Hepatiit B PCR

Share Tweet Pin it

Kaasaegsete hepatiit B (HBV) ravimite olemasolu, millel on selged näidustused nende manustamiseks, vajab diagnoosi täpset ja kiiret kontrollimist. Kuid haiguse esimestel nädalatel ja piiratud immuunanalüüsi analüüsimeetodite nappide kliiniliste andmete tõttu väheneb diagnoosimise määr.

Markerite olemasolu anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe abil saate kinnitada HBV-d või tuvastada eelneva haiguse fakti. Kuid on võimalik kindlaks teha aktiivsete viirusosakeste olemasolu veres ja nende arvu arvutamiseks uuringu ajal PCR abil - kvantitatiivne reaalajaline test hepatiit B tuvastamiseks. See meetod, võrreldes ELISA diagnostikameetoditega, lahendab diagnoosimisprobleeme ja võimaldab teil prognoosida haiguse kulgu saamise ajal viirusevastased ravimid.

Haiguste diagnoosimise alused

B-hepatiidi diagnoos põhineb kliiniliste ilmingute, ensüümi immunoloogilise analüüsi ja uurimisvahendite hindamisel. Haigus tekib pärast inkubatsiooniperioodi ägedas faasis ja sõltub infektsiooni annusest ja ravi efektiivsusest kroonilises staadiumis. Ravi peamine eesmärk on vältida kroonimist, see tähendab kõikide viiruse osakeste eemaldamist verest. Selle haiguse kliiniline liikumine on ravivaks järgneva vireemiaga.

Nakkuse kõrvaldamise fakti tuleb tõestada kvantitatiivse uurimismeetodiga.

Kuna mis tahes kvalitatiivse ensüümi immunoloogiline analüüs võimaldab HBV diagnoosida kaudselt, see tähendab, et see ei näita patogeeni esinemist kehasiseses keskkonnas, vaid iseloomustab infektsiooni immuunvastust, jälgides ravimi efektiivsust ja ravi raskuse tõestamist. Seetõttu peab hepatiit B patsiendil või tema kasuks diagnoosikriteeriumide olemasolul viima läbi polümeraasi ahelreaktsiooni viiruse osakeste arvu määramiseks veres. Diagnostiline kiirus on infektsiooni DNA koopiate puudumine.

Diagnostikameetodi kirjeldus

B-hepatiidi PCR-diagnoosimise väga tundlik meetod kuulub geneetiliselt muundatud molekulaarbioloogiliste uuringute kategooriasse. Läbi selle määrab patsiendi bioloogilises materjalis viiruse DNA kogus ja lubatud kiirus. Saadud tulemuste põhjal on kindlaks tehtud viirusosakeste arv mahuühiku kohta. Diagnostikatesti materjaliks on patsiendi venoosne veri. Uuringu tulemuseks on chüüsi seerumi võimaliku mõju tõttu tühja kõhu tarbimine.

Saadud tulemused tuleb arstile anda täiendava taktika tõlgendamiseks ja kindlaksmääramiseks. Isekodeerimine ei kujuta endast diagnostilist väärtust.

PCR-meetodil saadud viiruse osakeste arvu tulemus on suurem kui ensüümi immuunanalüüside väärtus. Kuna reaalaja režiimis olev analüüs näitab haiguse põhjustatavat toimet veres, on selle teabe sisu suurem kui teised. Kui ELISA viitab ainult antikehade olemasolule, mida täheldatakse alates 4-nädalasest inkubatsiooniperioodist ja kestab rohkem kui 8 nädala jooksul pärast viiruse eliminatsiooni verest, siis ilmneb selgelt, et polümeraasi ahelreaktsioon kinnitab haiguse aktiivset kulgu või selle ravi, iseloomustab ettenähtud ravimi dünaamikat.

Polümeraasi ahelreaktsioon koos patogeeni osakeste kvantitatiivse määramisega lahendab diagnoosiküsimusi ravi taastumise kasuks või ravi jätkamise tõttu selle tõhususe puudumise tõttu. Meetod on HBV viiruse jaoks võimalikult spetsiifiline ja eristatav vastuvõetava täpsusega.

Näitajad ja tulemuslikkuse eesmärgid

B-hepatiidi kvantitatiivne analüüs on kõige usaldusväärsem ja võimaldab kinnitada ELISA meetodil saadud andmeid. Ta määratakse siis, kui:

  1. ELISA positiivse diagnostilise tulemuse saamine;
  2. patsiendi ravi viirusliku maksakahjustuse diagnoosiga;
  3. hepatiidi kombineeritud etioloogia diagnoosimisel;
  4. vajadusel patsiendi viiruskoormus.

Kuna ensüümi immuunanalüüsi meetodit kasutatakse nakkushaiguste spetsialistide praktikas ulatuslikumalt, võib mõningaid kerget haigust põdevaid patsiente ravida, ilma et oleks vaja arvutada viiruskoormust. Kuid üldiselt peetakse PCR-i üldiselt Hepatoloogia diagnostika "kullastandardiks", kuna selle tulemuse ainulaadsuse tõttu kõrvaldatakse mitmed organisatsioonilised probleemid. Seetõttu on patsiendi suunal kvantitatiivse analüüsi jaoks järgmised eesmärgid:

  • andmete saamine patsiendi veres olevate viirusosakeste arvu kohta;
  • hepatiidi ägeda kulgemise kinnitamine ja kroonilise haiguse õigeaegne kontroll;
  • positiivsete ELISA testide varjatud viiruse kandjate pidev tuvastamine, nende vireemia jälgimine;
  • viirusevastase ravimi väljakirjutamise, selle kombinatsiooni ja lõpetamise kohta.

Kvantitatiivse PCR-i testi kõige olulisemaks eesmärgiks on HBV tuvastamine tuvastada võimalikud ravi kombinatsioonid. Kõrge viiruskoormuse korral annab analüüsi tulemus spetsialistile võimaluse jätkata ravimite kombinatsiooni. Ravi ajal on PCR-i tulemuse põhjal lihtne kindlaks määrata ettenähtud farmakoloogilise ravi efektiivsus. Immunferensioloogiliste meetodite andmete põhjal on võimatu õigeaegselt kindlaks määrata ravi fakti ja selle praeguse efektiivsuse. Seetõttu on enne retsepti alustamist ägeda hepatiidi, latentse viirusnakkuse ja kõrge vireemia ja kroonilise HBV-ravi jaoks vajalik kvantitatiivne reaalajaline analüüs.

Kvantitatiivsete PCR-testi tulemuste tõlgendamine

Koguselise PCR-testi tulemuste tõlgendamine peaks toimuma patsiendi raviarst. On vaja hinnata diagnostilist indikaatorit ja määrata terapeutilist taktikat.

Standardanalüsaator on võimeline tootma kvantitatiivset indikaatorit, mis kajastab uuritud venoosse veres sisalduva viiruse DNA koopiate arvu. Mõõtühikud - koopiad / ml, IU / ml (koopiad milliliitri kohta, rahvusvahelised ühikud milliliitri kohta). Tulemuste tõlgendamine on esitatud tabelis, kus on näidatud erinevad mõõtühikud.

Hepatiit B viiruse DNA, kvalitatiivne määramine

Tähestiku otsing

Mis on B-hepatiidi DNA, kvalitatiivne määratlus?

HBV on keeruline DNA-d sisaldav viirus ja kuulub Orthohepadnavirus perekonna Hepadnaviridae perekonda.

Hepatiit B - anthroponotic nakkuse, eelistatavalt parenteraalse nakatumise mehhanism, mis võib toimuda viirushaiguse kandjat, ägeda ja kroonilise maksahaiguse ja seda iseloomustab võimalikku arendamist ägeda maksapuudulikkuse, krooniline hepatiit, maksatsirroos ja primaarse maksavähi (hepatotsellulaarne kartsinoom).

Inimkeha nakatumine leiab aset HBV otsese sissetungimise kaudu verd (mis tahes invasiivsete sekkumiste, vere ja selle preparaatide transfusiooniga) või limaskestade ja naha kaudu sünnituse ajal seksuaalsete ja lähedaste leibkontaktide ajal. Kui maks, siis HBV tungib hepatotsüüdi, kus see hakkab kiiresti paljunema.

