsti vaatama? Saate kohtuda arstiga - Eurolab kliinikus on alati teie teenistus! Parimad arstid uurivad teid, annavad nõu, annavad vajalikku abi ja teevad diagnoosi. Võite ka kodus arsti kutsuda. Eurolab kliinik on teile avatud ööpäevaringselt.
Kuidas kliinikuga ühendust võtta:
Meie kliiniku telefoninumber Kiievis: (+38 044) 206-20-00 (mitme kanaliga). Kliiniku sekretär valib arstile sobiva päeva ja kellaaja. Meie koordinaadid ja juhised on siin näidatud. Vaadake üksikasjalikumalt kliiniku kõiki teenuseid oma isiklikul lehel.
Kui olete varem uuringuid läbi teinud, võtke kindlasti oma tulemused arstiga konsulteerimiseks. Kui uuringuid ei tehtud, teeme kõik, mis on vajalik meie kliinikus või kolleegidega teistes kliinikutes.
Peate olema oma üldise tervise juures väga ettevaatlik. On palju haigusi, mis esialgu ei ilmu meie kehas, kuid lõpuks selgub, et kahjuks on nad juba liiga hilja paraneda. Selleks peate arst läbi vaatama vaid mitu korda aastas. mitte ainult ennetada kohutavat haigust, vaid ka säilitada tervislikku meelt kehas ja kehas tervikuna.
Kui soovite küsida arstile küsimust - kasutage veebikonsultatsiooni sektsiooni. Võibolla leiate vastused oma küsimustele seal ja loe näpunäiteid enda eest hoolitsemise kohta. Kui olete huvitatud kliinikute ja arstide arvustustest - proovige leida vajalikku teavet foorumis. Samuti registreerige Eurolab meditsiiniportaal. hoida kursis värskeimate uudiste ja värskendustega saidi kohta C-hepatiidi viiruse RNA, kvantifitseerimise ja muude analüüside kohta saidil, mis saadetakse teile automaatselt posti teel.
Kui olete huvitatud kliiniku muudest testidest, diagnostikast ja teenustest tervikuna või teil on muid küsimusi ja soovitusi - kirjutage meile. me püüame sind aidata.
PCR analüüs
HCV RNA analüüs (hepatiit C viiruse RNA määratlus), mida sageli nimetatakse C-hepatiidi PCR-analüüsiks, on vereanalüüs, mis võimaldab teil otseselt identifitseerida hepatiidi viiruse geneetiline materjal (iga viirus on üks RNA osake). Seda katset tehakse kõige sagedamini PCR meetodi abil, seega on hepatiit C nimetus PCR. HCV RNA jaoks on olemas kvalitatiivsed ja kvantitatiivsed testid.
Kvalitatiivne analüüs näitab viiruse esinemist veres. See test on vajalik kõikide patsientide jaoks, kellel on leitud C-hepatiidi antikehi. Selle tulemust saab "avastada" või "ei leita." Võrdlusväärtused (väärtus, mis peaks olema normaalne) - "ei leitud". "Avastatud" tulemus võib viidata sellele, et viirus paljuneb ja nakatab kõiki uusi maksarakke. Kvalitatiivsel PCR-testil on teatud tundlikkus (10-500 RÜ / ml). See tähendab, et kui viirus esineb veres väga madalal kontsentratsioonil (meetodi tundlikkuse lävi allpool), siis saab "mitte tuvastatud" tulemuse. Seetõttu on kõrge kvaliteediga PCR-i läbiviimisel madala vireemiaga (viiruse kontsentratsiooniga) patsientidel näiteks viirusevastane ravi vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkusest. Viroloogilise ravivastuse kontrollimiseks viirusevastase ravi ajal on soovitatav kasutada diagnostilist süsteemi, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml. Selliseid kriteeriume täidavad näiteks HCB-TEST COBAS AMPLICOR analüsaatorid (analüüsitundlikkus 50 RÜ / ml või 100 koopiat / ml), RealBest HCV RNA (analüütiline tundlikkus 15 RÜ / ml või 38 koopiat / ml) ja teised.
Kulud pcr
PCR analüüs, mille maksumus sõltub kasutatavatest reagentidest ja võib ulatuda 300 rubla ulatuses. kuni 5000 rubla töötab ühest päevast nädalani.
Lisaks PCR meetodile kasutatakse transkriptsiooni amplifikatsiooni (TMA) ka HCV RNA tuvastamiseks, millel on parem tundlikkus (ligikaudu 5-10 IU / ml). Kuid see meetod pole Venemaal veel levinud.
Kui tihti tuleks PCR-hepatiit C teha? Tavaliselt tehakse seda viivitamatult pärast hepatiit C antikehade avastamist ja pärast viirusevastase ravi 4., 12., 24. ja 24. nädalat ning ka 24 nädalat pärast HTP lõpetamist ja seejärel igal aastal SVR-i puhul.
Joon. 1. Hepatiidi C kõrge kvaliteediga PCR-i tulemuste näide.
PCR-i kvantitatiivne analüüs (viiruskoormus) on test viiruse (vireemia) kontsentratsioonile veres. Viiruslik koormus on geneetilise materjali (viiruse RNA) ühikute arv, mis esineb teatavas vereosas (tavaliselt 1 ml, mis vastab 1 kuupsentimeetrile). See kogus väljendatakse numbritega, mõõtühikud IU / ml (rahvusvahelised ühikud milliliitri kohta). Viiruse kogust saab kuvada erineval viisil. Näiteks 1,5 miljonit RÜ / ml, mis vastab 1 500 000 RÜ / ml või 1,5 * 10 6 RÜ / ml kohta. Mõned laborid kasutavad teisi mõõtühikuid - koopiad / ml. Eksemplaride ümberarvestuskurss rahvusvahelistele üksustele on erinevates katsesüsteemides erinev. Ligikaudsed väärtused saab ümber arvutada, kasutades valemit 1 IU / ml = 4 koopiat / ml, näiteks 5,5 * 10 5 RÜ / ml = 2,2 * 10 6 koopiat / ml.
