Rnk hepatiit C viirus, mis see on

Share Tweet Pin it

Hepatiit C viirus (HCV) põhjustab umbes 20% ägedast hepatiidist, 60-70% kroonilisest hepatiidist ja umbes 30% tsirroosist ja maksavähist. 1989. aastal avastatud HCV on Togaviridae perekonna perekonna Flaviviirus, suurus 40-60 nm, RNA-viirusega lipiidide sisalduse ülekaalulisus. On vähemalt 6 genotüüpi ja 50 serotüüpi HCV-st. HCV genotüübi või serotüübi (spetsiifilised genotüübi antikehad) tundmine on kasulik ravi soovitamiseks ja määramiseks. HCV levib nakatunud vere või saastunud veretoodete kaudu kokkupuutel: vereülekanne, nõelte ja süstalde kasutamine teise isiku järel ilma steriliseerimiseta või halvasti steriliseeritud, tätoveeringud, vaktsineerimine steriliseerimata seadmetega, hambaharja jagamine, raseerimiskomplekt, pintsetid, maniküüri komplekt. Esineb bioloogilistes keskkondades (sülg, piim, tupest eemaldamine, sperma jne), kuid madalam kontsentratsioon kui viirus B. Võib edastada emalt lootele. HCV-positiivse antihüpertensiivse veritsuse tase on hinnanguliselt 2,7-4,4%. HCV-HIV-koinfektsiooniga rasedatel on see näitaja 5,4-8,6%. Ligikaudu 85% akuutsest vormist muutub krooniliseks. Hepatotsellulaarne vähk võib esineda ligikaudu 20% -l maksa tsirroosiga patsientidest (keskmiselt üle 30 aasta) ja 1-5% neist on nakatunud HCV-ga.


Haiguse tekkimine on salajane, viirust nimetatakse ajapommiks või õrnaks tapjuseks. Seroloogilised aknad HCV esinemise ja HCV-vastase detektsiooni vahel erinevad erinevatel patsientidel. Praegused immunoloogilised testid avastavad antikehad keskmiselt 7-8 nädalat pärast haiguse algust. Spontaanse taastumise korral võib HCV-vastane antikeha püsida kogu elu jooksul või kahaneda järk-järgult mitme aasta jooksul. Kroonilise HCV-vastase antikehaga patsiendid püsivad määramata aja jooksul. Madala riskiga elanikkonna hulgas on diagnoosist väljalangevate inimeste arv 0,5-1%.


HCV RNA analüüs (hepatiit C viiruse RNA määratlus), mida sageli nimetatakse C-hepatiidi PCR-analüüsiks, on vereanalüüs, mis võimaldab teil otseselt identifitseerida hepatiidi viiruse geneetiline materjal (iga viirus on üks RNA osake). Seda katset tehakse kõige sagedamini PCR meetodi abil, seega on hepatiit C nimetus PCR. HCV RNA jaoks on olemas kvalitatiivsed ja kvantitatiivsed testid.


Kvalitatiivne analüüs näitab viiruse esinemist veres. See test tuleb läbi viia kõigile patsientidele, kellel on leitud C-hepatiidi antikehi. Selle tulemust saab tuvastada või mitte tuvastada. Võrdlusväärtused (väärtus, mis peaks olema normaalne) - ei tuvastatud. Leitud tulemus võib viidata sellele, et viirus paljuneb ja nakatab kõiki uusi maksarakke. Kvalitatiivne PCR-test on teatud tundlikkus. See tähendab, et kui viirus on veres väga madalal kontsentratsioonil (meetodi tundlikkuse lävi all), ei saa tulemust saavutada. Seetõttu on kõrge kvaliteediga PCR-i läbiviimisel madala vireemiaga (viiruse kontsentratsiooniga) patsientidel näiteks viirusevastane ravi vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkusest. Viroloogilise ravivastuse kontrollimiseks viirusevastase ravi ajal on soovitatav kasutada diagnostilist süsteemi, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml.

Patsiendi ettevalmistamine: Veresoonte paastumine

Materjal: vereplasma.

Hepatiit C viiruse RNA, kvantitatiivne määramine

Mis on hepatiit C RNA kvantitatiivne?

Hepatiidi RNA kvantitatiivne määramine PCR abil.

Analüütilised näitajad: C-hepatiidi viiruse RNA tuvastamine polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetodil ja viiruse koormuse määramine vereplasmas.

Määratud fragment on hepatiit C viiruse genoomi konservatiivne piirkond. Selle määramise spetsiifilisus on 98%. Tuvastus tundlikkus on 600 RÜ / ml viiruseosakesi vereplasmas.

Miks on tähtis teha C-hepatiidi viiruse RNA, kvantifitseerimine?

C-hepatiidi viiruse RNA-i kvantitatiivne iseloomustus kliinilistes proovides on oluline viirusevastase ravi efektiivsuse hindamiseks ja selle hepatiidi krooniliseks määramiseks prognostiline tähtsus. Kui viiruse kontsentratsioon on väiksem kui 8x 105 TÜ / ml (2x106 koopiat / ml), siis on raviskeemi prognoos juhul, kui see on suurem, siis on soovitatav kasutada muid raviskeeme. Viiruslik koormus alla 8 x 105 IU / ml (2x10 koopiat / ml) koos viiruse genotüübi määramisega on ravi efektiivsuse sõltumatu ja kõige täpsem parameeter. C-hepatiidi viiruse RNA kontsentratsiooni vähenemine 85% võrra kolmandal päeval pärast ravi alustamist on kiire ja täpne parameeter, mis ennustab ravi tõhusust, viies varakult viroloogilise ravivastuse.

Millised sümptomid kahjustavad C-hepatiidi viiruse RNA-d, kvantitatiivselt?

Analüüsi näitajad:

  • Positiivne kvalitatiivne test hepatiit C viiruse RNA olemasolule seerumis.
  • Patsientide ravi taktikate kindlaksmääramine.
  • Ravi efektiivsuse täpne hindamine.

Kas sulle midagi häirib? Kas soovite rohkem teada saada C-hepatiidi viiruse RNA-d, kvantifitseerimist või muid analüüse? Või kas peate arsti vaatama? Saate kohtuda arstiga - Eurolab kliinikus on alati teie teenistus! Parimad arstid uurivad teid, annavad nõu, annavad vajalikku abi ja teevad diagnoosi. Võite ka kodus arsti kutsuda. Eurolab kliinik on teile avatud ööpäevaringselt.

Kuidas kliinikuga ühendust võtta:
Meie kliiniku telefoninumber Kiievis: (+38 044) 206-20-00 (mitme kanaliga). Kliiniku sekretär valib arstile sobiva päeva ja kellaaja. Meie koordinaadid ja juhised on siin näidatud. Vaadake üksikasjalikumalt kliiniku kõiki teenuseid oma isiklikul lehel.

Kui olete varem uuringuid läbi teinud, võtke kindlasti oma tulemused arstiga konsulteerimiseks. Kui uuringuid ei tehtud, teeme kõik, mis on vajalik meie kliinikus või kolleegidega teistes kliinikutes.

Peate olema oma üldise tervise juures väga ettevaatlik. On palju haigusi, mis esialgu ei ilmu meie kehas, kuid lõpuks selgub, et kahjuks on nad juba liiga hilja paraneda. Selleks peate arst läbi vaatama vaid mitu korda aastas. mitte ainult ennetada kohutavat haigust, vaid ka säilitada tervislikku meelt kehas ja kehas tervikuna.

Kui soovite küsida arstile küsimust - kasutage veebikonsultatsiooni sektsiooni. Võibolla leiate vastused oma küsimustele seal ja loe näpunäiteid enda eest hoolitsemise kohta. Kui olete huvitatud kliinikute ja arstide arvustustest - proovige leida vajalikku teavet foorumis. Samuti registreerige Eurolab meditsiiniportaal. hoida kursis värskeimate uudiste ja värskendustega saidi kohta C-hepatiidi viiruse RNA, kvantifitseerimise ja muude analüüside kohta saidil, mis saadetakse teile automaatselt posti teel.