Nakkusprotsessi areng võib toimuda kahel viisil: kopeeritav ja integreeriv. Infektsiooni replikatsioonivorm põhjustab ägedat või kroonilist hepatiiti ja maksa tsirroosi, samal ajal kui integreeruv vorm viib "tervisliku" viiruse infektsiooni, mitteaktiivse kroonilise hepatiidi, maksatsirroosi ja primaarse hepatokartsinoomi arenemiseni.

HBV infektsiooni seroloogiline diagnoosimine ja prognoos põhineb viiruse antigeenide ja selle antikehade tuvastamisel. Kuid selgub, et B-hepatiidi viiruse populatsioonis on leitud piisavalt mutantseid tüvesid (HBeAg-negatiivsed), mida tavaliste seroloogiliste testidega ei leita. Seepärast on HBV nakkuse diagnoosimiseks PCR-meetod väga oluline.

Miks on tähtis teha B-hepatiidi viiruse DNA, kvalitatiivne määratlus?

PCR võimaldab määrata B-hepatiidi viiruse DNA katsematerjalis nii kvalitatiivselt kui ka kvantitatiivselt. Kvalitatiivne määramine B-hepatiidi viiruse materjalis (täisveri, seerum, plasma, maksa biopsia) kinnitab viiruse esinemist patsiendil ning seeläbi kindlaks haiguse patogeneesi. Kvantitatiivne määramise meetod viiruse DNA plasmas toodud oluline informatsioon haiguse intensiivsus ravi efektiivsust ja resistentsuse arenemine viirusevastaseid ravimeid. Viiruse replikatsiooni hindamiseks on kindlasti vajalik HBV-ga seonduv PCR. HBeAg puudumisel tuvastatakse 50% patsientidest seerumi viiruse DNA. HBV DNA tuvastamine veres on äärmiselt oluline ägeda HBV prognoosimiseks. Kindlaks tehtud, et HBV DNA püsivust rohkem kui 8 nädalat pärast haiguspuhangut näitab krooniliseks protsessi, samas kõrvaldamise viiruse DNA esimese 2 nädala jooksul haiguse korreleerub taastus täielikult.

B-hepatiidi viiruse DNA kvantitatiivne määramine PCR abil.

Analüütilised näitajad: B-hepatiidi viiruse (hepatiit B viirus) DNA tuvastamine polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetodil vereplasmas.

Identifitseeritud fragment on hepatiit B viiruse struktuurvalgu geeni ainulaadne DNA järjestus, mille spetsiifilisus on 98%. Detektsiooni tundlikkus on 5 ui töödeldud (DNA eraldamise) proovis vähemalt 80 viiruseosakest.

Seega on materjali HBV DNA määramine kõige olulisem analüüs, mis koos teiste laboriuuringutega võimaldab infektsiooni diagnoosida, nakkusprotsessi olemust määrata, ravi osutamise kriteeriumina ja selle tõhususe hindamist.

Milliste haiguste korral on B-hepatiidi viiruse DNA tehtud, kvalitatiivne määratlus?

Analüüsi näitajad:

Ennetavad sõeluuringud (B-hepatiidi viiruse DNA on ägeda infektsiooni varaseim marker).

Uuringud HBsAg-negatiivse infektsiooniga.

Kontaktisikute küsitlused.

Segatud etioloogia hepatiidi diagnoosimine - juhtiva viiruse tuvastamine.

Viiruse aktiivse replikatsiooni astme tuvastamine kroonilises seisundis.

Ravi kontroll.

Nõrkus, halb enesetunne, väsimus, isutus, iiveldus, kõhuõõne nõrkus, suurenenud maks ja valu lihastes ja liigeses.

Iiveldus, sügelus, põrna laienemine, veresoonte "ämblikud", mõnel juhul peopesade ja jalgade punetus.

Nr 320ÑV, B-hepatiidi viirus, DNA määramine (HBV-DNA) arv. seerumis

B-hepatiidi viiruse DNA (B-hepatiidi viirus, HBV) määramine seerumis polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetodil ja reaalajas režiimis tuvastamisega.

Avastatud fragment on B-hepatiidi viiruse spetsiifiline DNA piirkond, mille määramine on 100%. Detektsiooni tundlikkus on 20 RÜ / ml. Lineaarne vahemik on 10 ^ 2 - 1x10 ^ 8 IU / ml.

  • Positiivne kvalitatiivne test hepatiit B viiruse DNA sisalduse kohta seerumis.
  • Viiruslike koormuste kindlaksmääramine.
  • Patsientide ravi taktikate kindlaksmääramine.
  • Ravi efektiivsuse täpne hindamine.

Uurimistulemuste tõlgendamine sisaldab teavet raviarsti kohta ja ei ole diagnoos. Käesolevas jaotises esitatud teavet ei saa kasutada enesediagnostika ja enesehoolduse jaoks. Arst teeb täpset diagnoosi, kasutades nii uuringu tulemusi kui ka vajalikku teavet muudest allikatest: anamnees, teiste uuringute tulemused jne.

Mõõtühikud: hepatiit B viiruse DNA summa, väljendatud IU / ml. Konversiooniks koopiaks / ml tuleb kasutada suhkrut 1 BÜ = 4,5 B-hepatiidi viiruse koopiat.

  • "Ei leitud": ei leitud B-hepatiidi viiruse DNA-d ega selle väärtust on alla meetodi tundlikkuse piiri (20 RÜ / ml). Tulemust tõlgendatakse kui "B-hepatiidi viiruse DNA ei ole avastatud";
  • 10 ^ 8 IU / ml: tulemus on positiivne, kui hepatiit B viiruse DNA kontsentratsioon ületab 10 ^ 8 IU / ml.
Pöörake tähelepanu, et PCR-uuringute ajastamist saab kinnitavate testide läbiviimisel suurendada.

HBV, DNA kvantifitseeritud [reaalajaline PCR]

B-hepatiidi (HBV) põhjustava aine identifitseerimise uuring, mille käigus määratakse viiruse geneetilise materjali (DNA) olemasolu ja kogus (viiruse koormus) vereproovis, kasutades reaalajalise polümeraasi ahelreaktsiooni meetodit (RT-PCR).

HBV DNA-d saab tuvastada kontsentratsiooniga, mis jääb lineaarse kontsentratsioonivahemiku alumisest piirist kaugemale. Lineaarne kontsentratsioonivahemik on vahemik, kus saate täpselt arvutada patogeenide koopiate arvu. Selle analüüsi järgi on tuvastatava võimendi poolt kindlaks määratud HBV DNA kontsentratsioonide lineaarne vahemik 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 koopiat / ml proovi.

Vene sünonüümid

B-hepatiidi viirus (HBV), DNA kvantifitseerimine.

Inglise keele sünonüümid

Hepatiit B viiruse DNA, kvantitatiivne, reaalajaline PCR, vere; HBV viiruskoormus; B-hepatiidi viiruse DNA-kvant.

Uurimismeetod

Reaalajaline polümeraasi ahelreaktsioon.

Mõõtühikud

Koopia / ml (koopia milliliitri kohta).

Millist biomaterjali saab uurimistööks kasutada?

Kuidas õppimiseks valmistuda?

Ärge suitsetage 30 minutit enne vere annetamist.

Uuringu üldine teave

Viiruse B-hepatiit (HBV) on DNA-sisaldava B-hepatiidi viiruse (HBV) põhjustatud maksa nakkushaigus. Akuutse hepatiidi ja kroonilise viirusnakkuse kõigi põhjuste hulgas peetakse B-hepatiidi viirust maailmas kõige levinumateks. Nakatunud tegelike arv ei ole teada, sest paljudel inimestel on nakkus ilma konkreetsete sümptomitega ja nad ei soovi arstiabi. Sageli avastatakse viirus ennetavate laborikatsete käigus. Lähtuvalt hinnangutest on B-hepatiidi viirusega nakatatud maailmas ligikaudu 350 miljonit inimest ja igal aastal surma 620 000 inimest. Venemaal on HBV kandjate arv üle 5 miljoni inimese.