On oluline teada, et viiruse kontsentratsioon veres ja hepatiit C raskust ei ole otseselt seotud.
Mida mõjutab viiruskoormus?
Esiteks infektsioonilisusest. Mida kõrgem on viiruse kontsentratsioon, seda suurem on viiruse ülekandumise oht, näiteks seksuaalse kontakti kaudu või vertikaalselt. Teiseks, viiruse kontsentratsioon mõjutab ravi efektiivsust (kui ravi viiakse läbi interferooni alusel). Seega on väike viiruskoormus ravi ajal soodne tegur ja väga kõrge ebasoodus. Samuti on kvantitatiivne PCR interferoonravi läbiviimisel väga oluline, et hinnata selle edukust ja planeerida ravikuuri kestust. Niisiis, kiire ravivastuse ja väikese vireemia tagajärjel enne ravi alandamist võib ravi pikkust vähendada. Vastupidi, viiruse kontsentratsiooni aeglase vähenemisega võib HTP pikeneda.
Mis koormust peetakse madalaks ja mis on kõrge?
Koormus, mis on suurem kui 800 * 10 3 või 800 000 ME / ml, loetakse kõrgeks, mis on ligikaudu 300 x 10 4 või 3 000 000 koopiat / ml. Koormus üle 1 × 10 7 ME / ml loetakse väga kõrgeks. Kuid seni pole kõrgete ja madalate vireemiatega eristavate väärtuste vahel spetsialistide vahel üksmeelt. Seega mõnede tööde puhul on see näitaja 400 000 ME / ml.
Kui tihti vajate kvantitatiivset testi?
Seda tehakse tavaliselt enne ravi ja pärast 12. ravinädalat, et hinnata selle efektiivsust juhul, kui RNA määratakse kindlaks kvalitatiivse testiga.
Kvantitatiivse testi tulemuseks võib olla vireemia kvantitatiivne hindamine ülalkirjeldatud vormingus, samuti tulemused "mõõteriistade all" ja "ei tuvastatud".
Koguselise PCR tundlikkuse künnis on tavaliselt kõrgem kui kvalitatiivne. Seega on COBAS AMPLICORi süsteem 600 ME / ml. "Tuvastamata" tulemus võib tähendada, et kvantitatiivne test ja kinnitav kvalitatiivne test ei tuvastanud viiruslikku RNA-d. Tulemus "mõõtepiiri all" tähendab seda, et kvantitatiivne test ei näidanud hepatiit C RNA-d, kuid viirus on väga madalal kontsentratsioonil (juhul, kui tehti täiendavat kinnitavat kvalitatiivset testi).
Hepatiidi C kvalitatiivne analüüs
Jäta kommentaar 7,180
Polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne analüüs - C-hepatiidi PCR-i määramine määrab kindlaks HCV olemasolu või puudumise organismis. Laboratoorsetes tingimustes uuritakse RNA struktuuri, mis sisaldab viirust. Viiruse C avastamise korral on vaja läbi viia ravikuuri, sest maksa tähelepanuta jäetud seisund põhjustab tõsiseid tagajärgi. Kõrgekvaliteetne PCR viiakse läbi ka pärast taastumist, et kinnitada antikehade puudumist. Määratud tavapäraseks kontrollimiseks. PCR (kvalitatiivne), mis põhjustab vereseerumis madalat kontsentratsiooni, ei pruugi midagi tuvastada, kuna diagnostilise süsteemil on oma tundlikkuse piirväärtused. Haiguse esialgse või kerge vormi korral viiakse PCR ultra-diagnostika läbi ultra-tundlikes seadmetes.
Mis on RNA viirus?
C-hepatiidi viiruse (või C-hepatiidi viiruse RNA) termin RNA on maksahaigus ise. Viirus C seostub organismi tervete rakkudega sissetungimise kaudu. Aja jooksul levib kogu keha, on vaja ainult sattuda verdesse. Selle tulemusel tungib patogeen maksa sisse, kaitseb selle rakke ja teeb kõvasti tööd. Maksa rakud (hepatotsüüdid) töötavad selle mõju all, muutuvad ja sellest surevad nad. Mida kauem on viirus C maksas, seda suurem on rakkude arv. Aja jooksul arendada ohtlikke haigusi, mis põhjustavad pahaloomulise degeneratsiooni ja surma.
Maksa infektsioon selle tüüpi viirusega ei pruugi ilmneda väljastpoolt. Paljude aastate või aastakümnete vältel tunneb nakatunud inimene täiesti tervislikku seisundit ja sagedamini näitab patoloogiat ainult juhusliku uurimisega. Hepatiidi veres annetamisel uuritakse osa inimese RNA (ribonukleiinhappe) ahelast, mis on inimese geeni osa (DNA). Laboratoorsete uuringute tulemusi ei tohiks kasutada enesehoolduseks, sest see on ainult näitaja. Täpne pilt ja täiendav diagnoos on arsti poolt paremini kindlaks määratud.
