C-hepatiidi PCR-analüüsi dekodeerimine

Share Tweet Pin it

Spetsiifiline laboratoorne uuring - PC-viiruse analüüs hepatiit C - oluliselt lihtsustab selle viirushaiguse diagnoosimist. C-hepatiit ei ole erand. Vana proovi verest saab testida viirusevastase aine rna ja muu geneetilise materjali sisalduse suhtes. Kõik patsiendid, kellel on hepatiit C vastased antikehad, tsirkuleerivad vereplasmas, analüüsitakse PCR abil, mille olemasolu kinnitas kvalitatiivset avastamist.

Tulemuste tõlgendamist tõlgendatakse uurimisvormi veerus kui "positiivset" või "negatiivset" analüüsi. Lisaks on PCR-i abil võimalik mitte ainult määrata minimaalne viiruse sisaldus, vaid ka osakeste arv. Seega on võimalik määrata hinnanguline viiruse koormus ja määrata meditsiinilise ravi taktika nii täpselt kui võimalik.

Viiruslik maksakahjustus

Maksa kui seedetrakti elemendiks on tohutu koorem. Tema rakkudes esineb kõige metaboolsetest metaboolsetest reaktsioonidest, mis tagavad kõikide elundite ja süsteemide optimaalse toimimise. Samal ajal on selle detoksifitseeriv väärtus suurepärane räbu ja metaboolsete toodete eemaldamiseks ensümaatilise sapiga.

Maksa katkestamine erineva iseloomuga viirustega on kehale väga ohtlik. Mitmekesine kliiniline pilt ja ravivastuse mittetäitmine viivad hepatiidi esile ohtu tervisele. C-hepatiit on krooniline ja võib pikka aega olla negatiivne, inimkeha aeglaselt parasiitidena. Viirus levib bioloogiliste vedelike kaudu: verd ja vähem sperma kaudu. Mittesteriilsete süstalde kuritarvitamine, nakatunud naiste loomulik sissetoomine, tervishoiutöötajate juhuslikud vigastused või kärped võivad põhjustada viiruse ülekandmist tervetele inimestele.

Haiguse õigeaegset diagnoosimist takistab peidetud kliiniline pilt ja mittesüstemaatiline patoloogia. Positiivset tulemust võib lihtsalt halvasti toimivate analüüsidega kaotada. Ainult märkimisväärne kahju maksa rakkudele põhjustab teatud sümptomaatiat, kuid vireemia negatiivne mõju ei jäta seega võimalust elundi taastamiseks.

Kaasaegne meditsiin on välja töötanud spetsiaalsed meetodid vähimatki viiruse jälgede äratundmiseks. PCR, IFA, maksa biopsia võib tuvastada vähimatki maksakahjustust ja minimaalset viirusevastaste antikehade taset. PCR-i abil on analüüsimine kõige lihtsam ja usaldusväärsem.

Kvalitatiivne analüüs

Polümeraasi reaktsiooni olemus on rna järjestuse genereerimine. Reaktsioon viiakse läbi samade viirusvalkude manulusel vereplasmas.

Spetsiaalsed katalüsaatorid võimaldavad sünteesida sarnast ahela viiruse järjestust, mida võrreldakse viiruse RNA tuntud nukleotiididega. Selle põhjal määravad nad kindlaks viiruse koormuse ja maksakahjustuse.

PCR suudab püüda isegi soovitud geeni ühe kohaloleku vereproovis. Selline diagnostiline ahelreaktsioon on samuti väga spetsiifiline. Nukleotiidide ahelate järjestus on iga olendi jaoks ainulaadne, nii et ensümaatilised praimerid loovad soovitud geneetilise teabe identsed järjestused. Seega võib iga viirust tuvastada vähimatki täpsusega, isegi kui selle kvantitatiivne näitaja on äärmiselt väike.

Patsientidel, kelle veres leiti antikehasid viirushepatiidi vastu, vii läbi PCR või Eph kvalitatiivne uuring. Analüüsi tulemus võib olla nii positiivne kui ka negatiivne, mis mõlemal juhul nõuab ravi.

Ahelreaktsiooni positiivne reaktsioon tuleks detekteerida hepatiidi viiruse RNA fragmentide esinemisena või infektsiooni nähtusena.

Praegu on vereplasm aktiivselt paljunev ja maksa rakkudes parasiitne. PCR-diagnostika võib anda negatiivse vastuse, kui plasmas esineb vähe viiruse RNA osakesi, mis on madalamad kui testi tundlikkus, või üldse mitte. Pärast otsest nakatumist kasvab viiruse hulk suhteliselt aeglaselt ja alles 1-2 nädala möödudes saab IFAS või muu kvalitatiivne uuring neid isoleerida.

Negatiivset analüüsi saab järgmistel juhtudel:

  1. Materjali võtmisel ebasoodsates tingimustes, saades vereproovi saastumisega;
  2. Kui patsient on varem saanud hepariini süsti.
  3. Võttes võetud proovide teiste ensüümide ja substraatide esinemine häirib ahelreaktsiooni kulgu.

Kvantitatiivne analüüs

Kvantitatiivne test mikrobioloogilise diagnoosina on mõeldud viiruse koormuse määramiseks. Geneetiliselt muundatud materjali koguse ja selle kontsentratsiooni määramise aluseks on kinnitatud kvalitatiivne analüüs vireemiale. Avastatud viiruse rna arv määratakse vere koguse ühikuna, tavaliselt 1 milliliitris. Nõutavad materjalid on väljendatud rahvusvahelistes üksustes, mõned laborid kasutavad eksemplaride arvu analüüsi käigus.

Tavaliselt analüüsitakse enne PCR-i mis tahes raviskeemi kvantitatiivset analüüsi. Viiruse rna loendamine toimub üsna tihti: pärast ühe, nelja, kaheteistkümne ja kakskümmend neli nädalat. 12. nädala peetakse indikatiivseks, kuna analüüsi põhjal viiakse selle perioodi jooksul läbi ravimeetmete tõhususe tõlgendamine.