Kui olete huvitatud kliiniku muudest testidest, diagnostikast ja teenustest tervikuna või teil on muid küsimusi ja soovitusi - kirjutage meile. me püüame sind aidata.

PCR analüüs

HCV RNA analüüs (hepatiit C viiruse RNA määratlus), mida sageli nimetatakse C-hepatiidi PCR-analüüsiks, on vereanalüüs, mis võimaldab teil otseselt identifitseerida hepatiidi viiruse geneetiline materjal (iga viirus on üks RNA osake). Seda katset tehakse kõige sagedamini PCR meetodi abil, seega on hepatiit C nimetus PCR. HCV RNA jaoks on olemas kvalitatiivsed ja kvantitatiivsed testid.

Kvalitatiivne analüüs näitab viiruse esinemist veres. See test on vajalik kõikide patsientide jaoks, kellel on leitud C-hepatiidi antikehi. Selle tulemust saab "avastada" või "ei leita." Võrdlusväärtused (väärtus, mis peaks olema normaalne) - "ei leitud". "Avastatud" tulemus võib viidata sellele, et viirus paljuneb ja nakatab kõiki uusi maksarakke. Kvalitatiivsel PCR-testil on teatud tundlikkus (10-500 RÜ / ml). See tähendab, et kui viirus esineb veres väga madalal kontsentratsioonil (meetodi tundlikkuse lävi allpool), siis saab "mitte tuvastatud" tulemuse. Seetõttu on kõrge kvaliteediga PCR-i läbiviimisel madala vireemiaga (viiruse kontsentratsiooniga) patsientidel näiteks viirusevastane ravi vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkusest. Viroloogilise ravivastuse kontrollimiseks viirusevastase ravi ajal on soovitatav kasutada diagnostilist süsteemi, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml. Selliseid kriteeriume täidavad näiteks HCB-TEST COBAS AMPLICOR analüsaatorid (analüüsitundlikkus 50 RÜ / ml või 100 koopiat / ml), RealBest HCV RNA (analüütiline tundlikkus 15 RÜ / ml või 38 koopiat / ml) ja teised.

Kulud pcr

PCR analüüs, mille maksumus sõltub kasutatavatest reagentidest ja võib ulatuda 300 rubla ulatuses. kuni 5000 rubla töötab ühest päevast nädalani.

Lisaks PCR meetodile kasutatakse transkriptsiooni amplifikatsiooni (TMA) ka HCV RNA tuvastamiseks, millel on parem tundlikkus (ligikaudu 5-10 IU / ml). Kuid see meetod pole Venemaal veel levinud.

Kui tihti tuleks PCR-hepatiit C teha? Tavaliselt tehakse seda viivitamatult pärast hepatiit C antikehade avastamist ja pärast viirusevastase ravi 4., 12., 24. ja 24. nädalat ning ka 24 nädalat pärast HTP lõpetamist ja seejärel igal aastal SVR-i puhul.

Joon. 1. Hepatiidi C kõrge kvaliteediga PCR-i tulemuste näide.

PCR-i kvantitatiivne analüüs (viiruskoormus) on test viiruse (vireemia) kontsentratsioonile veres. Viiruslik koormus on geneetilise materjali (viiruse RNA) ühikute arv, mis esineb teatavas vereosas (tavaliselt 1 ml, mis vastab 1 kuupsentimeetrile). See kogus väljendatakse numbritega, mõõtühikud IU / ml (rahvusvahelised ühikud milliliitri kohta). Viiruse kogust saab kuvada erineval viisil. Näiteks 1,5 miljonit RÜ / ml, mis vastab 1 500 000 RÜ / ml või 1,5 * 10 6 RÜ / ml kohta. Mõned laborid kasutavad teisi mõõtühikuid - koopiad / ml. Eksemplaride ümberarvestuskurss rahvusvahelistele üksustele on erinevates katsesüsteemides erinev. Ligikaudsed väärtused saab ümber arvutada, kasutades valemit 1 IU / ml = 4 koopiat / ml, näiteks 5,5 * 10 5 RÜ / ml = 2,2 * 10 6 koopiat / ml.

On oluline teada, et viiruse kontsentratsioon veres ja hepatiit C raskust ei ole otseselt seotud.

Mida mõjutab viiruskoormus?

Esiteks infektsioonilisusest. Mida kõrgem on viiruse kontsentratsioon, seda suurem on viiruse ülekandumise oht, näiteks seksuaalse kontakti kaudu või vertikaalselt. Teiseks, viiruse kontsentratsioon mõjutab ravi efektiivsust (kui ravi viiakse läbi interferooni alusel). Seega on väike viiruskoormus ravi ajal soodne tegur ja väga kõrge ebasoodus. Samuti on kvantitatiivne PCR interferoonravi läbiviimisel väga oluline, et hinnata selle edukust ja planeerida ravikuuri kestust. Niisiis, kiire ravivastuse ja väikese vireemia tagajärjel enne ravi alandamist võib ravi pikkust vähendada. Vastupidi, viiruse kontsentratsiooni aeglase vähenemisega võib HTP pikeneda.

Mis koormust peetakse madalaks ja mis on kõrge?

Koormus, mis on suurem kui 800 * 10 3 või 800 000 ME / ml, loetakse kõrgeks, mis on ligikaudu 300 x 10 4 või 3 000 000 koopiat / ml. Koormus üle 1 × 10 7 ME / ml loetakse väga kõrgeks. Kuid seni pole kõrgete ja madalate vireemiatega eristavate väärtuste vahel spetsialistide vahel üksmeelt. Seega mõnede tööde puhul on see näitaja 400 000 ME / ml.

Kui tihti vajate kvantitatiivset testi?

Seda tehakse tavaliselt enne ravi ja pärast 12. ravinädalat, et hinnata selle efektiivsust juhul, kui RNA määratakse kindlaks kvalitatiivse testiga.

Kvantitatiivse testi tulemuseks võib olla vireemia kvantitatiivne hindamine ülalkirjeldatud vormingus, samuti tulemused "mõõteriistade all" ja "ei tuvastatud".

Koguselise PCR tundlikkuse künnis on tavaliselt kõrgem kui kvalitatiivne. Seega on COBAS AMPLICORi süsteem 600 ME / ml. "Tuvastamata" tulemus võib tähendada, et kvantitatiivne test ja kinnitav kvalitatiivne test ei tuvastanud viiruslikku RNA-d. Tulemus "mõõtepiiri all" tähendab seda, et kvantitatiivne test ei näidanud hepatiit C RNA-d, kuid viirus on väga madalal kontsentratsioonil (juhul, kui tehti täiendavat kinnitavat kvalitatiivset testi).

C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivne analüüs

Hepatiit on tõsine haigus, millel on palju põhjuseid. Selle arengu alus on maksa otsene või kaudne kahjustus. Arvestades selle tähtsust kogu organismi jaoks, saab ainult arvata, kui raske on patoloogia. Käesolevas artiklis uurime üksikasjalikult hepatiidi C kursuse tunnuseid ja laboratoorset diagnoosimist.

Selle haiguse põhjus on viirusne agens, mis viitab RNA-d sisaldavatele patogeenidele. Sellel on oma eripära - võime muteeruda, st muuta oma struktuuri. Selle tagajärjel põeb infektsioon immuunsüsteemi rünnakust ja põhjustab enamikul juhtudest maksa kroonilist põletikku.

Võttes arvesse viiruse erinevate alatüüpide olemasolu, peaks ravimite valimine põhinema genotüpiseerimise tulemustel. Vaatamata haiguse ja HCV struktuuri pikaajalisele uuringule ei ole veel võimalik välja töötada spetsiifilist vaktsiini haiguse jaoks.

Varasema diagnoosimise raskused seisnevad hepatiidi asümptomaatilises suunas, mille tagajärjel viibib inimene arst tsirroosi ajal. Selle haiguse tuvastamiseks on vaja regulaarseid terviseuuringuid. Vere laboratoorsete uuringute abil on võimalik tuvastada HCV-d ja vältida teiste saastumist. Fakt on see, et nakkuse kandja võib pikka aega patoloogiat unustada ja jätkata viiruse edastamist tervetele inimestele.