Kui see on valmis: teadustöö näited
HCV kinnitamisel viiakse läbi PCR analüüs (polümeraasi ahelreaktsioon). PCR-uuringud aitavad patogeenset materjali leida RNA struktuuris ja määrata tõhus ravi. Nimetatud järgmistel juhtudel:
- maksa põletiku tunnuste avastamine;
- profülaktika uuringud ennetamiseks;
- kokkupuutuvate inimeste uurimine;
- segapärase hepatiidi diagnoos (peamise patogeeni kindlaksmääramine);
- viiruse paljunemisvõime taseme kindlaksmääramine kroonilises vormis;
- maksa tsirroos;
- et määrata ettenähtud ravi tõhusus.
PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs on olemas. Kvantitatiivne PCR näitab RNA protsentuaalset suhet viiruse kandjate hulka veres ja kvalitatiivne viiruse olemasolu või puudumine. Kvalitatiivne positiivne näitaja (C-hepatiidi RNA olemasolu) vajab ka kvantitatiivseid uuringuid. Hepatiidi põhjustava toimeaine kõrge kontsentratsioon seondub selle ülekandumise riskiga, teiste nakatamisega. Madal arv on paremini ravitav. RNA viiruste hulk veres ei ole seotud haiguse intensiivsusega. PCR-analüüs tehakse ka interferoonravi puhul, et määrata ravikuuri kestus ja keerukus.
Hepatiit C kõrge kvaliteediga PCR-analüüsi omadused
Polümeraasi ahelreaktsiooni indeksiga kvalitatiivne analüüs määratakse kõikidele patsientidele, kellel on veres C-hepatiidi antikehad. Haigestunud ja taastunud isikud peavad katse uuesti proovima. Soovitatav on läbida B-hepatiidi test, siis positiivse järelduse korral ja hepatiit D. Samuti tuleks kvalitatiivselt analüüsitud reaktsioon viia läbi koos teiste vereanalüüsidega. Analüüsid näitavad täielikku pilti viiruse levikust.
Katsetulemustest nähtub, et ainult C-hepatiidi positiivne test on nähtav või negatiivne, see tähendab viiruse olemasolu või puudumine. Kui väljund on "tuvastatud", siis viirus on ja on endiselt aktiivne. Nimetus "ei tuvastata" tähistab viiruse või selle väikese koguse puudumist. Selle indikaatoriga tuleks meeles pidada, et diagnostiliste süsteemide analüütiline tundlikkus on erinev ja et RNA hepatiit C võib ikkagi veres olla, kuid ei avaldu analüüsis.
Eriti tundlik PCR-meetod ultrahepatiit C avaldub isegi vähesel määral. Kasutatakse fluorestsentsi hübridisatsiooni uuringut, mis on mitu korda kõrgem kui tavalised PCR-süsteemid. Seda meetodit kasutatakse mitmel juhul:
- kahtlustatud peidetud C-hepatiidi vormid;
- PCR-diagnostika ei kinnita patogeeni, kuid seal on antikehi;
- tagasinõudmise korral;
- varajase nakkuse tuvastamiseks.
Dekodeerimisanalüüs
HCV dekodeerimine PCR-iga mõjutab lõplikku otsust diagnoosi andmisel eelkõige ultrametodmeetodil. Selle uuringu peamine puudus on proovi ja materjalide steriilsete tingimuste rangelt kinnipidamine. Väike kõrvalekalle mõnikord annab ebaõigeid analüütilisi järeldusi, raskendab diagnoosi ja järgnevat ravi. Hepatiidi RNA määramiseks PCR-i analüüs ei pruugi alati kindlalt näidata haiguse pilti, mõnikord on mõnikord ebatäpsed ja mõlemas suunas.
Hepatiidi viiruse diagnoosimisel soovitatakse kasutada terviklikku uuringut.
Näitajate norm
Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsi puhul peetakse uuringu tulemuste kohaselt viiruse hepatiit C JgM antikehade puudumist. Samal ajal näitavad seroloogilise analüüsi tulemused, et C-viiruse antikehade esinemine on samuti normaalne. Kvalitatiivne määratlus ei näita haiguse intensiivsust, see näitab ainult R-hepatiidi C põhjustatud agensit. Seda analüüsi korratakse pärast ravi, et kinnitada tegelikku taastumist.
Kõrvalekalded
Kui JgM antikehad esinevad HCV RNA-le, siis see viitab arenevale infektsioonile. Samaaegselt haigus jätkub ägedalt või krooniliselt, avaldub erinevates etappides. Kui antikehade arvu vähenemist registreeritakse, näitab analüüs, et ravitulemused saadi taastumise ajal. Diagnoosides leitakse ainult väga haruldasi valepositiivseid juhtumeid. Neid leidub naistel raseduse ajal ja teiste nakkushaigustega inimestel.
Rna hepatiit koos kvantifitseeritud normiga
C-hepatiidi viirus on võimeline vereringes paljunema ja põhjustada lümfoproliferatiivseid haigusi. Mitmete mutatsioonide tõttu väheneb keha immuunsuskaitse ning ilmnevad viiruse genotüübid ja alatüübid. Kindla tüüpi õige ja õigeaegne määramine sõltub viirusevastase ravi efektiivsusest. Infektsiooni oht on see, et haigus on asümptomaatiline. Ainult 15 protsenti 100-st võivad tunda iiveldust ja oksendamist, kehakaalu langust ja palavikku.
C-hepatiidi viiruse määratlus
Hepatiidi C normaalne määr on 40-60 nm suurune, kusjuures enamik lipiide on maksakahjustus, mis on tingitud ägeda või kroonilise haigusseisundi tekkimisest. C-hepatiit, täpsemalt Togaviridae perekonna RNA viirus, on äärmiselt püsiv, edastatakse vereülekandega või mittesteriilsete esemete, ebasobivate hügieenitarvete jms kaudu. Kvantitatiivne analüüs võimaldab teil uurida verd ja tuvastada nakatunud viiruse geneetiline struktuur.