Nakkuse allikas on HBV-ga patsient või asümptomaatiline viiruse kandja. HBV edastatakse vere ja teiste kehavedelikega. Võite nakatuda kaitsmata sugu, mittesteriilsete süstalde, vereülekannete ja doonori elundite siirdamise kaudu, võib ema sünnitada või sünnitada (või nipelte pragude tõttu). Riskirühma kuuluvad: tervishoiutöötajad, kellel võib olla kokkupuude patsiendi verd, hemodialüüsi saavad patsiendid, süstivad uimastitarbijad, seksuaalselt kuritarvitavad inimesed, HBV-emadest sündinud lapsed.

Haiguse inkubatsiooniperiood on 4 nädalat kuni 6 kuud. B- võivad avalduda maheda püsivaid mitu nädalat ja vormis pikaajaline krooniline nakkus. Peamiseks hepatiidinähtude: kollasuse skin, palavik, iiveldus, väsimus, laboratoorsetes testides - maksatalitlushäirega ja antigeenid HBV Äge haigus võib kiiresti lõppeda surmaga, läbida viiakse krooniline nakkus või lõpevad täieliku paranemise. Usutakse, et pärast HBV-ga kannatamist tekib tugev immuunsus. Krooniline viirushepatiit B on seotud tsirroosi ja maksavähi tekkimisega.

Olemasoleva või viiruse viirusliku hepatiidi B avastamiseks on olemas mitmeid spetsiifilisi katseid. Nakkuse esinemise kinnitamiseks ja haiguse perioodi selgitamiseks kasutatakse viiruse antigeenide määratlust, nende antikehasid ja viiruse DNA-d.

Polümeraasi ahelreaktsioon on väga tundlik ja spetsiifiline. PCR-i saab kasutada kas kvalitatiivselt või kvantitatiivselt viiruse DNA määramiseks. Kvalitatiivse meetodi tõttu kinnitatakse B-hepatiidi viiruse olemasolu organismis ja selle aktiivset paljunemist. Viiruse koormuse kvantitatiivne määramine võimaldab hinnata haiguse arengu intensiivsust, ravi efektiivsust või viirusevastaste ravimite suhtes resistentsuse tekkimist.

Viiruse kontsentratsioon veres ja ägeda viirusliku hepatiidi B tulemus on seos. Madala vireemia korral on infektsiooni kroonilise tõenäosuse tõenäosus nullilähedane ja nakatunud isik ei ole teistele ohtlik. Kõrge viiruskoormusega (5 koopiat / ml) tekib sageli krooniline sündroom ja patsient on potentsiaalne nakkusallikas. Tõenäoline seos viiruse DNA sisalduse vahel seerumis, HBeAg esinemine, ALAT tõus ja tsirroosi ja hepatotsellulaarse kartsinoomi areng (maksavähk).

Viirusevastase ravi efektiivsust hinnatakse viiruse DNA sisalduse vähendamisega veres. 3-6 kuud pärast ravi alustamist peaks piisava ravivastusega viiruskoormus vähenema 1-2 korda. Viiruse arvu vähenemise puudumine või selle suurenemine vajaliku ravi taustal vajab ravi läbivaatamist ja muutmist.

B-hepatiidi viiruse DNA kvantitatiivne määramine koos haiguse ja biokeemiliste näitajate kliinilise pildi, nakkuse markerite ja maksa biopsia tulemusega võimaldab ennustada haigust ja hinnata vajadust viirusevastase ravi järele.

Mis on teadustöö?

  • Et prognoosida viirusliku hepatiidi B käiku.
  • Kinnitatud viirusliku hepatiidi B krooniline vorm.
  • Viiruse hepatiidi B kandjate kindlakstegemine ja viiruse replikatsiooni aktiivsuse jälgimine.
  • Hepatiidi peidetud ja mutantsete tüvede tuvastamine
  • Hinnata B-hepatiidi viirusevastase ravi efektiivsust ja otsustada edasise ravi taktika üle.

Millal on plaanitud uuring?

  • B-hepatiidi viiruse DNA kvalitatiivne avastamine.
  • Ägeda ja kroonilise viirusliku hepatiit B korral
  • Hepatiidi segatuna.
  • Enne ja viirusevastase ravi ajal.

Mida tulemused tähendavad?

  • "Ei leitud" - B-hepatiidi viiruse DNA-d ei tuvastata või selle väärtus jääb alla meetodi tundlikkuse piiri (200 koopiat / ml = 120 RÜ / ml).
  • 10 ^ 5 koopiat / ml (6 x 10 ^ 4 RÜ / ml) - suur viiruskoormus, aktiivne nakkusprotsess (vajalik on viirusevastane ravi).
  • > 1,0 * 10 ^ 8 koopiat / ml (> 6 x 10 ^ 7 RÜ / ml) - B-hepatiidi viiruse DNA tuvastati kontsentratsioonil, mis ületas lineaarset kontsentratsioonivahemikku.

Detekteeriva võimendiga määratud B-hepatiidi viiruse DNA-kontsentratsioonide lineaarne vahemik on 7,5 * 10 ^ 2-1,0 * 10 ^ 8 koopiat / ml (4,5 * 10 ^ 2-6 * 10 ^ 7 IU / ml).

Mis võib tulemust mõjutada?

Olulised märkused

  • B-hepatiidi viiruse DNA kvantitatiivne määramine on kohustuslik uuring enne viirusevastase ravi määramist. Ravi käigus tuleb analüüsi korrata 3-6 kuu järel.
  • Viiruse hepatiit B on tihti kombineeritud viirusliku hepatiidiga D.

Samuti soovitatav

Kes teeb uuringu?

Kirjandus

  1. Zh.I. Vozianova Nakkushaigused ja parasiithaigused: 3 tonnides - K.: Tervis, 2000 - T.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling ja teised. B-hepatiit B-hepatiidi viirus DNA-hepatiit B. hepatiit J Clin mikrobiol. 2003 oktoober; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrisoni sisehaiguste põhimõtted. 16. väljaanne NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Hepatiit B juhtimine. NIH konsensusarengu konverents. Programm ja lühitutvustus. 20.-22. Oktoober 2008.

Hepatiit B PCR

PCR-diagnostika võimaldab mitte ainult määrata B-hepatiidi viiruse olemasolu veres ja selle etioloogias, vaid ka hinnata selle aktiivsust. Viiruslike koormuste tuvastamine on eriti oluline efektiivse ravi valimisel, kui see on liiga kõrge, siis taaskasutamise tõenäosus väheneb. Mis on polümeraasi ahelreaktsiooni meetodi olemus?

PCR-i diagnostika põhiolemus

In vivo perioodi lõpus võib tuvastada DNA viiruse veres hepatiidi PCR meetodil, sel ajal võib HBsAg tuvastada transaminaaside taseme tõusu taustal, pärast mida ilmneb HBeAg.

  • Kvalitatiivse definitsiooni abil saate diagnoosi täpselt kindlaks määrata, hepatiiti esineb või puudub. Tavaliselt ei tohiks veres olla DNA-d.
  • Kvantitatiivne meetod võimaldab määrata haiguse arengu intensiivsust ja viiruse paljunemist.

Analüüs on väga tundlik ja usaldusväärne. Bioloogilise materjalina võta venoosne veri. Tänu kaasaegsele tehnoloogiale võib PCR tuvastada viiruse kontsentratsioonis 5 × 10 3 -10 4 koopiat / ml veres. Analüüsi tulemuste kohaselt on normatiivne teadmine võimalik viraalset koormust hinnata ja ennustada ravi.

See on tähtis! See viiruse DNA aitab kaasa tsirroosi ja muude krooniliste maksahaiguste tekkele.

DNA tuvastamine PCR-ga on vajalik järgmistel juhtudel:

  1. Kahtlused lõpliku analüüsi koostamisel pärast katset.
  2. Haiguse ägeda faasi kindlaksmääramine.
  3. Hepatiidi varjatud vormide tuvastamine.
  4. Tõhususe hindamine pärast viirusevastast ravi.

Kuidas PCR-i diagnostikast saadud tulemusi dešifreerida?