Edastamise viisid

Enamikul juhtudel levib viirus läbi vere, kuna see sisaldab kõige rohkem patogeensete ainete kontsentratsiooni. Seega nakatumine edastatakse:

  • hemodialüüsi teel;
  • nakatunud nõelaga;
  • võitluses, kui nahk on vigastatud, ja vere kokkupuude toimub;
  • vereülekanne (vereülekanne).

Infektsiooni tõenäosus intiimsuses on ebaoluline, sest sperma ja tupe väljalangemine sisaldavad väheses koguses patogeene. Nakatumise oht on oluliselt suurenenud, rikkudes sellega suguelundite limaskestade terviklikkust. Seda täheldatakse agressiivsel ja anaalseks.

Mis puudutab vertikaalset edastusviisi, siis seda tehakse tööprotsessis. Loote rinnaga toitmise perioodil ei pruugi patogeen sisestada platsenta embrüost. Loodusliku sünnituse ajal suunatakse patogeenne aine lapsele, kui nahk on vigastatud, kui täheldatakse kokkupuudet emade verega.

Pärast patogeeni tungimist tervislikule organismile algab antikehade süntees, mis kaitsevad nakkust ja kuuluvad immuunsüsteemi. Neid leidub ELISA esialgses uuringus.

Patsiendi diagnoosi kinnitamiseks tehakse polümeraasi ahelreaktsioon. See on patogeense toimeaine geneetilise materjali analüüs ja viiruse koormuse määramine.

Hepatiidi C laboratoorsed diagnoosid

Laboratoorsed diagnoosid algavad ensüümi immuunanalüüsiga. Selle peamine ülesanne on avastada patogeeni vastu toodetud antikehasid. Selle efektiivsus on peaaegu 95%. Tänu sellele uuringule on viiruse kandja võimalik kindlaks määrata prekliinilises faasis ja saata selle edasiseks uurimiseks.

ELISA kvalitatiivne analüüs näitab immunoglobuliinide esinemist või puudumist patsiendi veres. Selle tulemus võib olla positiivne või negatiivne. Esimene vastus on saadetud, saadeti järgmine eksam - PCR. Selle hind sõltub reaktiivide ja labori kvaliteedist. Polümeraasi ahelreaktsiooni maksumus võib ulatuda 4000 rubla juurde.

PCR-funktsioonid

Kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni, võimaldab isegi väike kogus bioloogilist materjali hinnata viiruse koormust veres, see tähendab patogeenide kontsentratsiooni arvutamiseks ühe milliliitri vedeliku kohta.

PCR-i tulekuga on hepatiidi diagnoos muutunud palju lihtsamaks. Analüüs võimaldab kindlaks teha HCV RNA, et kindlaks teha nakkusprotsessi faas ja viiruse kandja nakkuslikkus.

Geneetiline diagnoos on mitu liiki:

  1. Hepatiit C PCR-i kvalitatiivne analüüs - kinnitab HCV olemasolu või puudumist isiku veres:
  2. mille abil saate arvutada viiruste kontsentratsiooni ja kindlaks teha haiguse staadium. Tulemuseks on IU / ml või koopiad / ml (olenevalt laborist);
  3. genotüpiseerimine - vajalik HCV genotüübi määramiseks. See on vajalik ravimite täpse valimise jaoks, mis on käesoleval juhul kõige tõhusamad. Analüüs kaudselt näitab patoloogilise protsessi raskust maksas. Seega, patogeeni kolmanda genotüübiga vaadeldakse kõige sagedamini steatoosi, mille aluseks on rasvade kogunemine hepatotsüütides (selle rakkudes). Lisaks sellele mõjutab viiruse tüüp terapeutilise ravikuuri tulemust ja kestust.

C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivne analüüs

Kõigepealt uuritakse laboratooriumis bioloogilist materjali HCV RNA olemasolu kohta. On oluline meeles pidada, et C-hepatiidi kvalitatiivsel analüüsil on teatav tundlikkus ja seetõttu ei pruugi see alati õige vastuse anda. Sellisel juhul soovitatakse laboratoorne diagnostika uuesti läbi viia, kasutades teisi reaktiive.

Usaldusväärsete tulemuste saamiseks tuleks kasutada katsesüsteeme, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml.

Diagnostiline tulemus võib olla kas "positiivne" või "negatiivne". Kui patogeeni ei leita verest, on uuring lõpule viidud. Kui proovi tuvastatakse patogeenset ainet, siis mõõdetakse viiruse koormus.

Kui protsessi rikutakse, saadakse valenegatiivne vastus, näiteks aktiivsed komponendid, mis takistavad patogeeni koopiate konstrueerimist keskkonda. Seega ei ole võimalik tõestada verepildi, mistõttu inimese infektsiooni ei diagnoosita.

Valepositiivseid tulemusi on võimalik saada, kui bioloogilise materjali kogumise toru ja uuringu keskkond on saastunud. Lisaks sellele on sellise analüüsi vastus võimalik segatüüpi infektsioonidega, kui maksa mõjutavad mitmed viirused, näiteks C- ja D-hepatiit.

Kvalitatiivsete uuringute näitajad

Arst võib välja kirjutada patsiendi kvalitatiivse uuringu hepatiit C viiruse RNA identifitseerimise kohta:

  • positiivse või kahtlase ensüümi immuunanalüüsi vastuse saamisel;
  • diagnoosi kontrollimiseks;
  • viiruse koormus;
  • haigusseisundi kindlaksmääramine;
  • segainfektsiooni diagnoosimine. C-hepatiit nakatab sageli maksa samaaegselt "D-viirusega";
  • terapeutilise taktika määramine, võttes arvesse põhjustava toimeaine genotüübi;
  • viirusevastaste ravimitega ravi ajal muutuste dünaamika hindamine.

Polümeraasi ahelreaktsiooni eelised hõlmavad järgmist:

  1. tehnika ülitundlikkus, mis võimaldab tuvastada nakkuste faktilist staadiumi;
  2. patogeeni geneetilise materjali identifitseerimine, mitte selle antikehad;
  3. võimalust luua patogeense toimeaine alamtüüp;
  4. diagnoosimise kiire kiirus, sest see ei nõua toitainekeskkonna materjali külvamist ja piisab spetsiifiliste katsesüsteemide kasutamisest. Isik saab tulemuse 5 tunni pärast;
  5. mitmekülgsus. Analüüs võimaldab kindlaks teha mis tahes geneetilist materjali (RNA, DNA). Seetõttu võib arst kinnitada C-hepatiidi ja teiste haiguste tüüpe (B);
  6. võime tuvastada latentset infektsiooni.

Kvantitatiivsed uuringud

Polümeraasi ahelreaktsiooni abil vere uuringus võib arvutada patogeenide arvu fikseeritud bioloogilise materjali koguses. Indikaator on esitatud RÜ / ml kohta. Analüüsi abil on võimalik määrata patsiendi nakatumise määr, kindlaks määrata nakkusprotsessi staadium ja hinnata ka ravimi teraapia efektiivsust.

PCR põhjal otsustab spetsialist, millised ravimite annused võivad patogeenide paljunemist blokeerida. Lisaks määratakse viirusevastase ravi kestus ja elu prognoos. On oluline meeles pidada, et testimissüsteemidel on kõrge tundlikkus, seega võimaldab meetod kinnitada inimese infektsiooni prekliinilises staadiumis.

Genotüüpimine

Võttes arvesse patogeeni võime muteeruda, on selle genotüüp vajalik ravivõtmise taktikaks ja viirusevastaste ravimite valimiseks. Näiteks B-hepatiidi HCV 1 ravi kestab 48 nädalat, kusjuures ainult 60% juhtudest täheldati positiivset suundumust. Genotüübid 2 ja 3 on soodsamad prognoosid. Viirusevastaseid ravimeid on ette nähtud 8 kuud ja nende efektiivsus jõuab 85% -ni.

Statistika kohaselt on enamikul juhtudel HCV 1, 2 ja 3 registreeritud Vene Föderatsioonis.

Laboratooriumi testide dekodeerimiseks võib selle vastuse näidata - "pole kirjutatud". See tähendab, et viirus tsirkuleerib patsiendi vereringesüsteemi ja seda ei saa testimissüsteem tunnustada. Antud juhul tehtud analüüsi tulemus näitab, et patogeen ei ole antud geograafilise piirkonna jaoks tüüpiline.