Hepatiidi C ja selle genotüüpide määramiseks viiakse läbi kvantitatiivne analüüs. Sõltuvalt analüsaatorist saab määrata RNA viiruse esinemise kolme taseme.
Alatüübid võivad tekitada erinevaid modifikatsioone, seega peab analüsaatori spetsiifilisus ja tundlikkus olema sada protsenti. Lisaks haiguse tuvastamisele patsiendil on vaja määrata selle raskusaste. Mõnes laboris ei ole kõiki andmeid RNA viiruse dekodeerimise kohta, võib olla valepositiivne reaktsioon.
Nende näitajate uurimisel on hepatiit C uuringud täpsemad:
AlAT, AsAT; Leelispatare; LDH.
Nende näitajate tulemuste ja kehasüsteemi üldise seisundi jälgimiseks on kuvatud tulemus, mis näitab infektsiooni määra, veres C-hepatiidi rakkude arvu ja kuju ja arvu. See aitab kaasa paranemisele ja viirusevastase ravi efektiivsusele.
Hepatiidi C analüüsi liigid
Mitmemõõtmeline ahelreaktsioon (PCR) annab ideele DNA osakeste arvu patsiendianalüüsides ja tuvastab nakkusohu õigesti.
Nakkushaiguste tekitatud ained võivad esineda. Maksa infektsioon, näiteks C-hepatiit, on ravitav meie aja jooksul, kui see avastatakse õigeaegselt. Kui kahtlustatakse viirust, viiakse läbi PCR-analüüs.
Arvestades, et viiruse sümptomeid võib pikka aega maskeerida, ei pruugi inimene haiguse tekkimist tunda. Kuid põhjalikult uurides 60-70% juhtudest tuvastatakse C-hepatiit, esimene analüüs, mis on ELISA, siis PCR-diagnoos järgneb. Analüüs viiakse läbi teatud perioodidel, et määrata haiguse staadium ja määrata sobiv ravi. Selle tegemata ilma kõigi nende protseduuride rakendamiseta on võimalik vaktsineerida hepatiidi vastu.
Analüüs, mis hõlmab PCR-diagnoosi, annab pildi haigusest, kui aktiivne on viirus erinevates arenguperioodides.
Esiteks on olemas kvalitatiivne analüüs, mis üksnes kinnitab infektsiooni hüpoteesi ja seejärel kvantitatiivset, mis määrab maksa koormuse. Ideaalne võimalus oleks patsiendi geneetilisele materjalile C-hepatiidi negatiivne tulemus.
Kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs
On olemas kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Esimene on sisuliselt see, et see määrab infektsiooni esinemise veres. Ja see tähendab, et viirus nakatab terveid maksarakke. Kui patsiendil leitakse C-hepatiidi antikehad, viiakse kohe läbi kvalitatiivne test. Tulemuste määra peaks "veres mitte tuvastama". Viiruse kontsentratsiooni määramisel on vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkust, kuna patsiendid, kes saavad viirusevastast ravi, saavad analüüsi teha. Analüsaatori tundlikkuse määr ei tohiks olla väiksem kui 50 RÜ / ml.
Kui viirus avastatakse, tehakse kvantitatiivne analüüs, teisisõnu viiruse koormus, mis määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni veres ja haiguse raskusastme.
Viiruse RNA, mis on teatud koguses verd, määratletakse normina kiirusega 1 ml 1 sentimeetri kuubiku kohta. Pärast viiruskoormuse kvantifitseerimist on võimalik hinnata veel nakatamata keskkonda nakatumise määr. Niipea kui hepatiit C kontsentratsioon veres tõuseb, tuleb see eraldada keskkonda.
Esimestel etappidel on tähtis hepatiidi kontsentratsiooni kindlaksmääramine rehabilitatsiooni kiiruse kindlaksmääramiseks. Kui hepatiit C tõuseb üle 800000 RÜ / ml, siis peetakse seda liiga kõrgeks ja selle suurenemine on kuni 1 miljon - kriitiline. Kui kvantitatiivne vahemik on väiksem kui 400 tuhat RÜ / ml, siis leitakse, et nende ümbruse nakatumine on vähem tõenäoline. See näitaja selgitab, et C-hepatiit esineb väga väikestes annustes kehas. Analüüs ei suutnud määrata viiruse RNA osakeste kvantitatiivset väärtust, mistõttu on diagnoosi õigsuses korduvalt mitu korda määratud.
Kvantitatiivse analüüsi tulemused
Viirusliku koormuse hulga kindlaksmääramine patsiendi veres on nakkuse määra kindlakstegemine teistele.
Hepatiit C test
võimaldab hinnata viirusevastase ravi efektiivsust, infektsiooni taset ja nakatunud kudede arvu.
On oluline hoida ära haiguse progresseerumine, võtta õigeaegselt ennetusmeetmeid ja määrata PCR diagnostikale tuginev õige ravi. Kui tulemuste kohaselt on viiruse koormuse tase alla 400 tuh IU / ml, siis võib see kontsentratsioon olla minimaalne, mis näitab võimalikku täielikku taastumist. Positiivse tulemuse normiks on nakkuse puudumine.
PCR analüüsi tulemused:
Positiivne vastus tähendab, et bioloogilises materjalis esineb infektsioon. Analüüs võimaldab kindlaks määrata nakatunud rakkude täpse arvu. Negatiivne vastus viitab nakkuse puudumisele, mida hoolikalt läbi vaadatakse kehas.