Kvantitatiivne analüüs, kasutades PCR-i või IFA-d, hõlmab veeniproovide võtmist.

Tulemuste tõlgendamine kui kõrge viiruskoormus algab joonest 800 000 RÜ / ml. Selline C-hepatiidi positiivne tulemus peegeldab vähemalt 3000 000 koopiat milliliitri vere kohta. Vireemia madal tase lakkab 400 000 RÜ / ml. Uuringu tulemused võivad olla negatiivsed, aga ka näitaja "mõõtepiirkonna all".

Kvantitatiivne test, mille hinnanguline väärtus "alla mõõtepiirkonna" ütleb, et reaktsiooni ajal ei olnud võimalik RNA arvutada. Viirus liigub endiselt kehas, nagu näitab positiivne kvalitatiivne test. Pcr või ifa kvantitatiivse analüüsi negatiivne näitaja näitab rna puudumist selles vereproovis.

Vaatamata piiratud viisidele viiruse ülekandumise kaudu verest, suureneb risk, et viirus ületab sugu näärmete sekretsiooni emalt lapsele.

Kvantitatiivne analüüs annab olulist abi terapeutilise sekkumise hindamisel. Ifa ja PCR peegeldavad viirusevastaste ravimite toimet, aitavad kindlaks määrata ravi aja ja määravad patsiendi immuunsuse tekkimise. Laboratoorsete testide varane negatiivne reaktsioon näitab edukat ravi ja vajadust ravi kestuse vähendamiseks. Vireemia mööduvat langust võib tõlgendada kui teraapia muutmise vajadust. Viiruslike koormuste tase määrab haiguse prognoosi. Madala kiirusega hepatiit on tõenäoliselt lihtsalt ravitud ja viirust saab organismist täielikult eemaldada. Kõrge viirusliku esinemise määr veres nõuab hoolikat tähelepanu ja mitmekülgset ravi.

Hepatiidi C kvalitatiivne analüüs

Jäta kommentaar 7,180

Polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne analüüs - C-hepatiidi PCR-i määramine määrab kindlaks HCV olemasolu või puudumise organismis. Laboratoorsetes tingimustes uuritakse RNA struktuuri, mis sisaldab viirust. Viiruse C avastamise korral on vaja läbi viia ravikuuri, sest maksa tähelepanuta jäetud seisund põhjustab tõsiseid tagajärgi. Kõrgekvaliteetne PCR viiakse läbi ka pärast taastumist, et kinnitada antikehade puudumist. Määratud tavapäraseks kontrollimiseks. PCR (kvalitatiivne), mis põhjustab vereseerumis madalat kontsentratsiooni, ei pruugi midagi tuvastada, kuna diagnostilise süsteemil on oma tundlikkuse piirväärtused. Haiguse esialgse või kerge vormi korral viiakse PCR ultra-diagnostika läbi ultra-tundlikes seadmetes.

Mis on RNA viirus?

C-hepatiidi viiruse (või C-hepatiidi viiruse RNA) termin RNA on maksahaigus ise. Viirus C seostub organismi tervete rakkudega sissetungimise kaudu. Aja jooksul levib kogu keha, on vaja ainult sattuda verdesse. Selle tulemusel tungib patogeen maksa sisse, kaitseb selle rakke ja teeb kõvasti tööd. Maksa rakud (hepatotsüüdid) töötavad selle mõju all, muutuvad ja sellest surevad nad. Mida kauem on viirus C maksas, seda suurem on rakkude arv. Aja jooksul arendada ohtlikke haigusi, mis põhjustavad pahaloomulise degeneratsiooni ja surma.

Maksa infektsioon selle tüüpi viirusega ei pruugi ilmneda väljastpoolt. Paljude aastate või aastakümnete vältel tunneb nakatunud inimene täiesti tervislikku seisundit ja sagedamini näitab patoloogiat ainult juhusliku uurimisega. Hepatiidi veres annetamisel uuritakse osa inimese RNA (ribonukleiinhappe) ahelast, mis on inimese geeni osa (DNA). Laboratoorsete uuringute tulemusi ei tohiks kasutada enesehoolduseks, sest see on ainult näitaja. Täpne pilt ja täiendav diagnoos on arsti poolt paremini kindlaks määratud.

Kui see on valmis: teadustöö näited

HCV kinnitamisel viiakse läbi PCR analüüs (polümeraasi ahelreaktsioon). PCR-uuringud aitavad patogeenset materjali leida RNA struktuuris ja määrata tõhus ravi. Nimetatud järgmistel juhtudel:

  • maksa põletiku tunnuste avastamine;
  • profülaktika uuringud ennetamiseks;
  • kokkupuutuvate inimeste uurimine;
  • segapärase hepatiidi diagnoos (peamise patogeeni kindlaksmääramine);
  • viiruse paljunemisvõime taseme kindlaksmääramine kroonilises vormis;
  • maksa tsirroos;
  • et määrata ettenähtud ravi tõhusus.
Teadusuuringute PCR näeb ette arsti, et määrata kindlaks hepatiidi raviskeemi efektiivsus.

PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs on olemas. Kvantitatiivne PCR näitab RNA protsentuaalset suhet viiruse kandjate hulka veres ja kvalitatiivne viiruse olemasolu või puudumine. Kvalitatiivne positiivne näitaja (C-hepatiidi RNA olemasolu) vajab ka kvantitatiivseid uuringuid. Hepatiidi põhjustava toimeaine kõrge kontsentratsioon seondub selle ülekandumise riskiga, teiste nakatamisega. Madal arv on paremini ravitav. RNA viiruste hulk veres ei ole seotud haiguse intensiivsusega. PCR-analüüs tehakse ka interferoonravi puhul, et määrata ravikuuri kestus ja keerukus.