PCR kvantitatiivne

Kvantitatiivse hindamise abil saate määrata ainult viiruse olemasolu, aga ka viiruse koormus, kui PCR näitab positiivset tulemust.

Selle teabe väljaselgitamiseks on vaja kvantitatiivset meetodit:

  1. Haiguse arengu intensiivsus.
  2. Ravi efektiivsus.
  3. Viirusvastaste ravimite suhtes resistentsuse väljaarendamine.

Kvantifitseerimine on kroonilise hepatiidi diagnoosimisel väga oluline. Sellisel juhul ei jää kõik näitajad tavapärasesse vahemikku. Transaminaaside tase tõuseb, viiruse aktiivsuse indeks on suurem kui 4 ja viiruse DNA kontsentratsioon on suurem kui 105 koopiat DNA / ml kohta. Kui viiruse kontsentratsioon on madalam ja transaminaaside tase on normaalne, siis võime rääkida passiivsest kandjast.

Enne viirusevastase ravi määramist on hädavajalik määrata PCR-de diagnostika, nimelt kvantitatiivne uuring, viiruskoormus.

Kas analüüs tehakse iga 3 kuu järel ja kui viiruse koormus suureneb 10 korda, siis võime rääkida viiruse resistentsusest ravile.

  • Kvantitatiivne analüüs annab väga olulist teavet, sest saate määrata, kui palju patogeeni DNA on veres. Mida suurem on selle kogus, seda suurem on viiruskoormus ja seda suurem on patsiendi seisund.
  • Viiruslikku koormust vähendades pärast ravi alustamist saab hinnata selle efektiivsust.
  • Mõningatel juhtudel on hepatiidi PCR näide täiendavateks uuringuteks, nagu näiteks maksa biopsia. Kõrgendatud ALAT taseme korral viiakse läbi PCR. Testide dekrüptimine on järgmine: kui viiruse koormus on üle 10 5 koopia DNA / ml ja ALAT tase ületab normi, kuid mitte rohkem kui 2 korda poolaasta jooksul, siis vajab selline patsient biopsia. Tugeva põletiku või fibroosiga on näidustatud viirusevastane ravi. Kui ALAT tase ületab normi rohkem kui 2 korda suure viiruse koormusega, siis tuleb ravi kohe ilma täiendava diagnostikavaldita ette kirjutada.

Ainult head spetsialistid suudavad kvantitatiivse PCRi tulemusi õigesti dešifreerida.

PCR-kvaliteet

Kvalitatiivne analüüs võimaldab määrata B-hepatiidi olemasolu veres. Tavaliselt ei tohiks see olla. Selle meetodiga saate diagnoosi täpselt kindlaks teha.

Kvaliteetne PCR-analüüs annab 100% täpse tulemuse.

Ükski teine ​​meetod ei paku selliseid usaldusväärseid andmeid. Enam kui pooled juhtudest, kui diagnoos on möödunud, tuvastatakse viiruse DNA tuvastamisel antigeeni puudumisel. On väga oluline diagnoosida haiguse alguses.

On tõestatud, et kui B-hepatiidi viiruse DNA aktiivselt paljuneb inimese kehas kahe kuu jooksul, muutub see haigus krooniliseks. Kui me hakkame viiruse vastu võitlema juba esimeste nädala jooksul pärast nakatumist, on täieliku taastumise võimalused väga suured.

Kuidas on uuringu tulemuste dekodeerimine kvalitatiivse meetodi abil?

Dekodeerimise analüüs on väga lihtne:

  • Tavaliselt peaks tulemus olema negatiivne, see tähendab, et viiruse DNA ei tuvastatud.
  • Positiivne tulemus viitab hepatiidi esinemisele.

Analüüs aitab tuvastada viirust, määrata selle genotüüp ja alustada õigeaegset ravi. Sageli esineb DNA juuresolekul koos kvalitatiivse hindamisega ka kvantitatiivset analüüsi.

Kuidas uuringut ette valmistada?

Hepatiidi analüüsimisel PCR-diagnostika abil võetakse vere verega. Seda on kõige parem uurida hommikul, kuna veri tuleb alati annetada tühja kõhuga (pärast viimast toidukorra peab vähemalt 8 tundi läbima).

Selleks, et analüüs oleks võimalikult usaldusväärne, peab patsient olema teadlik mõnest tegurist, mis võib lõpptulemust mõjutada:

  • Enne veenist veri annetamist peate 20 minutiks puhkama.
  • Lisaks antakse analüüsi tühja kõhuga, nii et veel 12 tundi te ei saa alkoholi juua, suitsetada, sportida ja süüa rasvaseid toite.
  • Mõned ravimid, mida patsient peab võtma, võivad mõjutada lõpptulemust. Laboritehnik peaks olema teadlik uimastiravi juhtumitest.
  • Kui veri tuleb alla 5-aastasele lapsele annetada, siis on sel juhul vaja seda jooma iga 10 minuti järel, pool tundi enne diagnoosi klaasi keedetud vees.

On väga oluline läbi viia PCR kliinikus, mis on hästi toiminud. Tõepoolest, hoolimata asjaolust, et PCR-iga määratakse viiruse olemasolu täpsusega kuni 100%, võib see näitaja langeda kuni 95% -ni, kui arvestada inimteguriga.

Kvalifitseerimata tehnikud või halva maine võib põhjustada vale tulemusi.

B-hepatiidi viiruse (ELISA ja PCR) uuringud

B-hepatiidi viiruse antigeen (HBsAg)

B-hepatiidi pinnaantigeen seerumis tavaliselt puudub.
Hepatiit B pinnaantigeeni (HBsAg) avastamine seerumis kinnitab B-hepatiidi viiruse ägedat või kroonilist nakkust.

Ägeda haiguse korral tuvastatakse HBsAg seerumis viimase inkuaarse perioodi 1-2 nädala jooksul ja kliinilise perioodi esimesed 2-3 nädalat. HBsAg tsirkuleerumine veres võib olla piiratud mõne päevaga, nii et peaksite püüdma patsiente varakult esialgselt uurida. ELISA meetod võimaldab avastada HBsAg rohkem kui 90% patsientidest. Peaaegu 5% -l patsientidest ei leia kõige tundlikumad uurimismeetodid HBsAg-d, sellistel juhtudel kinnitab viirusliku hepatiidi B etioloogiat HBcAg-vastase JgM või PCR-i olemasolu.

Seerumi HBsAg kontsentratsioon B-hepatiidi kõigi vormide raskusastmetel haiguse kõrgusel on märkimisväärne kõikumiste hulk, kuid on kindel korrektsus: ägeda perioodi jooksul on seerumi HBsAg kontsentratsiooni ja haiguse tõsidus vahel pöördeline seos.

HBsAg kõrge kontsentratsioon on levinud kergete ja mõõdukate haigusseisundite korral. Raskete ja pahaloomuliste vormide korral on HBsAg kontsentratsioon veres sageli madal ja 20% -l raskekujuliste vormide ja 30% -l patsientidest, kellel on pahaloomuline antigeen veres, ei pruugi üldse tuvastada. HBsAg-vastase antikehaga patsientidel peetakse selle tausta välimust ebasoodsaks diagnostiliseks märgiks; see määratakse kindlaks hepatiit B pahaloomulistes vormides.

B-hepatiidi ägedal käigus väheneb HBsAg kontsentratsioon veres, kuni selle antigeeni täielik kadumine muutub. Enamikus patsientidest kaob HBsAg 3 kuu jooksul pärast ägeda infektsiooni tekkimist.

Akuutse perioodi 3. nädala lõpuks HBsAg kontsentratsiooni vähenemine üle 50% viitab tavaliselt infektsiooni protsessi lõpuleviimisele. Tavaliselt patsientidel, kelle haigus on kõrgem HBsAg kontsentratsioonist, tuvastatakse see veres mitu kuud.
HBsAg madala kontsentratsiooniga patsientidel kaob palju varem (mõnikord mitu päeva pärast haiguse algust). Üldiselt on HBsAg detekteerimise aeg vahemikus mitu päeva kuni 4-5 kuud. HBsAg maksimaalne ägeda hepatiidi B käigus avastamise aeg ei ületa 6 kuud haiguse alguse hetkest.