Kuidas saada usaldusväärseid tulemusi?

Et kvalitatiivne PCR-uuring PCR-i tuvastamiseks C-hepatiidi tekitaja jaoks näitas õigeid tulemusi, tuleb labori diagnostikat ette valmistada:

  1. vereproovi võtmine toimub tühja kõhuga ja "näljane" tühimik ei tohiks olla lühem kui 8 tundi;
  2. kaks päeva enne uuringut on soovitatav lõpetada alkohoolsete jookide joomine ja loobuda vürtsikastest, rasvunud ja suitsutatud roogadest;
  3. tühistada verehüübimist vähendavaid ravimeid, näiteks hepariini. Kui need ravimid on välja kirjutatud tervislikel põhjustel, peate sellest teatama arstile. Lisaks peab spetsialist olema teadlik teiste ravimite lubamisest, mis võivad mõjutada laboriuuringute tulemusi;
  4. Bioloogilise materjali kogumise eelõhtul ei tohiks füsioterapeutilisi protseduure läbi viia ning neid ei tohiks mõjutada tõsiselt füüsilist koormust.

Analüüsi tulemusi võib mõjutada mitte ainult veri annetav inimene, vaid ka muud tegurid, nimelt:

  • halva kvaliteediga vereproovi võtmine;
  • bioloogilise materjali transportimise soovituste mittetäitmine;
  • laboritöötajate ebapiisav koolitus;
  • uurimismetoodika mittevastavus;
  • antikoagulantide (hepariini) sisseviimine vereproovi võtmise eel. See rühma ravimid vähendavad hüübimist, aeglustades seega reagentide tööd.

Erinevates laborites võib diagnostiline vastus veidi erineda, kuid need vead ei mõjuta uuringu lõpptulemust.

Erilist tähelepanu pööratakse katsesüsteemide tüüpidesse, mida laboris kasutatakse. Tihti eelistatakse kõrge tundlikkusega reaktiive. See on oluline madala viiruskoormusega patsientide jaoks, kuna seda on raske tuvastada.

Kui tihti tehakse laborikatset?

Primaarne polümeraasi ahelreaktsioon viiakse läbi inimestel, kes on hepatiidi patogeeni immunoloogiliste analüüside abil avastatud. Sellisel juhul määratakse kindlaks isiku nakatumise fakt ja haiguse staadium. Lisaks võimaldab analüüs analüüsida viiruse alamtüüpi, mis on eriti tähtis ravimite valimisel.

Järgmine kohustuslike laboratoorsete uuringute periood on 3 kuud viirusevastase ravi algusest peale. Diagnostika võimaldab hinnata ravimite efektiivsust, reguleerida annust või asendada need.

Lisaks põhilistele testidele võib PCR-i täiendavalt teha 4 ja 24 nädala jooksul alates ravi algusest. Haiguse positiivset prognoosi kinnitab viiruse koormuse langus pärast kolme ravikuumi. Näiteks peaks see vähenema 1 miljonilt RÜ / ml kuni mitusada tuhandeni.

Kui patogeensete ainete kontsentratsioon veres jääb samal tasemel või veidi suureneb, viitab see viirusevastaste ravimite ebaefektiivsusele ja nõuab nende asendamist. PCR-i kasutamine ravi lõpus on võimalik kinnitada patsiendi taastumist.

Laboratoorse diagnostika tulemuste korrektseks tõlgendamiseks on vaja konsulteerida hepatoloogide või nakkushaiguste spetsialistiga. Võttes arvesse ELISAs vale vastuse sagedust, kasutatakse analüüsi ainult esialgse sõeluuringu jaoks. Patsiendi kasutatud polümeraasi ahelreaktsiooni põhjalikumaks uurimiseks.

Kuidas saada C-hepatiidist 97% tõenäosusega?

Tänapäeval on uued põlvkonnad Sofosbuvir ja Daclatsvir kaasaegsed uimastid 97-100% -lt hepatiit C-i raviks. Uued ravimid saab Venemaalt India farmatseutilise hiiglaskonna Zydus Heptiza ametlikust esindajast. Tellitud ravimid toimetatakse kulleriga 4 päeva jooksul, maksmine saabub kättesaamistõendiga. Hankige tasuta konsultatsioon tänapäevaste uimastite kasutamise kohta, samuti saate teada omandamise viiside kohta, saate seda tarnija Zyduse ametlikul veebisaidil Venemaal.

Mis on hepatiit C RNA?

Hepatiit C viiruse RNA uuring on kõige olulisem protseduur, mis võimaldab teil täpselt määrata patsientide kestust ja ravimeetodeid. Haiguse diagnoos koosneb mitmest erinevast vereanalüüsist, näiteks:

  • hepatiit C markerid (anti-HCV);
  • hepatiit C viiruse RNA (HCV RNA) määramine.

Esimene uuring tehti esimesel hepatiidi kahtlusel. Teine võimalus on kõige olulisem HCV RNA ravis, nii et seda on üksikasjalikumalt käsitletud.

Mis on viirushepatiit C?

Viiruse hepatiit C või HCV on nakkushaigus, mis mõjutab maksa. Viirus nakatub läbi vere. Te võite nakatuda, tehes vereülekannet, kui meditsiiniseadmete steriliseerimise eeskirju ei järgita. Vähem sagedamini esineb juhtumeid, kui haigus saadakse sugulisel teel või rase emalt lootele. Hepatiit C võib olla kahte tüüpi.

Krooniline hepatiit C on kõige ohtlikum. See on haigus, mis võib kesta kogu elu. See põhjustab tõsiseid probleeme maksatalitluse, nagu tsirroos või vähk. 70-90% nakatunud inimestest muutub haigus krooniliseks.

Kõige olulisem C-hepatiidi oht on see, et see toimub salaja, ilma ikteriliste märkideta. Sel juhul kaebavad kõige sagedamini palavik, iiveldus ja oksendamine, füüsiline nõrkus, väsimus, isutus ja kehakaal. Samal ajal leiab ta pahatahtlikku degeneratsiooni takskoe väikese kõvenemise taustal üsna sageli. Sel põhjusel nimetatakse C-hepatiidi tihtipeale "ajapommi" või "kangekaelse tapjana".

Haiguse teine ​​tunnus on selle väga aeglane areng, mida hinnatakse kümneid aastaid.

Reeglina ei tunne nakatunud inimesed mingeid sümptomeid ja ei tea nende tegelikust seisundist. Tihti saab haigust tuvastada ainult siis, kui pöördute mõne teise isiku arsti poole.

Riski hulka kuuluvad:

  • lapsed, kes said oma emadest C-hepatiidi viiruse;
  • sõltlased;
  • inimesed, kes läbisid kehaosi või tätoveerisid mittesteriilsete vahenditega;
  • doonorvere või elundite saamine (kuni 1992. aastani, kui hemodialüüsi ei tehtud);
  • HIV nakatunud inimesed;
  • meditsiinitöötajad, kes puutuvad kokku nakatunud patsientidega.

Hepatiidi C RNA määramine

Hepatiit C viiruse RNA määratlus, mida nimetatakse ka C-hepatiidi PCRiks, on bioloogilise materjali (veri) uuring, mida saab kasutada hepatiidi viiruse genoomsete ainete otsese esinemise tuvastamiseks organismis (ükski viirus on üksiku RNA tükk).

Peamine katsemeetod on PCR või polümeraasi ahelreaktsiooni meetod.

HCV RNA jaoks on olemas kahte tüüpi vereanalüüsid:

Kvaliteedikontroll

Kvalitatiivse analüüsi tegemine võimaldab kindlaks teha, kas viirus on veres. Kõik patsiendid, kellel on leitud C-hepatiidi antikehad, peavad selle testi läbima. Selle tulemuste põhjal saate 2 vastust: "olemas" või "puudub" viirus. Positiivse testitulemusega (tuvastatud) saab hinnata viiruse aktiivset reproduktsiooni, mis nakatab maksas terveid rakke.