Hepatiit C kõrge kvaliteediga PCR-analüüsi omadused

Polümeraasi ahelreaktsiooni indeksiga kvalitatiivne analüüs määratakse kõikidele patsientidele, kellel on veres C-hepatiidi antikehad. Haigestunud ja taastunud isikud peavad katse uuesti proovima. Soovitatav on läbida B-hepatiidi test, siis positiivse järelduse korral ja hepatiit D. Samuti tuleks kvalitatiivselt analüüsitud reaktsioon viia läbi koos teiste vereanalüüsidega. Analüüsid näitavad täielikku pilti viiruse levikust.

Katsetulemustest nähtub, et ainult C-hepatiidi positiivne test on nähtav või negatiivne, see tähendab viiruse olemasolu või puudumine. Kui väljund on "tuvastatud", siis viirus on ja on endiselt aktiivne. Nimetus "ei tuvastata" tähistab viiruse või selle väikese koguse puudumist. Selle indikaatoriga tuleks meeles pidada, et diagnostiliste süsteemide analüütiline tundlikkus on erinev ja et RNA hepatiit C võib ikkagi veres olla, kuid ei avaldu analüüsis.

Eriti tundlik PCR-meetod ultrahepatiit C avaldub isegi vähesel määral. Kasutatakse fluorestsentsi hübridisatsiooni uuringut, mis on mitu korda kõrgem kui tavalised PCR-süsteemid. Seda meetodit kasutatakse mitmel juhul:

  • kahtlustatud peidetud C-hepatiidi vormid;
  • PCR-diagnostika ei kinnita patogeeni, kuid seal on antikehi;
  • tagasinõudmise korral;
  • varajase nakkuse tuvastamiseks.
Tagasi sisukorra juurde

Dekodeerimisanalüüs

HCV dekodeerimine PCR-iga mõjutab lõplikku otsust diagnoosi andmisel eelkõige ultrametodmeetodil. Selle uuringu peamine puudus on proovi ja materjalide steriilsete tingimuste rangelt kinnipidamine. Väike kõrvalekalle mõnikord annab ebaõigeid analüütilisi järeldusi, raskendab diagnoosi ja järgnevat ravi. Hepatiidi RNA määramiseks PCR-i analüüs ei pruugi alati kindlalt näidata haiguse pilti, mõnikord on mõnikord ebatäpsed ja mõlemas suunas.

Hepatiidi viiruse diagnoosimisel soovitatakse kasutada terviklikku uuringut.

Näitajate norm

Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsi puhul peetakse uuringu tulemuste kohaselt viiruse hepatiit C JgM antikehade puudumist. Samal ajal näitavad seroloogilise analüüsi tulemused, et C-viiruse antikehade esinemine on samuti normaalne. Kvalitatiivne määratlus ei näita haiguse intensiivsust, see näitab ainult R-hepatiidi C põhjustatud agensit. Seda analüüsi korratakse pärast ravi, et kinnitada tegelikku taastumist.

Kõrvalekalded

Kui JgM antikehad esinevad HCV RNA-le, siis see viitab arenevale infektsioonile. Samaaegselt haigus jätkub ägedalt või krooniliselt, avaldub erinevates etappides. Kui antikehade arvu vähenemist registreeritakse, näitab analüüs, et ravitulemused saadi taastumise ajal. Diagnoosides leitakse ainult väga haruldasi valepositiivseid juhtumeid. Neid leidub naistel raseduse ajal ja teiste nakkushaigustega inimestel.

Mis on PCR-analüüs ja viiruse koormus?

Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on labori meetod DNA ja RNA määramiseks. Esmakordselt katsetasid seda peaaegu pool sajandit tagasi Ameerika Carey Mullis. See ülitundlik analüüs võimaldab tuvastada genoomi kandjat ühe allika molekuliga, mis sisaldub veres, süljas või nahas.

PCR-meetodil on suurepärased väljavaated, mida kasutatakse mitte ainult meditsiinis, vaid ka geenitehnoloogia ja kohtuekspertiisi valdkonnas. Sellega kloonida ja luua uusi DNA tüüpe, määrates kindlaks sugulussuhte määra. Kurjategija tuvastatakse kuriteo areenil leiduv epiteeli tükk.

Hepatiidi PCR-analüüs - mida nad teevad ja miks?

Miks on C-hepatiidi kahtluseks vajalik PCR-analüüs, mis see on?

Hepatiit C viirus on RNA viirus, mis sisaldab 6 genotüüpi ja kuni 500 alamtüüpi. Kõigist hepatiitest on sellel viirusel kõrgeim mutatsioonivõime ja ülemäärane immuunsüsteemi kaitsev barjäär. Hepatiidi juhtumite koguarvust põhjustas C-viirus 70% kroonilise vormi ja 30% tsirroosi ja maksavähi juhtumitest.

Meetodi olemus: uuritavas geenis osalev osa spetsiifiliste ensüümide ja seisundite abil, mis on sunnitud in vitro mitmekordistama. PCR analüüs võimaldab kindlaks teha viirustüve, ilma milleta ei ole võimalik tõhusat ravi teha: iga genotüüp on viirusevastaste ravimite suhtes erinevalt tundlik. Kasutatakse kahte tüüpi PCR-i:

Viirusevastane ravi vajab pidevat seiret, et ravi kohe kohandada, ning selleks kasutatakse ka polümeraasi ahelreaktsiooni.

Kvalitatiivne ja kvantitatiivne PCR

Hepatiidi C kvalitatiivne PCR annab vastuse: kas patsiendi veres on viiruse C tüvi ja milline neist. Genotüpiseerimine on vajalik diagnoosi selgitamiseks, haiguse prognoosimiseks ja ravi määramiseks.

Vastavalt aktsepteeritud klassifikatsioonile on geen tähistatud numbriga ja alamtüüp on väike ladina täht.