HBsAg-i võib reeglina leida tervetel inimestel profülaktilistes või juhuslikes uuringutes. Sellistel juhtudel uuritakse muid viirusliku hepatiidi B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG ja anti-HBeAg-vastaseid markereid ja uuritakse maksafunktsiooni.

Kui negatiivseid tulemusi on vaja teha, on korduvad HBsAg-uuringud.
Kui korduvad üle 3-kuulised vereanalüüsid avastavad HBsAg-i, liigitatakse see patsient viirusliku hepatiit B-ga krooniliseks patsiendiks.
HBsAg esinemine on üsna tavaline. Maailmas on üle 300 miljoni vedaja ja meie riigis on umbes 10 miljonit vedaja.
HBsAg-i vereringe lõpetamine järgneva serokonversiooniga (anti-HB-de teke) näitab alati kehas olevat taastumist.

HBsAg-i vereanalüüsi kasutatakse järgmistel eesmärkidel:

  • ägeda hepatiidi B diagnoosimiseks:
    • inkubatsiooniperiood;
    • äge haigus;
    • varane taastumine;
  • kroonilise viirushepatiidi B diagnoosimiseks;
  • haiguste puhul:
    • püsiv krooniline hepatiit;
    • maksa tsirroos;
  • riskigruppide patsientide skriinimiseks ja tuvastamiseks:

  • sagedaste hemotransfusioonidega patsiendid;
  • kroonilise neerupuudulikkusega patsiendid;
  • mitme hemodialüüsi teel;
  • immuunpuudulikkuse seisundiga patsiendid, sealhulgas AIDS.
  • Uurimistulemuste hindamine

    Uuringu tulemused on väljendatud kvalitatiivselt - positiivsed või negatiivsed. Negatiivne tulemus viitab seerumi HBsAg puudumisele. Positiivne tulemus - HBsAg identifitseerimine näitab ägeda viirusliku hepatiidi B ja ka kroonilise viirusliku hepatiit B inkubatsiooni või ägedat perioodi.

    B-hepatiidi viiruse JgG (anti-HBcAg JgG) tuumase antigeeni antikehad

    Tavaliselt puudub seerumi anti-HBcAg sisaldus seerumis.
    Anti-HBcAg JgG-ga patsientidel ilmnevad viirusliku hepatiit B ägedal perioodil ja nad püsivad kogu elu vältel. Anti-HBcAg JgG on ülekantud HBV juhtiv marker.

    Anti-HBcAg JgG vereanalüüsid kasutatakse diagnoosimiseks:

  • krooniline viirushepatiit B HBs antigeeni manulusel seerumis;
  • viiruslik hepatiit B
  • Uurimistulemuste hindamine

    Uuringu tulemus väljendatakse kvalitatiivselt - positiivne või negatiivne. Negatiivne tulemus viitab seerumi anti-HBcAg JgG puudumisele. Positiivne tulemus - anti-HBcAg JgG tuvastamine näitab ägeda infektsiooni, paranemise või eelnevalt viiruse viiruse hepatiidi B

    Hepatiit B viiruse "e" antigeen (HBeAg)

    Tavaliselt puudub HBeAg seerumis.
    Enamiku ägeda viirusliku hepatiit B patsientide seerumis võib tuvastada HBeAg-i. Tavaliselt kaob see HBs-antigeeni sisaldavas veres. HBeAg kõrge tase haiguse esimestel nädalatel või selle avastamine enam kui 8 nädala jooksul põhjustab kroonilise infektsiooni kahtlust.

    Seda antigeeni tuvastavad sageli viirusliku etioloogia krooniline aktiivne hepatiit. Eriti huvipakkuv HBeAg määratlus on asjaolu, et selle tuvastamine iseloomustab nakkusprotsessi aktiivset replikatsioonifaasi. On tõendatud, et kõrge HBeAg kontsentratsioon vastab kõrgele DNA polümeraasi aktiivsusele ja iseloomustab viiruse aktiivset replikatsiooni.

    HBeAg esinemine veres näitab selle kõrge nakkavust, st aktiivse B-hepatiidi nakkuse esinemine organismis, mida uuritakse, ja see tuvastatakse ainult juhul, kui HB-de antigeen on veres. Kroonilise aktiivse hepatiidiga patsientidel kasutatakse viirusevastaseid ravimeid ainult siis, kui HBeAg tuvastatakse veres. HBeAg - antigeen - ägeda faasi marker ja hepatiit B viiruse replikatsioon.

    HBe antigeeni olemasolu vereproovi kasutatakse diagnoosimiseks:

  • viirusliku hepatiidi B inkubatsiooniperiood;
  • viirusliku hepatiidi B prodromaalne periood;
  • viirusliku hepatiidi B ägeda perioodi;
  • krooniline püsiv viiruslik hepatiit B
  • Uurimistulemuste hindamine

    Uuringu tulemus väljendatakse kvalitatiivselt - positiivne või negatiivne. Negatiivne tulemus viitab seerumi HBeAg puudumisele. Positiivne tulemus - HBeAg tuvastamine viitab ägeda viirusliku hepatiidi B inkubatsioonile või akuutsele perioodile või viiruse jätkuvale replikatsioonile ja patsiendi nakkavusele.

    B-hepatiidi viiruse (anti-HBeAg) antigeeni "e" antikehad

    HBeAg-vastane antikeha seerumis tavaliselt puudub. HBeAg-vastaste antikehade ilming näitab tavaliselt intensiivset B-hepatiidi viiruse eemaldamist ja patsiendi kerget infektsiooni.

    Need antikehad ilmnevad ägeda perioodi jooksul ja püsivad kuni 5 aastat pärast infektsiooni. Kroonilise püsiva hepatiidi korral leitakse HBsAg-iga patsiendi veres HBeAg-vastane antikeha. Serokonversioon, st HBeAg-i üleminek HBeAg-le kroonilise aktiivse hepatiidi vastu on enamasti prognostiliselt soodne, kuid sama serokonversioon ei paranda raskeid tsirroosseid maksa transformatsioone.

    HBeAg-vastase antikeha olemasolu vereanalüüse kasutatakse järgmistel juhtudel viirushepatiidi B diagnoosimisel:

  • haiguse algfaasi kindlakstegemine;
  • äge infektsioon;
  • varane taastumine;
  • taastusravi;
  • hilise etapi taastumine.
  • hiljuti ülekantud viirushepatiidi B diagnoos;
  • kroonilise püsiva viirusliku hepatiidi B diagnoos
  • Uurimistulemuste hindamine

    Uuringu tulemus väljendatakse kvalitatiivselt - positiivne või negatiivne. Negatiivne tulemus viitab HBeAg antikehade puudumisele seerumis. Positiivne tulemus on HBeAg antikehade tuvastamine, mis võib viidata ägeda viirusliku hepatiidi B esialgsele staadiumile, ägeda nakkusperioodi vältel, rekonstruktsiooni varase seisundi taastumisel, paranemisel, hiljuti üle viiruse hepatiit B või püsiv viiruslik hepatiit B.

    Kroonilise hepatiit B esinemise kriteeriumid on:

  • HBV DNA tuvastamine või perioodiline tuvastamine veres;
  • pidev või perioodiline ALAT / AST aktiivsuse suurenemine veres;
  • maksa biopsia histoloogilises uuringus kroonilise hepatiidi morfoloogilised tunnused.
  • B-hepatiidi viiruse tuvastamine PCR-ga (kvalitatiivselt)

    B-hepatiidi viirus veres ei ole tavaliselt olemas.
    B-hepatiidi viiruse kvalitatiivne määramine PCR-meetodil veres võimaldab tuvastada viiruse olemasolu patsiendi kehas ja seega seeläbi haiguse etioloogiat.

    See uuring annab kasulikku teavet ägeda viirusliku hepatiidi B diagnoosimiseks haiguse inkubatsioonil ja varases arengujärgus, kui patsiendi peamised seroloogilised markerid veres puuduvad. HBeAg puudumisel tuvastatakse 50% patsientidest seerumi viiruse DNA. PCR-meetodi analüütiline tundlikkus on vähemalt 5 μl viiruse osakestest, viimane DNA avastamise proov, spetsiifilisus 98%.