Kõrgekvaliteedilise PCR-iga läbiviidud test on kohandatud spetsiifilise tundlikkusega vahemikus 10 kuni 500 RÜ / ml. Kui hepatiidi viirus avastatakse veres, mille konkreetne sisaldus on väiksem kui 10 RÜ / ml, võib viiruse tuvastamine muutuda võimatuks. Vähese spetsiifilise viiruse sisaldus on täheldatud patsientide seas, kellel on välja töötatud viirusevastane ravi. Seepärast on oluline, et meditsiinilise süsteemi tundlikkus oleks kõrge, et diagnoosida ja määrata polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne tulemus.

Sageli viiakse C-hepatiidi polümeraasi ahelreaktsioon kohe pärast vastavate antikehade leidmist. Järgmised testid viirusevastase ravikuuri ajal viiakse läbi 4., 12. ja 24. nädalal. Ja pärast HTP lõpetamist tehakse veel 24 nädalat pärast analüüsi. Siis - kord aastas.

Kvantitatiivne test

PCR-RNA kvantitatiivne analüüs, mida mõnikord nimetatakse viiruse koormuseks, määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni (spetsiifiline sisaldus) veres. Teisisõnu, viiruslik koormus on defineeritud teatud viirusliku RNA kogusena, mis võib olla teatud koguses verd (tavaliselt on 1 ml, mis on võrdne 1 cm kuubikuga). Katse tulemuste ühikud on rahvusvahelised standardseadmed, mis on jagatud ühe milliliitri (RÜ / ml). Viiruse sisu tundub mõnikord erinevalt, see sõltub laboratooriumidest, kus uurimistööd läbi viiakse. Hepatiidi C puhul kasutatakse kvantitatiivselt mõnikord mõnda väärtust, näiteks koopiaid / ml.

Peate mõistma, et C-hepatiidi raskusastme puudumine selle tüve kontsentratsioonis veres ei sõltu.

Kontrollige viiruse laadimist, et saaksite määrata haiguse nakkushaiguse määra. Seega võib viirusega nakatumise oht suureneda hepatiidi kontsentratsiooni tõusuga veres. Lisaks vähendab viiruse kõrge sisaldus ravi mõju. Seetõttu on väike viiruskoormus edukaks raviks väga soodsa tegurina.

Lisaks sellele on C-hepatiidi katse ja selle kindlaksmääramine PCR-iga olulist rolli haiguse ravi rakendamisel ja ravi edukuse kindlaksmääramisel. Katsetulemuste põhjal on planeeritud rehabilitatsioonikursus. Näiteks, kui hepatiidi viiruse spetsiifiline kontsentratsioon on liiga aeglane, viirusevastane ravi on pikenenud ja vastupidi.

Tänapäeva meditsiinis arvatakse, et koormus on suurem kui 800000 ME / ml. Üle 10 000 000 ME / ml koormust peetakse kriitiliseks. Kuid erinevatest riikidest pärit ekspertidelt ei ole ikka veel arvamust viiruse koormuse piiride kohta.

Kvantitatiivse testi sagedus

Üldjuhul tehakse hepatiidi kvantitatiivne analüüs enne viirusevastast ravi ja 3 kuud pärast meditsiiniliste protseduuride lõppu tehtud ravi kvaliteedi määramiseks.

Selle tulemusena loetakse kvantitatiivseteks testideks eespool esitatud proovide tulemuste kvantitatiivseks hindamiseks. Selle tulemusel väljastatakse otsus "mõõdetud vahemiku all" või "ei tuvastata veres".

Kvalitatiivse testi tundlikkuse parameeter on tavaliselt väiksem kui kvantitatiivse analüüsi tundlikkus. "Kadunud" transkript näitab, et mõlemat tüüpi testid ei leidnud viiruse RNA-d. Kui testi indeks oli "mõõdetud vahemikust madalamal" madalam, ei leitud kvantitatiivset tüüpi analüüsi tõenäoliselt hepatiidi RNA-d, kuigi see kinnitab väga väikese spetsiifilise sisaldusega viiruse olemasolu.

C-hepatiit ja selle genotüübid

Hepatiit C viiruse RNA genotüüpide diagnoosimisel esinevad erinevad C-hepatiidi geneetilised tüübid. Teadust on teada rohkem kui 10 viirusliku genoomi tüüpi, kuid meditsiinipraktikal on piisav, et välja selgitada mitmed genotüübid, millel on selles piirkonnas suurim osa. Geneetilise tüübi kindlaksmääramine mängib olulist rolli ravi ajastamise valimisel, mis on väga vajalik, kui arvestada hepatiidi ravimite suure hulga kõrvaltoimetega.

Viirusliku hepatiidi C ravimeetodid

Ainuke tõhus viis hepatiidi viiruse raviks on reeglina kahe ravimiga: interferoon-alfa koos ribaviriiniga. Üksikult ei ole need ravimid sama tõhusad. Ravimite soovitatav annus ja kasutamise aeg tuleks määrata ainult arst ja individuaalselt iga patsiendi jaoks. Nende ravimitega võib ravi kesta võtta 6-12 kuud.

Täna ei leiutata ravimeid, mis tagavad sajaprotsendilise viiruse taastumise. Õige ravi korral võib patsientide paranemine ulatuda kuni 90% juhtudest.

C-hepatiidi markerid ja HCV RNA kvantitatiivsete tulemuste tõlgendamine

Viimasel ajal hakatakse otsimootorit "hepatiidi kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega" otsima Interneti-ressursside otsingumootorites.

Tõepoolest, hepatiidi viirus levib ja on ohtlik, haigus mõjutab maksa. Selle nimi pärineb latt. hepatiit on maksapõletik. Infektsioon toimub vere või sugulisel teel, sagedamini täiskasvanud on vanuses 25-50 aastat.

Selle haiguse on mitut tüüpi. C-hepatiit ei ereda raskusastmega, kuid 40-70% juhtudest muutub see krooniliseks, võib põhjustada tsirroosi ja vähki. See haigus nõuab andmete täpset diagnoosi ja tõlgendamist, mille jaoks on välja töötatud tehnikad. Üks neist on HCV RNA analüüs RNA abil PCR abil.

HCV RNA RNA analüüs PCR abil

RNA (ribonukleiinhape) on makromolekuli tüüp, mis on elusrakkude üks komponente. RNA vastutab geneetilise teabe kodeerimise eest. C-hepatiidi viirus sisaldab RNA molekuli ja kipub muteeruma. Tuntud on 6 selle alamtüübist, samuti paljudest alatüüpidest.

Sellel kroonilisel staadiumil esinev haigus põhjustab maksa fibroosi - sidekoed kasvavad, elundi struktuur laguneb järk-järgult. Fibroos on võimeline õigeaegseks raviks, kuna maks ei ole veel läbinud hävitavaid protsesse. Erinevalt tsirroosist, raske pöördumatu maksahaigus, mille korral fibroos võib tekkida, võtmata vajalikke meetmeid õigeaegselt.

Isik, kellel on kahtlus hepatiit B viiruse suhtes, määratakse selle antikehadega. Kui neid ei ole, siis haigus on välistatud, kui nad on kättesaadavad, siis nad kasutavad PCR-i (polümeraasi ahelreaktsiooni) meetodit. Molekulaarbioloogias on see eksperimentaalne, kuid nakkushaiguste diagnoosimise meetodite hulgas on see juhtiv koht. Sellega saate oluliselt suurendada molekulaarsete fragmentide kontsentratsiooni proovis. 10 päeva pärast nakatumist on RNA juba juba veres leidnud.

See meetod on ainus, mis suudab varases staadiumis haigust avastada. Muul viisil (näiteks biokeemiliste vereanalüüsidega) seda ei saa teha, kuna maks ei ole veel mõjutatud.

Seda meetodit avastas 1993 biokeemik Kerry Mullis, mille eest ta võitis Nobeli preemia. PCR oli läbimurre meditsiinis ja teaduses, kuna see võimaldas kiiresti ja täpselt tuvastada nakkusi veres ja teistes inimeste bioloogilistes materjalides. Teisisõnu on see meetod kiirendanud nakkushaiguste diagnoosimist.