Looduslikest ainetest lähtuv spetsiaalne preparaat.

Ravimi hind

Ravi ülevaated

Esimesed tulemused tunnevad pärast nädala manustamist.

Lisateavet ravimi kohta

Ainult 1 kord päevas, 3 tilka

Kasutusjuhend

Genotüübi C viiruse tabeli dekodeerimine:

  • Genotüüp 1a, 1b, 1c
  • Genotüüp 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotüübid 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotüübid 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotüüp 5 a
  • Genotüüp 6 a

Kõige tavalisemad genotüübid 1,2,3. Venemaal on kõige sagedasemad viiruse C viiruse 1a, 1b, 2 ja 3 tüved.

Viiruse 1b genotüüp on raskem kui teistel ravida, muutub see 90% krooniliseks, millest 30% taastuvad kui maksavähk või tsirroos.

Genotüüpide 2a ja 3a krooniline tase on 33-50%, mis reageerib viirusevastasele ravile.

Viiruse olemasolu kinnitamisel tehakse hepatiit C kohta kvantitatiivne PCR-test, mida kasutatakse patsiendi laboriproovis sisalduvate RNA molekulide arvutamiseks.

Dekodeerimisanalüüs

Kvaliteetse PCR-i analüüsil on kaks vastust:

PCR negatiivne tähendab seda, et patogeen ei leita vereproovides.
Positiivne vastus viitab vastupidi: leitakse üht või teist viiruse C genotüübi RNA.

Tulemuse tõenäosus on 95%. Ülejäänud 5% on inimest põhjustatud viga. See võimalus on lubatud uuringu kõrgete nõuete tõttu:

  • reagentide ladustamise reeglid;
  • meditsiinitöötajate asjakohane kvalifikatsioon;
  • biomaterjalide puhtus.

PCR-komplekt omab 100% -list diagnostilist täpsust.

Hepatiidi C RNA kvantitatiivne PCR võimaldab patsiendi kehal viiruslikku koormust määrata. Tema abiga:

  • on kindlaks määratud haiguse staadium (äge, krooniline);
  • määrab viirusevastase ravi efektiivsuse;
  • Uuritakse vajadust maksa biopsia järele.

Mõnel juhul patsient ei tunne haigusnähte, samas kui HCV-nakkus tuvastatakse PCR-meetodil. See tähendab, et haigus on varases arengujärgus või kroonilises vormis. Diagnoosi selgitamiseks viirusevastase ravi varajaseks alustamiseks on vaja täiendavaid uuringuid.

C-hepatiit viiruskoormus

Viiruslik koormus näitab maksa viiruse aktiivsust, kui aktiivselt selle paljunemist esineb.

Mis see on?

PCR kvantitatiivset hepatiiti C mõõdetakse rahvusvahelistes ühikutes 1 ml või IU / ml kohta, mis tähendab, kui palju koopiaid teatud viiruse C tüve ribonukleiinhapetest leitakse 1 ml veres testitavas veres.

Mis on kõrge, mis on madal?

Viiruse koormusanalüüs võimaldab määrata viirusliku RNA olemasolu kontsentratsioonil 50 IU / ml. Normaalne viiruse koormus on see, kui PCR-iga ei tuvastata HCV RNA molekuli.

Viiruslik koormustabel:

  • madal kontsentratsioon 600 RÜ / ml 3 x 104 RÜ / ml;
  • keskmine kontsentratsioon alates 3 * 104 IU / ml kuni 8 * 105 mm;
  • kõrge tase üle 8 * 105 IU / ml.

Madal viiruse koormus on signaal, et terapeutiline ravi valitakse õigesti, ning hepatiidi C ravi paranemise prognoos.

Suure kontsentratsiooniga viiruserakud näitavad, et haigus on ägeda faasi. Patsiendi veri on ohtlik infektsiooniallikas.

Viiruslik koormus, mille näitajad on keskmise tasemega, iseloomustavad kas HWS kroonilist staadiumi või võivad olla kaks arengusuunda: suurendada või vähendada.

Selle valmimisel viiakse pärast 6 kuud kontrolli PCR-i läbi.

PCR-diagnostika maksumus

Muret tekitavad järgmised sümptomid:

  • üldine nõrkus;
  • naha värvimuutus, silmaklaas, tühjendus;
  • iiveldus;
  • söögiisu vähenemine;
  • lihaste ja liigeste valu;
  • raskustunne paremal hüpohondriumil;
  • ASAT ja ALAT sisalduse suurenemine veres.

Kokkupuude nakatunud patsientidega on soovitatav ka preoperatiivse perioodi jooksul hemodialüüs.

Valitsuse kliinikud teevad tasuta PCR-i vereanalüüsi, kui nakkushaiguse spetsialist või hepatoloog on pöördunud.

PCR-diagnostika tasulisi teenuseid pakuvad kõik suuremad Vene linnad. Hind sõltub katse tüübist, saadaolevast seadmest, ajastusest ja muudest teguritest.

Kvaliteetne PCR-analüüs Moskvas ja Peterburis maksab 600 kuni 900 rubla. Piirkondades - 300-800 rubla.

Hepatiit C viiruskoormuse määramine läheb maksma 17000-22000 rubla. Teiste infektsioonide puhul on kvantitatiivsete uuringute hind 1200-10000 rubla.

PCR-meetodi eelised ja puudused

Millised on polümeraasi ahelreaktsiooni meetodi eelised võrreldes teiste diagnostiliste meetoditega?