    See meetod on oluline kroonilise HBV diagnoosimiseks ja jälgimiseks. B-hepatiidi viiruse krooniline kandja on põhjustanud ligikaudu 5-10% tsirroosi ja teiste krooniliste maksahaiguste juhtumitest. Selliste haiguste aktiivsuse markerid on HBeAg ja B-hepatiidi viiruse DNA sisaldus veres.

    PCR-meetod võimaldab määrata B-hepatiidi viiruse DNA nii kvalitatiivselt kui kvantitatiivselt veres. Mõlemal juhul on määratletud fragmendiks hepatiit B viiruse struktuurvalgu geeni ainulaadne DNA järjestus.

    B-hepatiidi viiruse DNA tuvastamine biomaterjalides, kasutades PCRi, on vajalik:

  • küsitavate seroloogiliste testide tulemuste lahendamine;
  • haiguse ägeda faasi avastamine võrreldes eelmise nakatumise või kokkupuutega;
  • kontrollida viirusevastase ravi efektiivsust.
  • B-hepatiidi viiruse DNA kadumine verest on tähtis ravi efektiivsus

    B-hepatiidi viiruse tuvastamine PCR abil (kvantitatiivne)

    See meetod annab olulist teavet haiguse arengu intensiivsuse, ravi tõhususe ja aktiivsete ravimite resistentsuse arengu kohta.
    Seerumis PCR-ga viirusliku hepatiidi diagnoosimiseks kasutatakse katsesüsteeme, mille tundlikkus proovis on 50-100 koopiat, mis võimaldab viirust tuvastada kontsentratsioonil 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 koopiat / ml. Viiruse replikatsiooni hindamiseks on kindlasti vajalik viirusliku hepatiit B PCR.

    HBeAg puudumisel tuvastatakse 50% patsientidest seerumi viiruse DNA. Seerumi, lümfotsüütide ja hepatobioptaatide kasutamine võib olla B-hepatiidi viiruse DNA tuvastamiseks vajalik materjal.

    • Vireemia taseme hindamine on järgmine:
    • vähem kui 2,10 ^ 5 koopiat / ml (vähem kui 2,10 ^ 5 IU / ml) - madal vireemia;
    • alates 2.10 ^ 5 koopiat / ml (2.10 ^ 5 RÜ / ml) kuni 2.10 ^ 6 koopiat / ml (8.10 ^ 5 RÜ / ml) - keskmine vireemia;
    • rohkem kui 2,10 ^ 6 koopiat / ml - kõrge vireemia.

    On olemas seos ägeda viirushepatiidi B ja HBV DNA kontsentratsiooni vahel patsiendi veres. Vireemia madala taseme korral on infektsiooni kroniseerimise protsess peaaegu null, keskmine - protsess on kroonineeritud 25-30% patsientidest ja kõrge vireemia korral muutub äge viirushepatiit B enamasti krooniliseks.

    Kroonilise HBV interferoon-alfa raviks tuleb arvestada aktiivse viiruse replikatsiooni markerite esinemisega (HBV HBV, HBeAg ja HBV DNA tuvastamine seerumis viimase 6 kuu jooksul).

    Ravi efektiivsuse hindamise kriteeriumid on HBeAg ja HBV DNA kadumine veres, millega tavaliselt kaasneb transaminaaside taseme normaliseerimine ja haiguse pikaajaline taandareng, 80% -l patsientidest kaob vererõhk viienda ravikuu jooksul verest. Vireemia keskmise taseme vähendamine kolmanda päeva jooksul alates ravi algusest 85% või rohkem võrreldes algväärtusega on kiire ja õiglaselt täpne kriteerium ravi efektiivsuse ennustamiseks.

    Hepatiit PCR-is

    PCR-diagnostika võimaldab mitte ainult määrata B-hepatiidi viiruse olemasolu veres ja selle etioloogias, vaid ka hinnata selle aktiivsust. Viiruslike koormuste tuvastamine on eriti oluline efektiivse ravi valimisel, kui see on liiga kõrge, siis taaskasutamise tõenäosus väheneb. Mis on polümeraasi ahelreaktsiooni meetodi olemus?

    PCR-i diagnostika põhiolemus

    Hepatiidi korral tehakse diagnoosi tagamiseks PCR-i. Selle meetodi abil saate tuvastada viiruse DNA, samuti määrata selle kogus veres.

    In vivo perioodi lõpus võib tuvastada DNA viiruse veres hepatiidi PCR meetodil, sel ajal võib HBsAg tuvastada transaminaaside taseme tõusu taustal, pärast mida ilmneb HBeAg.

    Kvalitatiivse definitsiooni abil saate diagnoosi täpselt kindlaks määrata, hepatiiti esineb või puudub. Tavaliselt ei tohiks veres olla DNA-d. Kvantitatiivne meetod võimaldab määrata haiguse arengu intensiivsust ja viiruse paljunemist.

    Analüüs on väga tundlik ja usaldusväärne. Bioloogilise materjalina võta venoosne veri. Tänu kaasaegsele tehnoloogiale võib PCR tuvastada viiruse kontsentratsioonis 5 × 103-104 koopiat / ml veres. Analüüsi tulemuste kohaselt on normatiivne teadmine võimalik viraalset koormust hinnata ja ennustada ravi.

    See on tähtis! See viiruse DNA aitab kaasa tsirroosi ja muude krooniliste maksahaiguste tekkele.

    DNA tuvastamine PCR-ga on vajalik järgmistel juhtudel:

    Kahtlused lõpliku analüüsi koostamisel pärast katset. Haiguse ägeda faasi kindlaksmääramine. Hepatiidi varjatud vormide tuvastamine. Tõhususe hindamine pärast viirusevastast ravi.

    Kuidas PCR-i diagnostikast saadud tulemusi dešifreerida?

    PCR kvantitatiivne

    Kvantitatiivse hindamise abil saate määrata ainult viiruse olemasolu, aga ka viiruse koormus, kui PCR näitab positiivset tulemust.

    Selle teabe väljaselgitamiseks on vaja kvantitatiivset meetodit:

    Haiguse arengu intensiivsus. Ravi efektiivsus. Viirusvastaste ravimite suhtes resistentsuse väljaarendamine.

    Kvantifitseerimine on kroonilise hepatiidi diagnoosimisel väga oluline. Sellisel juhul ei jää kõik näitajad tavapärasesse vahemikku. Transaminaaside tase tõuseb, viiruse aktiivsuse indeks on suurem kui 4 ja viiruse DNA kontsentratsioon on suurem kui 105 koopiat DNA / ml kohta. Kui viiruse kontsentratsioon on madalam ja transaminaaside tase on normaalne, siis võime rääkida passiivsest kandjast.

    Enne viirusevastase ravi määramist on hädavajalik määrata PCR-de diagnostika, nimelt kvantitatiivne uuring, viiruskoormus.

    Kas analüüs tehakse iga 3 kuu järel ja kui viiruse koormus suureneb 10 korda, siis võime rääkida viiruse resistentsusest ravile.

    Kvantitatiivne analüüs annab väga olulist teavet, sest saate määrata, kui palju patogeeni DNA on veres. Mida suurem on selle kogus, seda suurem on viiruskoormus ja seda suurem on patsiendi seisund. Viiruslikku koormust vähendades pärast ravi alustamist saab hinnata selle efektiivsust. Mõningatel juhtudel on hepatiidi PCR näide täiendavateks uuringuteks, nagu näiteks maksa biopsia. Kõrgendatud ALAT taseme korral viiakse läbi PCR. Testide dekrüptimine on järgmine: kui viiruse koormus on rohkem kui 105 koopiat DNA / ml kohta ja ALAT tase ületab normi, kuid mitte rohkem kui 2 korda üle poole aasta, siis vajab selline patsient biopsia. Tugeva põletiku või fibroosiga on näidustatud viirusevastane ravi. Kui ALAT tase ületab normi rohkem kui 2 korda suure viiruse koormusega, siis tuleb ravi kohe ilma täiendava diagnostikavaldita ette kirjutada.