HCV RNA RNA analüüs PCR abil on efektiivne järgmistel põhjustel:

  • on hästi tundlik - isegi väheses koguses viirust veres on tuvastatud;
  • määratakse kindlaks viirus ise, mitte selle poolt loodud kõrvalsaadused;
  • Kindla patogeeni tüüp on kindlaks määratud.

HCV RNA kvantitatiivse analüüsi erinevused kvalitatiivselt

PCR meetod hõlmab kahte peamist viisi, kuidas uurida bioloogilist materjali C-hepatiidi viiruse otsimiseks:

Nendel uuringutel on erinevad ülesanded.

Hepatiidi kvalitatiivne analüüs dekodeerimisega kinnitab viiruse olemasolu pärast haiguse antikehade leidmist juba veres. Kui uuring andis positiivse tulemuse, tuvastatakse haigus. Teisisõnu, inimene on nakatunud. Kui saadakse negatiivne tulemus, tähendab see seda, et inimene pole nakatunud või viiruse kontsentratsioon on liiga väike. Sellist kontsentratsiooni ei tuvastata.

Lisaks sellele põhineb haiguse kliiniline pilt hepatiit C markeritel ja analüüsi tõlgendamisel. Peamised markerid on immunoglobuliinid (antikehad) M ja G. Nende esinemine patsiendi veres näitab tervislikule organismile iseloomuliku protsessi. Nende antikehade olemasolu alusel määrab patsient reeglina esmase diagnoosi.

Kvantitatiivne analüüs on ette nähtud antikehade esmaseks avastamiseks ja vajadusel raviks.

Hepatiidi C kvantitatiivne analüüs on ette nähtud segatüüpi hepatiidi avastamiseks (mitmete viirustega nakatamine korraga).

Kvantitatiivne analüüs dekodeerimisega toimub selleks, et:

  • lõpliku diagnoosi selgitamine;
  • hoone prognoosid haiguse kulgu ja selle ravi - pikendamine, ravi vähendamine või taktika muutmine;
  • jälgimisravi.

Selleks, et tulemused oleksid tõesed, peate enne vere annetamist järgima kehtestatud režiimi:

  • tungida laborisse tühja kõhuga, viimane kord, kui võite süüa 8 tundi enne protseduuri;
  • kaks päeva enne uuringut on keelatud alkohol, rasv ja praetud toidud;
  • ultraheli, massaaži, füsioteraapiat enne uuringut ei saa läbi viia;
  • ravim on päevas keelatud, kui teatud ravimite sissevõtmist on võimatu tühistada, teatatakse sellest enne vereproovide võtmist;
  • enne protseduuri soovitatakse vähendada füüsilist ja närvi koormust nii palju kui võimalik.

Nende nõuete täitmine aitab saavutada hepatiidi C kvantitatiivse analüüsi õigeid tulemusi.

Kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine

Pärast kvantitatiivsete analüüsi indikaatorite saamist on vaja hepatiidi C testide tulemuste dešifreerida. Tulemused arvutatakse nii IU / ml ühikutes kui ka koopiatel ml kohta. Tulemuste saamiseks koopiateks teisendamiseks kasutage mitut tehnikat.

  • HCV monitor (konversioonitegur ME-le - 2,7);
  • LCX HCV RNA (ümberarvestustegur ME-le - 3,8).

Tabel HCV RNA kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine PCR abil.

Hepatiit C viiruse diagnoosimine

Hepatiit C viirus (HCV) on Flaviviridae perekonnast pärinev RNA-d sisaldav viirus. See nakk suudab korrutada vererakkudesse (monotsüüdid, neutrofiilid, B-lümfotsüüdid ja makrofaagid) ning mõjutada ka maksa enda rakke - hepatotsüüte. Selle mutatsioonide aktiivsuse tõttu on seda tüüpi hepatiit võimeline vältima kokkupuudet inimese immuunsüsteemiga.

Selles viiruses on 11 genotüüpi ja selle alamtüüpide mass, mis erinevad maksakahjustuse tasemest ja mõjutavad hepatiidi ravi kestust. Sellised mitmesugused C-hepatiidid nõuavad erinevaid viirusevastase ravimeetodeid. Näiteks tuleb hepatiit 1 ja 4 genotüüpe ravida 48 nädala vältel ja 2. ja 3. tüüpi viiruste raviks, võib see kesta ainult 24 nädalat.

Pärast seda, kui hepatiidi C kiire katse tulemus oli positiivne, viidi läbi viiruse RNA tuvastamiseks vereproovides PCR-analüüs.

PCR-diagnostika

Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on eksperimentaalne meetod viiruste tuvastamiseks. Selline C-hepatiidi analüüs võib märkimisväärselt suurendada mõnede DNA fragmentide või RNA viiruse kontsentratsiooni ülekantud proovides. See võimaldab neid ära tunda ja isegi numbrit lugeda.

See C-hepatiidi test viiakse läbi vastavalt järgmisele protseduurile:

  1. Proovitorusse sisestatakse vereproov (geneetiline materjal), mis võib sisaldada soovitud hepatiidi geeni. Sellel on paigutatud spetsiaalsed ained, praimerid, need on lühiajalised segmendid soovitud geenist, mis on keemiliselt sünteesitud. Sellele anumile on lisatud ka DNA või RNA polümeraas, mis suudab luua nukleiinhappe ahelaid, mis on täiesti identsed originaaliga. Saadud kompositsioonile lisati valikut vabu nukleotiide, mis on DNA ja RNA spetsiifilised ehitusmaterjalid, millest üks sisaldab radioaktiivse fosfori väikseid osakesi.
  2. Saadud segu kuumutatakse esialgu 95 kraadini, mille tagajärjel lahustuvad mõlemad DNA helikellid omavahel normaalses olekus.
  3. Analüüsi jätkamiseks jahutatakse ravimit, mille järel praimerid kinnituvad hepatiit-viiruse genoomi soovitud sektsioonile, takistades DNA moodustumist topelt-heeliksiks. Kui segu jahtub, otsib polümeraas nukleotiidide ahelaid. Selle ensüümi kinnitamise ajal libiseb see DNA ahelaga (plokina mööda köi) ja kahekordsel heeliksil ei saa seda "töödelda", segu soojendatakse sel eesmärgil.
  4. Analüüsi pikendamiseks viiakse uuesti läbi kuumutamine, mis viib nukleotiidide ahelate eraldumiseni. Kui proovid viiakse läbi sellistes PCR-tsüklites, suureneb soovitud hepatiidi geenide arv geomeetrilises proportsioonis ja ülejäänud geneetilised materjalid toodetakse (moodustatakse) ainult lineaarsel kujul.
  5. Uuringu lõpetamiseks puhastatakse lahus jääk-nukleotiidiosakestest. Need eraldatakse elektroforeesiga, eraldades DNA ahela molekulmassi parameetrid. Sellised hepatiit C testid, kasutades PCR-i, võimaldavad teil määrata, kas proovis on olemas soovitud viiruse geenid või mitte.

Selle testi eeliseks on PCR reaktsiooni väga kõrge künnis. Ideaaljuhul on sellise diagnoosi tehnika vaja kogu proovi jaoks ainult ühe viiruse genoomi kohta.

Lisaks on see PCR täiesti spetsiifiline. Igas geenis on unikaalne nukleotiidide järjestus, mis nagu sõrmejälge ei saa kuidagi korrata. Selle C-hepatiidi analüüsi jaoks sünteesitakse praimerid nii, et need vastavad absoluutselt soovitud geenide ainulaadsetele piirkondadele, mida pole teisel järjestusel.

See meetod võimaldab teil analüüsida ka hepatiit C ja määrata need, aidates lõpliku diagnoosi kindlaks teha.

Selline laborianalüüs annab rohkem teavet kui üksnes C-hepatiidi viiruse või muu tüüpi RNA olemasolu või puudumise vereproovides. Radioaktiivse kiirguse parameetri määramisel on võimalik kindlaks teha, kui palju soovitud geneetiline materjal oli algselt uuritavas proovis. See võimaldab teil määrata nn viiruse koormuse parameetri - hepatiidi RNA osakeste kontsentratsiooni teatud koguses.