  1. Lai valik rakendusi. Kasutades PCR-d, kasutades standardvarustust, saate tuvastada mis tahes viiruse.
  2. Patogeeni kindlaksmääramise täpsus. Erinevate ensüümide kombinatsioonide ja analüüsimeetodite kasutamisel saavutatakse näidustusega nakkuse uuringu 100% täpsustus.
  3. Kõrge tundlikkus. See meetod võimaldab tuvastada ühe viiruse molekuli esinemist veres.
  4. Tõhusus. Kvalitatiivne analüüs on valmis mõne tunni tagant, kvantitatiivne - kahe päeva jooksul.
  5. Viiruse diagnoosimine inkubatsiooniperioodil. PCR-i ajal ei määra patogeeni mitte antikehade esinemine, kui organismil on immuunvastus, vaid enne patoloogilise protsessi algust, mis hõlbustab ravi.

PCR puudused tulenevad selle eelistest:

  • analüüsi puhtus nõuab laboratooriumis kõige kõrgemat puhtust, kaasa arvatud õhk, nii et välimine DNA ei satu uuritavasse proovi;
  • kõrge nõuded biomaterjalide kogumise ja analüüsimisega tegelevatele töötajatele.

Hepatiit C PCR uuring: tüübid, näidustused, transkriptsioon

Viiruse hepatiit C on tõsine haigus, mis tekib maksakahjustusega. Kaheksakümmend protsenti patsientidest muutub see krooniliseks. Viirus levib maksarakkudes - hepatotsüütides - ja põhjustab nende surma. Surnud kude asendatakse sidekoe fookustega, areneb fibroos.

Mis areng maksa fibroos ei suuda täita oma ülesannet, hakkab tsirroosi, mis on ohtlik selle tüsistused: kasvavat survet värativeeni, seedetrakti verejooks, halvenenud vere hüübimist, vaimseid muutusi tõttu kahjustada aju tuumade mürgiseid aineid.

Haiguse põhjuseks on viiruse nakatumine Flaviviridae perekonnast, mis kuulub RNA viiruste tüübi hulka. See tähendab, et geneetiline materjal, millega sünteesitakse patogeeni valgud, kodeeritakse ribonukleiinhappemolekulis. Infektsioon toimub vere kaudu, seksuaalselt ja rasedast naisest lootele. Kahjuks võib nakkuse ja antikehade tootmise algusest piisava ajaga edasi liikuda - kahe nädala kuni kuue kuu jooksul. See ei võimalda nakkuse tuvastamist immuunanalüüsi meetodil ja ravi alustamist ravi alustamiseks.

Mis on PCR-analüüs?

PCR on molekulaaranalüüsi meetod, mis võimaldab tuvastada patogeeni geneetilist materjali juba esimesel nädalal pärast infektsiooni, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni. Uuringul on kõrge spetsiifilisus, täpsus ja see võimaldab mitte ainult määrata viiruse olemasolu või puudumist, vaid ka selle kontsentratsiooni ja genotüüpi.

Uuringuks võetakse patsiendi veri, milles võib potentsiaalselt paikneda viiruse RNA. Verele lisatakse praimerid - väikese pikkusega soovitud geeni kunstlikult sünteesitud piirkonnad ja RNA polümeraas on spetsiaalne ensüüm, mis suurendab korduvalt patogeeni geneetilist materjali. Spetsiaalse seadme kasutamisel viiakse läbi mitu kütte- ja jahutustsüklit. Seejärel analüüsitakse materjali ja võrreldakse viiruse tuntud geene, mille põhjal tehakse järeldus infektsiooni esinemise või puudumise kohta.

C-hepatiidi PCR-analüüsi tüübid

On olemas kolm tüüpi PCR analüüsi:

  1. PCR-i kvalitatiivne analüüs. Uuringu esimene etapp. See võimaldab tuvastada viiruse geneetilise materjali veres.

  • PCR kvantitatiivne analüüs. Võimaldab määrata viiruse koormuse - patogeeni geneetilise materjali kontsentratsiooni ühes milliliitris veres. See uuring viiakse läbi enne ravikuuri algust ja seejärel esimesel, neljandal, kaheteistkümnendal ja (kui see on pikk) ravi kahekümne neljandal nädalal, et hinnata selle efektiivsust.

  • Genotüüpimine Hepatiidi C põhjustav põhjustab sageli ja kiiresti mutante. Selles viiruse genotüübis leidus planeedil seitse varianti. Venemaal on levinud esimene, teine ​​ja kolmas tüüp. Igal genotüübil on erinev resistentsus ravile, näiteks esimese tüübi ravi efektiivsus on kuuskümmend protsenti, teisel ja kolmandal juhul on see arv kaheksakümmend viis. Seega, selleks, et valida sobivad ravimid ja määrata piisava kestusega ravikuur, on vaja täpselt määrata, millist tüüpi viirust patsient nakatub.
  • C-hepatiidi PCR-analüüsi näited

    PCR uuring määratakse järgmistel juhtudel:

    • kokkupuude haigega, kellel võib nakkust esineda;
    • positiivne ensüümi immuunanalüüs;
    • tsirroosi tunnused: maksa suuruse muutused, põrna suurenemine, nahaaluse venoosse põrnakujulise näo tekkimine;
    • maksakahjustuse sümptomite ilmnemine: valu paremal kõhul, naha kollasus;
    • ALAT ja ASAT aktiivsuse suurenemine vere biokeemilises analüüsis;
    • enne viiruskoormuse määramist ravi alustamiseks;
    • viirusevastase ravi efektiivsuse jälgimine;
    • pärast ravi, et kontrollida relapsi;
    • diagnoositud hepatiit B juuresolekul, et välistada segatüüpi maksakahjustus.

    C-hepatiidi PCR-uuringute selgitus

    Hepatiidi C dekodeerimise PCR-analüüs ja ensüümi immuunanalüüs tuleks teha hepatoloog või nakkushaiguste spetsialist. PCR-i tulemuste analüüsimine on vajalik kombinatsioonis vere biokeemilise analüüsi, biopsia ja ultraheli andmetega. Ainult kvalifitseeritud arst oskab analüüsida uuringute tulemusi ja määrata nende alusel õige ravi.

    Kvalitatiivse analüüsi dekodeerimine.