Hepatiidi C kvantitatiivse määramise meetod on täpne ja informatiivne, mis viiakse läbi kõrgtundlikele seadmetele. Analüüsi tulemuste lahtikrüptimine võimaldab teil teada saada, kas nakkus ja selle eripära, et näha vähimat nakatunud rakkude arvu väga tundlikes analüsaatorites.
Analüüsimisel on harva antud valepositiivseid või vastupidiseid tulemusi, sagedamini toimub see immuunanalüüside uuringutes.
Viimasel ajal hakatakse otsimootorit "hepatiidi kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega" otsima Interneti-ressursside otsingumootorites.
Tõepoolest, hepatiidi viirus levib ja on ohtlik, haigus mõjutab maksa. Selle nimi pärineb latt. hepatiit on maksapõletik. Infektsioon toimub vere või sugulisel teel, sagedamini täiskasvanud on vanuses 25-50 aastat.
Selle haiguse on mitut tüüpi. C-hepatiit ei ereda raskusastmega, kuid 40-70% juhtudest muutub see krooniliseks, võib põhjustada tsirroosi ja vähki. See haigus nõuab andmete täpset diagnoosi ja tõlgendamist, mille jaoks on välja töötatud tehnikad. Üks neist on HCV RNA analüüs RNA abil PCR abil.
HCV RNA RNA analüüs PCR abil
RNA (ribonukleiinhape) on makromolekuli tüüp, mis on elusrakkude üks komponente. RNA vastutab geneetilise teabe kodeerimise eest. C-hepatiidi viirus sisaldab RNA molekuli ja kipub muteeruma. Tuntud on 6 selle alamtüübist, samuti paljudest alatüüpidest.
Sellel kroonilisel staadiumil esinev haigus põhjustab maksa fibroosi - sidekoed kasvavad, elundi struktuur laguneb järk-järgult. Fibroos on võimeline õigeaegseks raviks, kuna maks ei ole veel läbinud hävitavaid protsesse. Erinevalt tsirroosist, raske pöördumatu maksahaigus, mille korral fibroos võib tekkida, võtmata vajalikke meetmeid õigeaegselt.
Isik, kellel on kahtlus hepatiit B viiruse suhtes, määratakse selle antikehadega. Kui neid ei ole, siis haigus on välistatud, kui nad on kättesaadavad, siis nad kasutavad PCR-i (polümeraasi ahelreaktsiooni) meetodit. Molekulaarbioloogias on see eksperimentaalne, kuid nakkushaiguste diagnoosimise meetodite hulgas on see juhtiv koht. Sellega saate oluliselt suurendada molekulaarsete fragmentide kontsentratsiooni proovis. 10 päeva pärast nakatumist on RNA juba juba veres leidnud.
See meetod on ainus, mis suudab varases staadiumis haigust avastada. Muul viisil (näiteks biokeemiliste vereanalüüsidega) seda ei saa teha, kuna maks ei ole veel mõjutatud.
C-hepatiidi testid dekodeerimisega (PCR) on usaldusväärne näitaja viiruse olemasolust inimveres.
Seda meetodit avastas 1993 biokeemik Kerry Mullis, mille eest ta võitis Nobeli preemia. PCR oli läbimurre meditsiinis ja teaduses, kuna see võimaldas kiiresti ja täpselt tuvastada nakkusi veres ja teistes inimeste bioloogilistes materjalides. Teisisõnu on see meetod kiirendanud nakkushaiguste diagnoosimist.
HCV RNA RNA analüüs PCR abil on efektiivne järgmistel põhjustel:
on hästi tundlik - isegi väheses koguses viirust veres on tuvastatud; määratakse kindlaks viirus ise, mitte selle poolt loodud kõrvalsaadused; Kindla patogeeni tüüp on kindlaks määratud.
HCV RNA kvantitatiivse analüüsi erinevused kvalitatiivselt
PCR meetod hõlmab kahte peamist viisi, kuidas uurida bioloogilist materjali C-hepatiidi viiruse otsimiseks:
Nendel uuringutel on erinevad ülesanded.
Hepatiidi kvalitatiivne analüüs dekodeerimisega kinnitab viiruse olemasolu pärast haiguse antikehade leidmist juba veres. Kui uuring andis positiivse tulemuse, tuvastatakse haigus. Teisisõnu, inimene on nakatunud. Kui saadakse negatiivne tulemus, tähendab see seda, et inimene pole nakatunud või viiruse kontsentratsioon on liiga väike. Sellist kontsentratsiooni ei tuvastata.
Lisaks sellele põhineb haiguse kliiniline pilt hepatiit C markeritel ja analüüsi tõlgendamisel. Peamised markerid on immunoglobuliinid (antikehad) M ja G. Nende esinemine patsiendi veres näitab tervislikule organismile iseloomuliku protsessi. Nende antikehade olemasolu alusel määrab patsient reeglina esmase diagnoosi.
Kvantitatiivne analüüs on ette nähtud antikehade esmaseks avastamiseks ja vajadusel raviks.
Hepatiidi C kvantitatiivne analüüs on ette nähtud segatüüpi hepatiidi avastamiseks (mitmete viirustega nakatamine korraga).
Kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega toimub selleks, et:
lõpliku diagnoosi selgitamine; hoone prognoosid haiguse kulgu ja selle ravi - pikendamine, ravi vähendamine või taktika muutmine; jälgimisravi.
Rahvusvaheline IU / ml näitaja tähendab, et uuritakse RNA kogust 1 ml veres. Kõrge kvantitatiivne näitaja näitab teise inimese nakatumise suuremat tõenäosust.