PCR-i kvalitatiivne analüüs

See analüüs võimaldab määrata hepatiit B viiruse esinemist vereproovides. See peaks toimuma kõigile inimestele, kellel on leitud hepatiidi antikehasid.

Selliste uuringute tulemusel võib olla ainult kaks väärtust:

  • "Tuvastatud". Sellist positiivset testi tulemust tõlgendatakse järgmiselt: hepatiidi viiruse RNA bioloogilise materjali fragmentide analüüsitud proovist leiti. Sellest järeldub, et patsiendil oli see viirus nakatunud. See võib viidata sellele, et patogeeni hepatiit korvab kehas ja nakatab uusi rakke, hävitab maksa.
  • "Ei leitud." See tulemus näitab, et selles laboris analüüsitud proovis ei leitud C-hepatiidi viirusele spetsiifilisi RNA fragmente. Samuti on olemas võimalus, et patogeeni viiruse RNA kontsentratsioon uuritavas proovis oli nii väike, et test ei suutnud seda tuvastada.. Sellistel juhtudel öeldakse, et kontsentratsioonitase on analüüsi tundlikkuse läve madalam.

Selline test võib olla valepositiivne või valenegatiivne ka biomaterjali saastumise tõttu või analüüside jaoks vajalike keemiliste komponentidega reageerivate konkreetsete ainete olemasolust proovides.

Tuleb rõhutada, et hepatiit C ägedates faasides võib kvalitatiivne uuring, kasutades PCR meetodit, tuvastada selle RNA pärast 1-2 nädala möödumist organismi nakatumise hetkest. See tähendab, et haigust saab tuvastada juba ammu enne selle väliste sümptomite tekkimist või kehas hepatiidi antikehade ilmnemist.

Vereproovide võtmine (veenist) viiakse eelistatult läbi tühja kõhuga.

PCR kvantitatiivne analüüs

Selle analüüsi abil määratakse patsiendi hepatiidi viiruse kontsentratsiooni tase (viiruse koormus). Selline test tuleb läbi viia, et hinnata viiruse RNA kogust teatud koguse ühiku kohta.

Selle meetodi kohaselt läbi viidud hepatiit C-de desinfitseerimiskatsed võivad saada järgmisi tulemusi:

  • Kvantitatiivne näitaja (joonistel)

Viiruse kontsentratsioon (kogus) on esitatud arvuliselt. Selleks kasutatakse erinevaid mõõtühikuid: kas IU / ml (rahvusvaheline ühik milliliitri kohta) või koopiad / ml (viiruse RNA koopiate arv milliliitri kohta). Keskmiselt vastab 1 RÜ / ml 4 koopiat / ml, kuna erinevatel katsesüsteemidel on selliste ühikute jaoks erinevad ümberarvestuskoefitsiendid.

Madalad viiruse koormuse väärtused loetakse alla 400 000 RÜ / ml ja 8 000 000 RÜ / ml on kõrge.

Selline kvantitatiivne hindamine võimaldab kindlaks teha patsiendi haiguse (nakkusohu) nakkushaiguse taset. Mida rohkem see analüüsinäitaja on, seda suurem on patogeeni ülekandmise tõenäosus teistele inimestele (seksuaalse kontakti kaudu või vertikaalselt).

See kohtuotsus tähendab, et kvantitatiivne meetod ei suuda tuvastada hepatiidi RNA-d, kuid viirus ise on organismis olemas ainult väga madalates kontsentratsioonides. Seda kinnitas PCR täiendav kvalitatiivne analüüs ja selle positiivne tulemus kinnitab hepatiidi esinemise fakti.

  • Tulemust ei tuvastatud

    Analüüsi positiivne tõlgendamine näitab, et vereproovis sisalduv kvantitatiivne test ei suutnud tuvastada C-hepatiidi viiruse spetsiifilisi RNA osakesi.

  • Kvantitatiivne PCR analüüs, mida tehakse erinevatel viirusevastase ravi perioodidel (1., 4., 12. ja 24. nädal), võimaldab meil hinnata ravi efektiivsust ja teha vajalikud muudatused.

    Analüüsi spetsiifilisus

    See test tuleb läbi viia hepatiidi C erinevate genotüüpide kindlaksmääramiseks. Praegu on selle patogeeni ja selle paljudest alatüüpidest 11 genotüüpi. Meie riigis on I, II ja III liigi hepatiidi C genotüübid tavalised. Laboratooriumides on nad võimelised tuvastama nende liikide erinevaid alatüüpe: 1a, 1b, 2a, 2b või 3, 4, 5, 6 genotüübid koos erinevate alamtüüpide modifikatsioonidega. Kõigi nende hepatiidide korral on määramise eripära 100%.

    Genotüübi muutmise täpsustamine võimaldab valida sobiva ravi. Kindlat tüüpi genotüübi esinemine patsiendil ei viita sellele, et haigus on lihtsam või keerukam, need on ainult hepatiidi viiruse sortid ja mitte enam.

    Nendel juhtudel, kui viiruse genotüüpi ei saa laboris eraldada, võib tulemuseks olla: "pole kirjutatud. Uuriti genotüüpe: sellised-ja-sellised "(näiteks 1a, 2c, 3av). See dekodeerimine näitab, et selles laboris ei olnud sobivaid reagente, mis võiksid kindlaks määrata hepatiidi viiruse genotüübi. Uuringut testiti viiruste, loendi andmetega, kuid nende vastavust RNA proovidega ei tuvastatud.

    Lõpliku diagnoosi tegemiseks on ainult üks tüüpi analüüs ebapiisav. Iga katse võib anda valepositiivse tulemuse. Hepatiidi tüübi ja selle infektsiooni kahjustuse ulatuse täpseks määramiseks viige läbi põhjalik uuring. Selleks tehakse maksa biopsia ja testitakse ensüüme: ALT, ASAT, samuti leeliseline fosfataas ja LDH. Samuti võib läbi viia bilirubiini ja protrombiini indeksi analüüsi.

    Ainult selliste testide ja laboratoorsete testide kogum, milles on üldiselt analüüsitud patsiendi seisundit, aitab määrata kindlaks hepatiidi esinemist kehas, selle vormis ja raskusastmest. Nende põhjal saab arst määrata edasise ravi ja teha patsiendi jaoks võimalik prognoos.

    Hepatiit C PCR uuring: tüübid, näidustused, transkriptsioon

    Viiruse hepatiit C on tõsine haigus, mis tekib maksakahjustusega. Kaheksakümmend protsenti patsientidest muutub see krooniliseks. Viirus levib maksarakkudes - hepatotsüütides - ja põhjustab nende surma. Surnud kude asendatakse sidekoe fookustega, areneb fibroos.

    Mis areng maksa fibroos ei suuda täita oma ülesannet, hakkab tsirroosi, mis on ohtlik selle tüsistused: kasvavat survet värativeeni, seedetrakti verejooks, halvenenud vere hüübimist, vaimseid muutusi tõttu kahjustada aju tuumade mürgiseid aineid.

    Haiguse põhjuseks on viiruse nakatumine Flaviviridae perekonnast, mis kuulub RNA viiruste tüübi hulka. See tähendab, et geneetiline materjal, millega sünteesitakse patogeeni valgud, kodeeritakse ribonukleiinhappemolekulis. Infektsioon toimub vere kaudu, seksuaalselt ja rasedast naisest lootele. Kahjuks võib nakkuse ja antikehade tootmise algusest piisava ajaga edasi liikuda - kahe nädala kuni kuue kuu jooksul. See ei võimalda nakkuse tuvastamist immuunanalüüsi meetodil ja ravi alustamist ravi alustamiseks.

    Mis on PCR-analüüs?

    PCR on molekulaaranalüüsi meetod, mis võimaldab tuvastada patogeeni geneetilist materjali juba esimesel nädalal pärast infektsiooni, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni. Uuringul on kõrge spetsiifilisus, täpsus ja see võimaldab mitte ainult määrata viiruse olemasolu või puudumist, vaid ka selle kontsentratsiooni ja genotüüpi.