    Ainult head spetsialistid suudavad kvantitatiivse PCRi tulemusi õigesti dešifreerida.

    PCR-kvaliteet

    Kvalitatiivne analüüs võimaldab määrata B-hepatiidi olemasolu veres. Tavaliselt ei tohiks see olla. Selle meetodiga saate diagnoosi täpselt kindlaks teha.

    Kvaliteetne PCR-analüüs annab 100% täpse tulemuse.

    Ükski teine ​​meetod ei paku selliseid usaldusväärseid andmeid. Enam kui pooled juhtudest, kui diagnoos on möödunud, tuvastatakse viiruse DNA tuvastamisel antigeeni puudumisel. On väga oluline diagnoosida haiguse alguses.

    On tõestatud, et kui B-hepatiidi viiruse DNA aktiivselt paljuneb inimese kehas kahe kuu jooksul, muutub see haigus krooniliseks. Kui me hakkame viiruse vastu võitlema juba esimeste nädala jooksul pärast nakatumist, on täieliku taastumise võimalused väga suured.

    Kuidas on uuringu tulemuste dekodeerimine kvalitatiivse meetodi abil?

    Dekodeerimise analüüs on väga lihtne:

    Tavaliselt peaks tulemus olema negatiivne, see tähendab, et viiruse DNA ei tuvastatud. Positiivne tulemus viitab hepatiidi esinemisele.

    Analüüs aitab tuvastada viirust, määrata selle genotüüp ja alustada õigeaegset ravi. Sageli esineb DNA juuresolekul koos kvalitatiivse hindamisega ka kvantitatiivset analüüsi.

    Kuidas uuringut ette valmistada?

    Hepatiidi analüüsimisel PCR-diagnostika abil võetakse vere verega. Seda on kõige parem uurida hommikul, kuna veri tuleb alati annetada tühja kõhuga (pärast viimast toidukorra peab vähemalt 8 tundi läbima).

    Selleks, et analüüs oleks võimalikult usaldusväärne, peab patsient olema teadlik mõnest tegurist, mis võib lõpptulemust mõjutada:

    Enne veenist veri annetamist peate 20 minutiks puhkama. Lisaks antakse analüüsi tühja kõhuga, nii et veel 12 tundi te ei saa alkoholi juua, suitsetada, sportida ja süüa rasvaseid toite. Mõned ravimid, mida patsient peab võtma, võivad mõjutada lõpptulemust. Laboritehnik peaks olema teadlik uimastiravi juhtumitest. Kui veri tuleb alla 5-aastasele lapsele annetada, siis on sel juhul vaja seda jooma iga 10 minuti järel, pool tundi enne diagnoosi klaasi keedetud vees.

    On väga oluline läbi viia PCR kliinikus, mis on hästi toiminud. Tõepoolest, hoolimata asjaolust, et PCR-iga määratakse viiruse olemasolu täpsusega kuni 100%, võib see näitaja langeda kuni 95% -ni, kui arvestada inimteguriga.

    Kvalifitseerimata tehnikud või halva maine võib põhjustada vale tulemusi.

    B-hepatiit on viirusinfektsioon, mis mõjutab maksa. Täna on umbes 300 miljonit inimest kogu maailmas hepatiidi B kandjatena.

    Mõnes viirus liigub tsirroosiks või hepatotsellulaarseks kartsinoomiks (vähi esimene etapp). Uued viirusevastased haiguste uurimisstrateegiad on kaks eesmärki:

    Maksa raviks ja puhastamiseks kasutavad meie lugejad edukalt

    Elena Malysheva meetod

    . Olles hoolikalt uurinud seda meetodit, otsustasime selle tähelepanu juhtida.

    määrata, kui tundlik on keha viiruskoormus; määrake viiruse resistentsuse ravimite ja muude meditsiiniliste sekkumiste suhtes.

    Hepatiidi uuringute tunnused

    Seroloogiliste uuringute eesmärk on identifitseerida seerumis antigeene ja antikehi, kuid see meetod ei ole usaldusväärne. Seetõttu on teadlased välja töötanud polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetodi. See võimaldab mitte ainult kvalitatiivselt määrata viiruse olemasolu (kas või mitte), vaid ka kvantitatiivselt (millises koguses antikehasid esineb seerumis).

    Enne vere kogumist peaks arst välja selgitama:

    kas patsient võttis narkootikume intravenoosselt; kas isik oli doonor või retsipient (kellele vere infundeeriti); kas patsiendil tehti operatsiooni; kas patsient on nahka vigastanud; kas inimene on veendunud oma seksuaalpartnerite tervises; kas oli mingisugune kontakti hepatiit B viirusega?

    Ägeda hepatiidi korral võib positiivse tulemuse tuvastada 1-2 nädalat pärast inkubeerimist PCR-ga.

    Viiruse hepatiit B (HBV) vereanalüüsid võetakse siis, kui:

    Äge hepatiidi B diagnoos: inkubatsiooniperiood (1-2 nädalat); intensiivne haigusperiood (3-4 nädalat); Varajase taastumise periood. CVH (krooniline viirushepatiit) diagnoosimine. Kui segatakse hepatiidi vastu.

    Riskiga inimestel võetakse regulaarselt ka analüüse, mis hõlmavad järgmist:

    inimesed, kes vajavad sagedast vereülekannet; patsiendid läbivad korrapäraseid vere puhastamisprotseduure neerupuudulikkuse korral; AIDSi või HIV-nakkusega inimesed; rasedad naised; tervishoiutöötajad, kes puutuvad kokku verega; maksahaiguse sümptomitega patsiendid. tsirroosi, vähi ja teiste maksahaiguste raviks.

    Kvantitatiivse analüüsi ettevalmistamine hõlmab selliste eeskirjade järgimist:

    Ärge suitsetage 1 tund enne testi tegemist. Ärge sööge 4 tundi enne protseduuri; kõige parem on kvantitatiivne analüüs läbida pärast kvalitatiivse läbimist; Ärge tarvitage alkoholi päev enne uuringut.

    Selle haiguse efektiivne ravi mõjutab viiruse DNA koguse vähenemist seerumis. Kuus kuud pärast ravi algust väheneb viiruse suurus 2-3 korda. Kui katse tulemused ei ole aja jooksul muutunud või vastupidi, need muutuvad halvemaks, muutub terve ravi tingimata ja automaatselt muutub äge hepatiit krooniliseks.

    Kui hepatiidi viiruse DNA satub kehasse, võib infektsioon esineda kahel viisil:

    replikatsioon (tekib äge või krooniline hepatiit, mis edastab ilma meditsiinilise sekkumiseta maksas maksatsirroosi); integreeriv (asümptomaatilise, mitteaktiivse viiruse kandja areng, mis põhjustab ikkagi tsirroosi või hepatotsellulaarset kartsinoomi).

    Kuidas toimub vere kogumise protseduur? Arst tõmbab patsiendi küünarvarv käeraketiga ja asetab nõela veeni küünarnukist, seejärel võtab verd süstlasse ja valab selle spetsiaalsesse katseklaasi. Tulemused valmivad paariks päevaks, sõltub ajavahemik sellest, kus patsient analüüsi viib.

    Materjaliks on vere seerum, lümfotsüüdid, hepatobia biopsia, mis asetatakse katseklaasi, millel on hästi kruvitud kork. Kuid proovivõtuanalüüsi tulemusel võib mõjutada saastunud materjal, materjali üleekspressioon (seda hoitakse kuni 24 tundi temperatuuril, mis ei ületa +4 ° C).

    Kvantitatiivsed analüüsimeetodid

    On mitmeid kvantitatiivse analüüsi meetodeid, sealhulgas PCR-i, ELISA-d, biokeemiat.

    PCR (polümeraasi ahelreaktsioon).

    See on pinnaantigeeni valkude test, mis moodustab osa viiruse väliskestest. Kui viiruse osakesed satuvad kehasse, hakkavad nad intensiivse paljunemise maksa pinnal, hävitades elundi terved rakud. Uued molekulid vabanevad verest.