Selleks, et tulemused oleksid tõesed, peate enne vere annetamist järgima kehtestatud režiimi:
tungida laborisse tühja kõhuga, viimane kord, kui võite süüa 8 tundi enne protseduuri; kaks päeva enne uuringut on keelatud alkohol, rasv ja praetud toidud; ultraheli, massaaži, füsioteraapiat enne uuringut ei saa läbi viia; ravim on päevas keelatud, kui teatud ravimite sissevõtmist on võimatu tühistada, teatatakse sellest enne vereproovide võtmist; enne protseduuri soovitatakse vähendada füüsilist ja närvi koormust nii palju kui võimalik.
Nende nõuete täitmine aitab saavutada hepatiidi C kvantitatiivse analüüsi õigeid tulemusi.
Kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine
Pärast kvantitatiivsete analüüsi indikaatorite saamist on vaja hepatiidi C testide tulemuste dešifreerida. Tulemused arvutatakse nii IU / ml ühikutes kui ka koopiatel ml kohta. Tulemuste saamiseks koopiateks teisendamiseks kasutage mitut tehnikat.
HCV monitor (konversioonitegur ME-le - 2,7); LCX HCV RNA (ümberarvestustegur ME-le - 3,8).
Tabel HCV RNA kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine PCR abil.
Medinfo.club
Portaal maksa kohta
HCV kvantitatiivne analüüs ja dekodeerimine
C-hepatiit on haigus, mis võib paljuneda tervete maksarakkudega ja provotseerida proliferatiivsete haiguste ilmnemist. Kaasaegses maailmas, kui hepatiidi viirus on läbinud teatud mutatsiooni, on inimese immuunsüsteem ohustatud, sest võrreldes infektsiooniga on see tähtsusetu. Samuti väärib märkimist, et mitte kõigil patsientidel ei esine esmakordselt haiguse esimesi tunnuseid, eriti varases staadiumis.
C-hepatiidi viiruse RNA-analüüs on kvantitatiivne uuring, mille norm on patsiendi veres viiruserakkude esinemise mõõdukas arv. Statistika kohaselt on ligikaudu 31% patsientidest sellest haigusest täielikult ravitud, kui see on algstaadiumis.
Meditsiinipraktikas märgivad arstid, et 4 miljonit nakatatud sümptomit ja esimest sümptomeid ei esine üldse, kuigi tähelepanuta jäetud hepatiidi vorm võib põhjustada maksatsirroosi või vähki.
Praegu kontrollitakse "vereülekande" protseduuri ajal seda verd C-hepatiidi viiruse esinemise suhtes, kuna see haigus levib doonorverega.
Täna on C-hepatiidi ravimid juba maailmas ilmnenud, kusjuures efektiivsus on lähedane 100% -le. Kaasaegne farmaatsiatööstus on loonud ravimeid, mis praktiliselt ei sisalda kõrvaltoimeid. Paljud patsiendid saavad esimesi tulemusi, mis leevendavad sümptomeid ja vähendavad viiruse koormust pärast nädala möödumist. Lisateavet hepatiidi ravimite kohta India tootest leiate meie eraldi artiklist.
Sofosbuvir Express on osutunud India hepatiit C ravimite transportimise turul. See ettevõte edukalt aitab inimestel haigusest enam kui kaks aastat taastuda. Siit leiate rahulolevate patsientide arvustused ja videod. Nende kontol on rohkem kui 4000 inimest, kes taastunud tänu ostetud ravimitele. Ärge jätke oma tervist kinni, minge www.sofosbuvir-express.com või helistage 8-800-200-59-21
PCR-uuringute liigid
PCR (polümeraasi ahelreaktsioon) on kõige kaasaegsem ja efektiivsem viis viiruse geeni ja selle võimaluste uurimiseks. Selline diagnostika on võimeline kindlaks määrama haiguse tüübi ja määrama selle edasise mutatsiooni patsiendi kehas.
Analüüs viiakse läbi, võttes vere, mis seejärel paigutatakse spetsiaalsetele reagentidele, milles toimub rakkude kloonimine.
Ühelt lahtrilt selgub kaks ja nii edasi. Selle tulemusena on sadu DNA-d, mille kaudu saate patogeeni diagnoosida ja varakult tuvastada viiruse.
Seetõttu on PCR jaotatud mitut tüüpi:
- kvalitatiivne analüüs - tunneb ära geenide infektsiooni veres. Kui patsiendi kvalitatiivse analüüsi ajal kinnitatakse haigust, siis tuleb nakkuse ulatuse kindlakstegemiseks läbi viia kvantitatiivne analüüs. Selle diagnoosi tulemusena kirjutavad eksperdid "avastatud / mitte tuvastatud". "Tuvastatud" - ütleb, et haigus esineb kehas ja selle RNA on juba identifitseeritud. "Ei leitud" - näitab viiruse geeni puudumist proovis, see tähendab, et hepatiidi RNA puudub. Kuid arstid soovitavad uuesti testida 10 päeva pärast.
- kvantitatiivne analüüs - määratakse vere infektsiooni geneetilise materjali kogus. Selline diagnoos aitab kindlaks teha haiguse tõsiduse ja kogu kliinilise ajaloo. Sellise analüüsi tulemusena saab kirjutada ainult "Positiivne / negatiivne / kehtetu". "Positiivne" - tähistab nakkavat koormust. Arst määrab haiguse diagnoosimise meetodi, et määrata ravi tõhusus 4, 12, 16 ja 24 nädala jooksul. Kui viiruse indikaator jääb vahemikku 8x10 RÜ / ml, on ravi efektiivne, kui määr on kõrgem, siis ei. "Negatiivne" - nakkusgeeni ei leitud. "Kehtetu" - see juhtub, kui viiruse geen avastati kvalitatiivselt, kuid see ei tuvastatud kvantitatiivse analüüsi käigus. Sarnane on tingimusel, et infektsioonide tase on madalam.