    Analüüsitud bioloogilises materjalis leiti patogeeni geneetiline materjal. Infektsioon on kinnitatud.

    Infektsioon puudub või patogeeni RNA kogus on tundlikkuse piirist madalam.

    Kvantitatiivse analüüsi dekodeerimine.

    Normaalne tase tervetele inimestele. See tähendab, et uuritavas materjalis ei ole C-hepatiidi RNA-d ega selle kontsentratsioon on uuringu tundlikkuse piirist madalam.

    RNA kontsentratsioon on alla kvantifitseerimise vahemiku. Neid tulemusi tõlgendatakse väga hoolikalt, korreleerige neid teiste uuringute andmetega, sageli uuesti õppige.

    Viirusekoormuse tase antud kontsentratsioonil peetakse madalaks. Tavaliselt tähendab viiruse vähenemine seda, et ravi on edukas.

    Rohkem kui 8 x 10 5 RÜ / ml

    Viirusekoormuse tase antud kontsentratsioonil peetakse kõrgeks.

    Rohkem kui 2,4 * 10 ^ 7 RÜ / ml

    RNA kogus on üle kvantifitseerimisvahemiku ülempiiri. Seda tulemust ei saa teha viirusliku koormuse astme kohta. Sellistel juhtudel korratakse katset vereproovi lahjendamisega.

    Genotüübi dekodeerimine.

    Tuvastatud genotüübi tuvastatud RNA

    Biomaterjalis tuvastati teatud genotüübi ja alatüübi C-hepatiidi viirus. Tulemus on kodeeritud rooma numbrite ja ladina tähtedega, näiteks - 1a, 2b. Kokku on seitse genotüüpi ja kuuskümmend seitse alamtüüpi, kuid Venemaal on ainult kolm esimest tüüpi.

    Hepatiit C viiruse RNA avastati

    Venemaal leiti haruldast genotüüpi veres olevat RNA-d, mida ei saa seostada esimese, teise või kolmanda tüübiga. Rohkem teadusuuringuid on vaja.

    See tulemus näitab, et patsient on tervislik või et patogeeni RNA on liiga väike.

    On võimalik, et C-hepatiidi PCR-analüüs on negatiivne ja ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs tuvastab viiruse vastased antikehad. See tähendab, et patsiendil oli äge hepatiit C ja ta taastati iseendale. Umbes 20 infektsiooni juhtumit põhjustab spontaanne taastumine, kui patsiendi organismil on infektsioonile piisavalt vastupanu.

    Kuigi PCR on väga täpne analüüs, võib selle tulemusi moonutada järgmistel juhtudel:

    • vere transporditi laborisse sobimatutesse tingimustesse, temperatuur oli rikutud;
    • biomaterjaliproov oli saastunud;
    • oli veres hepariini ja teiste antikoagulantide jääkide jäljed;
    • Leiti, et uurijad on inhibiitorid - ained, mis aeglustavad või peatavad polümeraasi ahelreaktsiooni.

    PCR-i eelised muude meetodite puhul

    1. Diagnoos alguses. PCR tuvastab põhjustava toimeaine geneetilise materjali. Immunofluorestsentsanalüüsi abil saab määrata ainult immunoglobuliine - aineid, mis organism tekitab infektsiooni suhtes. C-hepatiidi nakatumise korral võib intervall infektsiooni ja immuunvastuse alguse vahel olla mitu nädalat ja kuud, sel ajal on ELISA ebaefektiivne. PCR annab vastuse esimesel nädalal pärast infektsiooni.

  • Väike vea tõenäosus. Uuritavas materjalis määratakse geneetilise materjali pindala, mis on iseloomulik ainult ühele patogeenide tüübile. See kõrvaldab valed tulemused. Kui ELISA-vead on võimalikud, kuna sama tüüpi antikehi saab erinevate viiruste vastu vabastada - neid antikehi nimetatakse ristantikehadeks.

  • Kõrge tundlikkus. PCR võimaldab tuvastada haigusetekitaja RNA isegi minimaalsetes kogustes. See võimaldab tuvastada varjatud nakkusi.
  • Kuidas valmistuda vereannetamiseks PCR-uuringute jaoks

    C-hepatiidi PCR analüüsiks kogutakse venoosse verega verd. Tavaliselt võetakse patsiendi veeni korraga kaks vere osa: esimene saadetakse PCR-ile ja teine ​​ELISA-ga. Seda tehakse selleks, et täpsemalt hinnata, kui palju patsient on nakatunud viirusega ja kuidas immuunsus selle vastu võideldes.

    Tavaliselt peab patsient järgima järgmisi reegleid:

    • hommikul võetakse vereanalüüs;
    • Viimase toidukordi ja vereannetuse vaheline intervall peaks olema kaheksa kuni kümme tundi;
    • kaks või kolm päeva enne analüüsi on vaja loobuda praetud ja rasvases toidus ja alkoholis;
    • 24 tundi enne analüüsi peaks patsient vältima füüsilist koormust: ärge kandke raskusi, ärge minge jõusaali või basseini.

    Hepatiit C kvantitatiivne analüüsi transkript

    C-hepatiidi viirus on võimeline vereringes paljunema ja põhjustada lümfoproliferatiivseid haigusi. Mitmete mutatsioonide tõttu väheneb keha immuunsuskaitse ning ilmnevad viiruse genotüübid ja alatüübid. Kindla tüüpi õige ja õigeaegne määramine sõltub viirusevastase ravi efektiivsusest. Infektsiooni oht on see, et haigus on asümptomaatiline. Ainult 15 protsenti 100-st võivad tunda iiveldust ja oksendamist, kehakaalu langust ja palavikku.