    Uuringuks võetakse patsiendi veri, milles võib potentsiaalselt paikneda viiruse RNA. Verele lisatakse praimerid - väikese pikkusega soovitud geeni kunstlikult sünteesitud piirkonnad ja RNA polümeraas on spetsiaalne ensüüm, mis suurendab korduvalt patogeeni geneetilist materjali. Spetsiaalse seadme kasutamisel viiakse läbi mitu kütte- ja jahutustsüklit. Seejärel analüüsitakse materjali ja võrreldakse viiruse tuntud geene, mille põhjal tehakse järeldus infektsiooni esinemise või puudumise kohta.

    C-hepatiidi PCR-analüüsi tüübid

    On olemas kolm tüüpi PCR analüüsi:

    1. PCR-i kvalitatiivne analüüs. Uuringu esimene etapp. See võimaldab tuvastada viiruse geneetilise materjali veres.

  • PCR kvantitatiivne analüüs. Võimaldab määrata viiruse koormuse - patogeeni geneetilise materjali kontsentratsiooni ühes milliliitris veres. See uuring viiakse läbi enne ravikuuri algust ja seejärel esimesel, neljandal, kaheteistkümnendal ja (kui see on pikk) ravi kahekümne neljandal nädalal, et hinnata selle efektiivsust.

  • Genotüüpimine Hepatiidi C põhjustav põhjustab sageli ja kiiresti mutante. Selles viiruse genotüübis leidus planeedil seitse varianti. Venemaal on levinud esimene, teine ​​ja kolmas tüüp. Igal genotüübil on erinev resistentsus ravile, näiteks esimese tüübi ravi efektiivsus on kuuskümmend protsenti, teisel ja kolmandal juhul on see arv kaheksakümmend viis. Seega, selleks, et valida sobivad ravimid ja määrata piisava kestusega ravikuur, on vaja täpselt määrata, millist tüüpi viirust patsient nakatub.
  • C-hepatiidi PCR-analüüsi näited

    PCR uuring määratakse järgmistel juhtudel:

    • kokkupuude haigega, kellel võib nakkust esineda;
    • positiivne ensüümi immuunanalüüs;
    • tsirroosi tunnused: maksa suuruse muutused, põrna suurenemine, nahaaluse venoosse põrnakujulise näo tekkimine;
    • maksakahjustuse sümptomite ilmnemine: valu paremal kõhul, naha kollasus;
    • ALAT ja ASAT aktiivsuse suurenemine vere biokeemilises analüüsis;
    • enne viiruskoormuse määramist ravi alustamiseks;
    • viirusevastase ravi efektiivsuse jälgimine;
    • pärast ravi, et kontrollida relapsi;
    • diagnoositud hepatiit B juuresolekul, et välistada segatüüpi maksakahjustus.

    C-hepatiidi PCR-uuringute selgitus

    Hepatiidi C dekodeerimise PCR-analüüs ja ensüümi immuunanalüüs tuleks teha hepatoloog või nakkushaiguste spetsialist. PCR-i tulemuste analüüsimine on vajalik kombinatsioonis vere biokeemilise analüüsi, biopsia ja ultraheli andmetega. Ainult kvalifitseeritud arst oskab analüüsida uuringute tulemusi ja määrata nende alusel õige ravi.

    Kvalitatiivse analüüsi dekodeerimine.

    Analüüsitud bioloogilises materjalis leiti patogeeni geneetiline materjal. Infektsioon on kinnitatud.

    Infektsioon puudub või patogeeni RNA kogus on tundlikkuse piirist madalam.

    Kvantitatiivse analüüsi dekodeerimine.

    Normaalne tase tervetele inimestele. See tähendab, et uuritavas materjalis ei ole C-hepatiidi RNA-d ega selle kontsentratsioon on uuringu tundlikkuse piirist madalam.

    RNA kontsentratsioon on alla kvantifitseerimise vahemiku. Neid tulemusi tõlgendatakse väga hoolikalt, korreleerige neid teiste uuringute andmetega, sageli uuesti õppige.

    Viirusekoormuse tase antud kontsentratsioonil peetakse madalaks. Tavaliselt tähendab viiruse vähenemine seda, et ravi on edukas.

    Rohkem kui 8 x 10 5 RÜ / ml

    Viirusekoormuse tase antud kontsentratsioonil peetakse kõrgeks.

    Rohkem kui 2,4 * 10 ^ 7 RÜ / ml

    RNA kogus on üle kvantifitseerimisvahemiku ülempiiri. Seda tulemust ei saa teha viirusliku koormuse astme kohta. Sellistel juhtudel korratakse katset vereproovi lahjendamisega.

    Genotüübi dekodeerimine.

    Tuvastatud genotüübi tuvastatud RNA

    Biomaterjalis tuvastati teatud genotüübi ja alatüübi C-hepatiidi viirus. Tulemus on kodeeritud rooma numbrite ja ladina tähtedega, näiteks - 1a, 2b. Kokku on seitse genotüüpi ja kuuskümmend seitse alamtüüpi, kuid Venemaal on ainult kolm esimest tüüpi.

    Hepatiit C viiruse RNA avastati

    Venemaal leiti haruldast genotüüpi veres olevat RNA-d, mida ei saa seostada esimese, teise või kolmanda tüübiga. Rohkem teadusuuringuid on vaja.

    See tulemus näitab, et patsient on tervislik või et patogeeni RNA on liiga väike.

    On võimalik, et C-hepatiidi PCR-analüüs on negatiivne ja ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs tuvastab viiruse vastased antikehad. See tähendab, et patsiendil oli äge hepatiit C ja ta taastati iseendale. Umbes 20 infektsiooni juhtumit põhjustab spontaanne taastumine, kui patsiendi organismil on infektsioonile piisavalt vastupanu.

    Kuigi PCR on väga täpne analüüs, võib selle tulemusi moonutada järgmistel juhtudel:

    • vere transporditi laborisse sobimatutesse tingimustesse, temperatuur oli rikutud;
    • biomaterjaliproov oli saastunud;
    • oli veres hepariini ja teiste antikoagulantide jääkide jäljed;
    • Leiti, et uurijad on inhibiitorid - ained, mis aeglustavad või peatavad polümeraasi ahelreaktsiooni.

    PCR-i eelised muude meetodite puhul

    1. Diagnoos alguses. PCR tuvastab põhjustava toimeaine geneetilise materjali. Immunofluorestsentsanalüüsi abil saab määrata ainult immunoglobuliine - aineid, mis organism tekitab infektsiooni suhtes. C-hepatiidi nakatumise korral võib intervall infektsiooni ja immuunvastuse alguse vahel olla mitu nädalat ja kuud, sel ajal on ELISA ebaefektiivne. PCR annab vastuse esimesel nädalal pärast infektsiooni.

  • Väike vea tõenäosus. Uuritavas materjalis määratakse geneetilise materjali pindala, mis on iseloomulik ainult ühele patogeenide tüübile. See kõrvaldab valed tulemused. Kui ELISA-vead on võimalikud, kuna sama tüüpi antikehi saab erinevate viiruste vastu vabastada - neid antikehi nimetatakse ristantikehadeks.

  • Kõrge tundlikkus. PCR võimaldab tuvastada haigusetekitaja RNA isegi minimaalsetes kogustes. See võimaldab tuvastada varjatud nakkusi.
  • Kuidas valmistuda vereannetamiseks PCR-uuringute jaoks

    C-hepatiidi PCR analüüsiks kogutakse venoosse verega verd. Tavaliselt võetakse patsiendi veeni korraga kaks vere osa: esimene saadetakse PCR-ile ja teine ​​ELISA-ga. Seda tehakse selleks, et täpsemalt hinnata, kui palju patsient on nakatunud viirusega ja kuidas immuunsus selle vastu võideldes.

    Tavaliselt peab patsient järgima järgmisi reegleid:

    • hommikul võetakse vereanalüüs;
    • Viimase toidukordi ja vereannetuse vaheline intervall peaks olema kaheksa kuni kümme tundi;
    • kaks või kolm päeva enne analüüsi on vaja loobuda praetud ja rasvases toidus ja alkoholis;
    • 24 tundi enne analüüsi peaks patsient vältima füüsilist koormust: ärge kandke raskusi, ärge minge jõusaali või basseini.

    Seotud Artiklid Hepatiit