Erinevused kvalitatiivsel ja kvantitatiivsel analüüsil
C-hepatiidi viirust diagnoositakse peamiselt kvantitatiivse analüüsi tegemiseks, mille dekodeerimine on vajalik haiguse õigeks tõlgendamiseks. Kuid vaatamata sellele on kvalitatiivsetel ja kvantitatiivsetel diagnostilistel meetoditel erinevused, näiteks: uurimisele määratud roll ja ülesanded - kvalitatiivsed - kinnitavad infektsiooni esinemist pärast viiruse tuvastatud antikehade olemasolu ja kvantitatiivset - sekundaarset meetodit, mis leevendab või kinnitab haigust, et teha õige ja ainus diagnoos.
Kvantitatiivsete uuringute tõlgendamine
Pärast diagnoosi saavad tulemust tõlgendada ainult arstid, kuna neid ei tohiks näidetes näidata, vaid sõnades. Statistika järgi on kõige tundlikum proovimaterjal kvantitatiivne PCR. Selleks, et mõista, kas organismis esineb viirus, on vaja mõista ja teada, et hepatiidi C kvantitatiivset analüüsi tõlgendatakse infektsiooni digitaalse nimetuse (standardi) abil:
Rna hepatiit c
"Hepatiit C viiruse (HVC) geenide identifitseerimine patsiendi veres on selle nakkusliku patoloogia laboratoorse diagnoosi teine etapp. Selle patogeeni tuvastamiseks, millel puudub rakumembraan ja järelikult pinnaantigeenid, kasutatakse polümeraasi ahelreaktsiooni meetodit. Selle meetodi abil määratakse molekul otseselt, kus kogu selle geneetiline teave on kodeeritud - RNA.
RNA - Ribonukleiinhape koos DNA-ga on osa kõigi elusorganismide rakkudest. C-hepatiidi viirus sisaldab RNA molekuli ja on võimeline selle muteeruma.
HVC genoomi test on tavaliselt välja kirjutatud pärast üldist, biokeemilist vereanalüüsi ja positiivset vastust antikehadele (anti-HVC).
Mida see tähendab?
HVC-vastaste antikehade uurimine on skriinimine, st seda saab kasutada inimeste suurte populatsioonide uurimiseks (arstid, rasedad, haiglahaiged, doonorid, süstivad uimastitarbijad, HIV-nakkusega inimesed). Anti-HVC laboranalüüsi negatiivne tulemus näitab, et patsiendi veres ei tuvastatud viiruse immuunvastust. Sellistel juhtudel saab negatiivset tulemust:
Kui inimene pole kunagi olnud nakatunud hepatiit C vastu
Kui laborikatsete süsteemi tundlikkus oli madalam HVC-vastase kontsentratsioonist.
Kui nakkus tekkis vähem kui 2 kuud tagasi ja HVV-vastane veri ei piisa, et määrata. Kui inimtegurite tõttu on vale negatiivne reaktsioon.
Kui tulemuseks on see, et patsiendil leiti HVC-vastased antikehad, tähendab see seda, et C-hepatiidi viirus oli uuringu ajal patsiendi kehas või mõni aeg tagasi veres. Anti-HVC-ga positiivse tulemuse korral on vaja täiendavaid laboratoorseid uuringuid, mis tuvastavad patogeeni enda geneetilise materjali, määravad kindlaks tema geenide kontsentratsiooni (viiruse koormus, vireemia) ja genotüübi loomist.
Hepatiit C viiruse RNA analüüs
Laboratoorsetes tingimustes võib HVC genoomi tuvastada mitmete uuringute abil:
hargnenud DNA (p-DNA);
transkriptsiooni amplifikatsioon (TMA);
polümeraasi ahelreaktsioon (PCR).
P-DNA meetod on odav ja hõlbus viis viiruse genoomi avastamiseks paljudes uuritud inimestest. Selle peamine puudus on madal tundlikkus: see näitab HVC ainult siis, kui selle kontsentratsioon ületab 500 RÜ / ml.
Transkriptsioonilise amplifitseerimise meetod tuvastab seerumis viiruse nukleiinhapped. Analüüsil on suur tundlikkus (5-10 RÜ / ml), kuid see ei ole veel piisavalt integreeritud üldlevinud laboripraktikasse.
Venemaal PCR-meetod on kõige suurema tundlikkusega (50-60 RÜ / ml) kõige tavalisem ja ligipääsetav laborianalüüs.
PCR-uuring tehakse igas kliinilises laboris, millel on asjakohane akrediteering. Selle diagnostilise meetodi väga oluline nüanss, mis mõjutab analüüsi tulemust, on laboris kasutatava katsesüsteemi tundlikkus. Näiteks võimaldab diagnostiline tundlikkus 60 RÜ / ml, nagu Invitro Laboratories'is, viirusliku RNA avastamist 3 kuud pärast nakatumist. Katsesüsteemi madalal tundlikkusel ei pruugi patogeeni geene isegi 4 kuud pärast nakatumist avastada.