    C-hepatiidi viiruse määratlus

    Hepatiidi C normaalne määr on 40-60 nm suurune, kusjuures enamik lipiide on maksakahjustus, mis on tingitud ägeda või kroonilise haigusseisundi tekkimisest. C-hepatiit, täpsemalt Togaviridae perekonna RNA viirus, on äärmiselt püsiv, edastatakse vereülekandega või mittesteriilsete esemete, ebasobivate hügieenitarvete jms kaudu. Kvantitatiivne analüüs võimaldab teil uurida verd ja tuvastada nakatunud viiruse geneetiline struktuur.

    Hepatiidi C ja selle genotüüpide määramiseks viiakse läbi kvantitatiivne analüüs. Sõltuvalt analüsaatorist saab määrata RNA viiruse esinemise kolme taseme.

    Alatüübid võivad tekitada erinevaid modifikatsioone, seega peab analüsaatori spetsiifilisus ja tundlikkus olema sada protsenti. Lisaks haiguse tuvastamisele patsiendil on vaja määrata selle raskusaste. Mõnes laboris ei ole kõiki andmeid RNA viiruse dekodeerimise kohta, võib olla valepositiivne reaktsioon.

    Nende näitajate uurimisel on hepatiit C uuringud täpsemad:

    Nende näitajate tulemuste ja kehasüsteemi üldise seisundi jälgimiseks on kuvatud tulemus, mis näitab infektsiooni määra, veres C-hepatiidi rakkude arvu ja kuju ja arvu. See aitab kaasa paranemisele ja viirusevastase ravi efektiivsusele.

    Hepatiidi C analüüsi liigid

    Mitmemõõtmeline ahelreaktsioon (PCR) annab ideele DNA osakeste arvu patsiendianalüüsides ja tuvastab nakkusohu õigesti.

    Nakkushaiguste tekitatud ained võivad esineda. Maksa infektsioon, näiteks C-hepatiit, on ravitav meie aja jooksul, kui see avastatakse õigeaegselt. Kui kahtlustatakse viirust, viiakse läbi PCR-analüüs.

    Arvestades, et viiruse sümptomeid võib pikka aega maskeerida, ei pruugi inimene haiguse tekkimist tunda. Kuid põhjalikult uurides 60-70% juhtudest tuvastatakse C-hepatiit, esimene analüüs, mis on ELISA, siis PCR-diagnoos järgneb. Analüüs viiakse läbi teatud perioodidel, et määrata haiguse staadium ja määrata sobiv ravi. Selle tegemata ilma kõigi nende protseduuride rakendamiseta on võimalik vaktsineerida hepatiidi vastu.

    Esiteks on olemas kvalitatiivne analüüs, mis üksnes kinnitab infektsiooni hüpoteesi ja seejärel kvantitatiivset, mis määrab maksa koormuse. Ideaalne võimalus oleks patsiendi geneetilisele materjalile C-hepatiidi negatiivne tulemus.

    Kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs

    On olemas kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Esimene on sisuliselt see, et see määrab infektsiooni esinemise veres. Ja see tähendab, et viirus nakatab terveid maksarakke. Kui patsiendil leitakse C-hepatiidi antikehad, viiakse kohe läbi kvalitatiivne test. Tulemuste määra peaks "veres mitte tuvastama". Viiruse kontsentratsiooni määramisel on vaja teada diagnostilise süsteemi tundlikkust, kuna patsiendid, kes saavad viirusevastast ravi, saavad analüüsi teha. Analüsaatori tundlikkuse määr ei tohiks olla väiksem kui 50 RÜ / ml.

    Kui viirus avastatakse, tehakse kvantitatiivne analüüs, teisisõnu viiruse koormus, mis määrab kindlaks viiruse kontsentratsiooni veres ja haiguse raskusastme.

    Viiruse RNA, mis on teatud koguses verd, määratletakse normina kiirusega 1 ml 1 sentimeetri kuubiku kohta. Pärast viiruskoormuse kvantifitseerimist on võimalik hinnata veel nakatamata keskkonda nakatumise määr. Niipea kui hepatiit C kontsentratsioon veres tõuseb, tuleb see eraldada keskkonda.

    Esimestel etappidel on tähtis hepatiidi kontsentratsiooni kindlaksmääramine rehabilitatsiooni kiiruse kindlaksmääramiseks. Kui hepatiit C tõuseb üle 800000 RÜ / ml, siis peetakse seda liiga kõrgeks ja selle suurenemine on kuni 1 miljon - kriitiline. Kui kvantitatiivne vahemik on väiksem kui 400 tuhat RÜ / ml, siis leitakse, et nende ümbruse nakatumine on vähem tõenäoline. See näitaja selgitab, et C-hepatiit esineb väga väikestes annustes kehas. Analüüs ei suutnud määrata viiruse RNA osakeste kvantitatiivset väärtust, mistõttu on diagnoosi õigsuses korduvalt mitu korda määratud.

    Mis on PCR?

    Täna on suur hulk erinevaid haigusi. Ja mitte nende meetodite määramiseks väiksem arv. Kuna nakkusetekitajad on õppinud keskkonnas juurduma ja kergesti arenema, kasutatakse nende diagnoosimiseks uusimaid tehnoloogiaid. Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on kiirem ja täpsem meetod, mille abil püütakse leida haiguse põhjustaja, suurendades oluliselt hepatiidi viiruse DNA osa proovis. Tema sõnad kirjutavad tihti: otsin nõela heinakuhjas ja seejärel ehitab nõelakardini.

    PCR meetodi tüübid

    Eraldage hepatiidi kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Selleks, et teha kindlaks, kas viirus on organismis, ja need, kes on leidnud hepatiit C antikehade leidnud, viivad läbi kvaliteetset katset. Dekodeerimise analüüs annab tulemuse: "positiivne"; "Negatiivne". Negatiivne tähendus tähendab, et kas inimene on tervislik või veres puuduvad ained ja neid ei leita. Seepärast on mõneks ajaks väärt läbiviimise uuesti läbi viia.