    Selle põhjal uuritakse seerumi antikehade kontsentratsiooni ja tehakse kindlaks, kas on olemas B-hepatiidi nakkus või mitte.

    Teadustöömaterjal viiakse tühja kõhuga. PCR viiakse läbi seadmes, mida nimetatakse amplifikatsiooniks.

    PCR analüüsi algoritm:

    Kõigepealt lõhustatakse DNA kahe sõltumatu ahelaga, suurendades materjali temperatuuri võimendaja uurimiseks. Materjal jahutatakse veidi lämmastikuga. Praimerid leiavad DNA molekulis vajalikud järjestused ja ühendavad need. Pikenemine on kolmas samm, kui kaks praimerit ühendavad kaks DNA ahelat. DNA polümeraasi ensüümi abil toimub DNA segmendi lükkamine varem ühendatud praimerist. Seega iga DNA ahela praimeripiirkonna saidis moodustub teine ​​komplementaarne DNA-ahel.

    Tulevikus neid samme korratakse mitu korda ja mõne tunni jooksul tehakse 35-45 tsüklit, moodustatakse soovitud valimi mulljardid koopiat. Kui sellised koopiad on olemas, arvutatakse nende kogus 1 ml analüüsitavate materjalide kohta.

    Paljud meie lugejad rakendavad aktiivselt hästi tuntud loomulikke koostisosi, mida Elena Malysheva avastas maksa raviks ja puhastamiseks. Soovitame teil lugeda.

    Lisaks PCR-ile kasutatakse ELISA-meetodit (ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs). See määrab kindlaks mitte ainult pinna-antikehad, vaid ka antikehade arvu, mis paiknevad eelnevate antigeenide sees ja on nendega omavahel ühendatud.

    Biokeemia

    Teine kvantitatiivse analüüsi meetod. Kui viirus siseneb kehasse kahjustatud maksarakkudest, vabanevad ensüümid kehasse, kui nende kogus on normist kõrgem, siis võime rääkida infektsioonist. Lisaks on vaja määrata maksatalitluse (fibrilliini, ALT, AST, leelisfosfataasi, gamma-GT) sisalduse määramiseks viiruse koormus (DNA-HBV). Nakkushaiguste spetsialist on kohustatud külastama, kes vajaduse korral saadab patsiendi fibroelastomeetriasse, valib ravikuuri.

    Biokeemia - kvantitatiivne analüüs

    Reaalajaline PCR

    Selles meetodis toimub koopiate otsimine pärast iga tsüklit, mitte pärast 35-45 aastat. See meetod töötab samamoodi nagu PCR, see võimaldab teil määrata proovide arvu uurimiseks. Seega analüüsib aeg oluliselt, samas kui 100% tagatud tulemused.

    B-hepatiidi DNA-de tuvastamine

    B-hepatiidi DNA määramine on väga oluline, sest väikese näitaja korral on haiguse prognoos soodsam kui suurem. HBV DNA kontsentratsiooni mõõdetakse koopiates / ml või me / ml

    1 me / ml = 2,83 x 10 koopiat / ml

    Selle analüüsi tulemused võivad olla järgmised:

    Viiruse DNA ei tuvastata, kui see ei ole organismis või kontsentratsioon on väga madal, 90 me / ml = 200 koopiat / ml; Viiruse DNA tuvastatakse koguses, mis jääb allapoole kontsentratsiooni normi, 2 × 106 koopiat / ml; Virus DNA on keskmiselt 2 × 106-2 × 109 koopiat / ml; Viiruse DNA on suurem kui 2 × 109 koopiat / ml, antikehade kontsentratsioon on kõrge, mis näitab haiguse arengut.

    Kui katse tulemus on positiivne, siis diagnoositakse seda:

    hepatiit B viiruse vedu; krooniline hepatiit; äge hepatiit B-haigus.

    Kui tulemus on negatiivne, siis:

    organismis puudub viirus; Taastumisperioodil võib esineda B-hepatiit (kui eelmised testid olid positiivsed).

    Harvadel juhtudel näitab B-hepatiidi viiruse negatiivne DNA-uuring viiruse kiiret ja pahaloomulist käiku.

    Otsus viiruse analüüsi tegemise kohta toimub:

    Lugeja Svetlana Litvinova ülevaade

    Hiljuti lugesin artiklit Leviron Duo kohta maksahaiguste ravis. Selle siirupiga võite FOREVER ravida kodus maksa.

    Mulle ei kasutanud mingit teavet, vaid otsustasin tellida pakendi. Ma märkasin muutusi nädala hiljem: püsiv valu, rasked ja kihelustunne maksas maksatas mind enne - taandunud ja 2 nädala pärast nad täielikult kadusid. Meeleolu on paranenud, ilmus soov elada ja nautida elu uuesti! Proovige seda ja teie, ja kui keegi huvitab, siis link allolevale artiklile.

    Loe artikkel -> terapeut; viroloog; hematoloog; nakkushaigused

    Kvantitatiivne analüüs on haiguse diagnoosimisel kohustuslik ja peab toimuma enne ravi alustamist. Kuid tuleb meeles pidada, et B-hepatiit on mõnikord tihedalt põimitud hepatiit D-ga, mis võib sellist analüüsi teostamisel tekitada täiendavaid raskusi. Seetõttu peaksite kaaluma järgmisi komplikatsioonivõimalusi:

    organismis puudub viirus; Taastumisperioodil võib esineda B-hepatiit (kui eelmised testid olid positiivsed).

    Harvadel juhtudel näitab B-hepatiidi viiruse negatiivne DNA-uuring viiruse kiiret ja pahaloomulist käiku.

    Otsus viiruse analüüsi tegemise kohta toimub:

    Lugeja Svetlana Litvinova ülevaade

    Hiljuti lugesin artiklit Leviron Duo kohta maksahaiguste ravis. Selle siirupiga võite FOREVER ravida kodus maksa.

    Mulle ei kasutanud mingit teavet, vaid otsustasin tellida pakendi. Ma märkasin muutusi nädala hiljem: püsiv valu, rasked ja kihelustunne maksas maksatas mind enne - taandunud ja 2 nädala pärast nad täielikult kadusid. Meeleolu on paranenud, ilmus soov elada ja nautida elu uuesti! Proovige seda ja teie, ja kui keegi huvitab, siis link allolevale artiklile.

    Loe artikkel -> terapeut; viroloog; hematoloog; nakkushaigused

    Kvantitatiivne analüüs on haiguse diagnoosimisel kohustuslik ja peab toimuma enne ravi alustamist. Kuid tuleb meeles pidada, et B-hepatiit on mõnikord tihedalt põimitud hepatiit D-ga, mis võib sellist analüüsi teostamisel tekitada täiendavaid raskusi. Seetõttu peaksite kaaluma järgmisi komplikatsioonivõimalusi:

    Kaasinfektsioon - infektsioon tekib kohe kahte tüüpi B- ja D-hepatiidi vastu. See haigus on palju raskem ja valulikum. Sellisel haigusel puudub krooniline vorm, sest haigus on enamasti surmav; Superinfektsioon - äge B-hepatiit ühineb eelnevalt langenud hepatiit D-ga, sellisel juhul levib haigus kroonilise haigusprognoosiga.

    Tundub ikkagi, et keha taastamine on võimatu?

    Otsustades asjaolu, et praegu lugesite neid jooni - võit võitluses maksahaiguste vastu pole veel teie poolel...

    Ja kas olete juba mõelnud kirurgia ja mürgiste ravimite kasutamise kohta, mis reklaamivad? See on arusaadav, sest valu ja maksakahjustuse ignoreerimine võib põhjustada tõsiseid tagajärgi. Iiveldus ja oksendamine, kollakas või hallikas nahavärvi, mõru maitse suus, tume uriin ja kõhulahtisus... Kõik need sümptomid on tuttav oma kogemusest.

    Kuid ehk on õige mitte mõjutada mõju, vaid põhjus? Lugege Alevtina Tretyakova lugu, kuidas ta mitte ainult maksahaigusega toime tulla, vaid ka selle taastada. Loe artikkel >>


    Seotud Artiklid Hepatiit