Hepatiit C viiruse RNA: PCR-meetod
PCR-meetodil on mitmeid eeliseid teiste HVC geenide tuvastamisel tehtavate laboratoorsete testide järele:
kõrge tundlikkus. Meetod võimaldab määrata patogeeni geneetilist materjali isegi selle minimaalse kontsentratsiooniga proovis;
suur spetsiifilisus. Määrab konkreetse genotüübi viiruse geenide seas erinevate DNA-de ja teiste patogeenide RNA-de, mis võimaldab patogeeni genotüpiseerimist;
hoidmise kiirus. Patogeeni pika protsessi puudumine lühendab tulemuse saavutamise aega kuni mitu tundi; analüüsi universaalsus.
Universaalne uurimisprotseduur võimaldab ühe inimese vereproovi samaaegset kasutamist erinevate patogeenide geneetilise materjali avastamiseks. Need eelised võimaldavad pidada PCR-i viirusliku hepatiit C laboratoorsel diagnoosimisel "kullastandardiks" koos anti-HVC ensüümi immunoloogilise testiga.
PCR on uuring, mida kasutatakse indiviidi veres HVC geenide määramiseks. Uuring koosneb mitmest etapist:
Biomaterjali proovide võtmine.
RNA koopiate kontsentratsiooni suurendamine korduvalt valitud proovis.
Geneetilise materjali avastamine spetsiaalsete katsesüsteemide abil.
Pärast patsiendi venoosse vere võtmist viiakse läbi kunstlikult HVC geenide mitmekordse replikatsiooni (amplifitseerimine, kopeerimine) protsessi käivitamine.
Selleks, et mõnel juhul muuta mitu korda tuumamaterjali koos biomaterjaliga. Kui katseklaasis oleva RNA koopiate arv jõuab soovitud väärtusele, viiakse patogeenide tuvastamine läbi spetsiaalse katse diagnostika.
kvalitatiivne (tuvastab viiruse olemasolu),
kvantitatiivne (määrab viiruse geenide kontsentratsiooni mahuühiku kohta)
genotüpiline (määrab patogeeni genotüübi).
Hepatiit C RNA: kvalitatiivne analüüs
Kvaliteetse PCR-i ülesanne on kindlaks määrata HVC esinemine esitatud biomaterjalis. See uuring viiakse tavaliselt läbi haiguse diagnoosimise või veo tuvastamiseks. Määrake see pärast HVC-vastase antikeha tuvastamist ELISA-ga.
Hepatiidi C diagnoosimiseks piisab, kui tuvastada HCV geenimaterjal kvalitatiivselt, st loendamata selle kontsentratsiooni veres. Kvaliteetse PCR-i tulemus võib olla: "RNA tuvastatakse" või "RNA ei tuvastata".
Meetodi täpsus vastab 95% -le. Samal ajal jõuab testi diagnostika iseenesest täpselt 100% ja laboratoorseteks uuringuteks on alati 5% inimfaktor. Vale negatiivse analüüsi vältimiseks, eriti madala vireemiaga inimestel, on uuringus kasutatud diagnostilise süsteemi kõrge tundlikkus vajalik. Katsesüsteemi tundlikkus ei tohiks olla väiksem kui 60 RÜ / ml.
Hepatiit C RNA: kvantitatiivne analüüs
Kvantitatiivne analüüs on ette nähtud, kui peate teadma vireemia taset inimkehas. Selle uuringu tegemise näpunäited on järgmised:
kõrge kvaliteediga PCR-i positiivne tulemus tingis viiruse antikehade tuvastamise;
patoloogia faas;
hepatiidi viiruse koormuse määramine;
kombineeritud viirusevastaste ravimite valik;
viroloogilise vastuse jälgimine viirusevastasele ravile;
ägeda hepatiit C ülemineku tõenäosuse hindamine kroonilisele.
Analüüsi tulemus väljendatakse IU / ml (rahvusvahelised ühikud 1 ml seerumis) või koopiate / ml (viiruse geenide koopiate arv 1 ml seerumis). Kvantitatiivne PCR ei ole normaalne: tavaliselt ei tohiks tuvastada HVC geeni inimveres. Uuringu tulemusi võrreldakse võrdlusväärtustega, mis on kehtestatud erineva viirusliku koormuse taseme jaoks.
Seega näitavad näitajad (RÜ / ml):
alla 4 x 10 x 5 peetakse madalaks vireemiaks;
alates 4 × 10 * 5 kuni 8 × 10 * 5 - keskmine;
üle 8 × 10 * 5 - kõrge.
Rohkem viiruse RNA koopiaid veres, seda agressiivsem haigus ja seda suurem on viiruse ülekandumise risk teistele inimestele. Kuid viiruse koormuse tase pole ainus näitaja, mis mõjutab patoloogia raskust ja patsiendi edasist prognoosimist: samuti on oluline patogeeni genotüüp.
Õige ravirežiimi määramiseks on vajalik genotüübi määramine. Samuti määrab see kindlaks patsiendi tervise ja elu prognoosi. Näiteks põhjustab viiruse genotüüp 3 sageli maksa fibroosi või maksatsirroosi, võrreldes genotüübi 1 kandjatega.
C-hepatiit: analüüsid ja transkriptsioon
RNA C-hepatiidi diagnoosimist ei saa teha ainult PCR-i kvalitatiivse ja / või kvantitatiivse analüüsi tulemustega: HVC määramine ja viiruse koormuse määramine ei ole piisav, et välja pakkuda piisavat viirusevastast ravi. Potentsiaalset patsienti tuleb uurida põhjalikult (kliiniliselt, laboratoorselt, instrumenteeritud), et saada objektiivne pilt patoloogilisest olukorrast. Hepatiidi C diagnoosi tuvastamiseks määrake õigesti uuringute kogum, mille tulemusi saab õigesti arendada ainult arst.