    Positiivne tulemus viitab nakkuse olemasolule. See on peaaegu alati täpne väärtus. Ebaõiged tulemused sõltuvad tavaliselt inimfaktorist (ebaõige ladustamine või meetodi reeglite mittetäitmine). Kui määr on, on tulemus negatiivne. Enne testimist ei ole erireegleid, lihtsalt võtke vere verest.

    Kui leitakse, viiakse läbi kvantitatiivne analüüs (viiruskoormus) - see annab numbrilised väärtused: kui palju hepatiidi viiruse RNA on praegu uuritava materjali ettenähtud mahus. Infektsiooni aktiivse arengu korral saab seda nakatunud inimesel tuvastada 1-2 nädala jooksul. Verd vaadatakse tavaliselt ka seetõttu, et agendid ringlevad selles vabalt.

    Kvantitatiivse PCR-analüüsi tunnused

    Kvantitatiivse analüüsi erinevus on see, et kõik see ei edasta. Kvalitatiivne - määrab kindlaks olemasolu ja kvantitatiivne - aitab kinnitada "hepatiidi viiruse" järeldust, haiguse kulgu prognoosi ja määrata ravikuuri. Kui efektiivne ravi on, on RNA-de arv enne ravi ja selle ajal. Samuti aitab see määrata ravimite annuste määramist.

    Näidustused

    Tavaliselt toodetakse seda enne ravi alustamist. Peamised näited võivad olla:

    • viiruse koormuse määramine ja viirusevastase ravi kontroll;
    • kõrge kvaliteediga PCR-i leitud hepatiit C antikehad;
    • ägeda ja kroonilise C-hepatiidi avastamine;
    • segatüüpi hepatiidi olemasolu;
    • ravi planeerimisel;
    • kui kvalitatiivne uuring ikkagi leiab haiguse olemasolu pärast kaheteistkümnendat ravinädalat.

    Vaadake ka, milline on hepatiidi viiruskoormus: madala teraapiaga tehakse edukalt; suurenenud - ravi ei ole tõhus ja seda tuleb muuta.

    Mis toimub haiguse erinevatel etappidel?

    Selle haiguse erinevatel etappidel viiakse läbi uuringuid, et anda ülevaade ravi eelistest ja selle kestuse planeerimisest. Hea ravivastuse korral on see lühenenud. Vastasel juhul on viiruse aeglane äravõtmine ravikuuri pikenenud. Hepatiidi PCR-i tegema 1,4, 12, 24 ravinädalat. Kui näitajad ei lange pärast 12 nädala möödumist, järeldavad nad, et ravi ei sobi selle organismi jaoks. Seda analüüsi kasutatakse, et määrata, kui aktiivne nakkus on ja kuidas see tõenäoliselt selle edastab. Näiteks raseduse ajal on oht nakatada last. Pärast ravi tuleb kindlaks teha haiguse kordumise oht.

    Dekrüpteerimine

    Uuringu läbiviimise järel saab analüüsida mitte numbritega, vaid sõnadega: "allpool mõõtepiirkonda" ja "ei tuvastatud". Kvantitatiivne PCR on tundlikum kvalitatiivsemalt. Järeldus "ei tuvastatud" võib öelda, et infektsiooni ei leitud. "Mõõtmispiirkonna all" - test ei leidnud viirust, kuid see on väikse väärtusega. Sellises olukorras tee teine ​​uuring.

    Viiruslik koormus on infektsioosse RNA arvu kindlaksmääramine määratud kogus veres (kvantitatiivselt 1 ml = 1 kuupsentimeetrit). Valmistatud rahvusvahelistes mõõtmistes IU / ml. Eraldatud laborid tähistavad koopiaid / ml. Erinevad katsesüsteemid suudavad dešifreerida komponentide tõlkimist rahvusvahelistesse väärtustesse omal moel. Tabel 1. Viiruse RNA kvantitatiivse analüüsi detekteerimine

    C-hepatiidi kvantitatiivse analüüsi määr

    Kui inimene on tervislik, on norm "ei tuvastatud". Haiglates inimestel on viiruse annuse vähendamine tulemustes logaritmilise üksuse kohta normaalne, mis väljendub nullide arvu vähenemises analüüsis ühega (näiteks 1 x 106 IU / ml kuni 1 x 105 IU / ml). Viiruse kontsentratsiooni vahemik, mis määrab amplifikatsiooni, jääb vahemikku 1,8 * 102-2,4 * 107 IU / ml. Tulemuste käsitlemine:

    • madal kontsentratsioon - 600 IU / ml kuni 3 * 104 IU / ml;
    • keskmine - alates 3 x 104 IU / ml kuni 8 x 105 IU / ml;
    • kõrge - üle 8 * 105 IU / ml.

    Kõrvalekalded

    Kui katsetulemuste muutused ei ületa normi, võib see tähendada haiguse tagastamist ja viiruse paljunemist. Teatavad tegurid võivad mõjutada ebausaldusväärse tulemuse saamist, näiteks proovide saastumist; hepariini sisaldus veres ja ained, mis aeglustavad PCR komponentide toimet; labori vigu; katse eeskirjade eiramine.

    Samuti võib see tulemus mitmel laboril erineda, ehk oli olemas erinev uurimismeetod. Selleks, et teada saada, kuidas maksa on mõjutatud, ja selle haiguse ohtu, ei piisa hepatiidi kvantitatiivse PCR-i läbiviimiseks. Lisaks tehakse biokeemilisi protseduure ja biopsiaid.

    Ravi planeerimisel viirus on genotüüpitud. Kuna hepatiit C on võimeline muutuma, on mitu rühma. Erinevat liiki ravi võib varieeruda. On olukordi, kus esineb mitu liiki, kuid analüüs näib olevat valitsev. Seejärel tehke test uuesti.

    Meetodi eelised

    PCR-meetod võimaldab esitada arvamuse ja määrata õige ravi. Tehnoloogia eelised:

    • Tulemuste kiirus - ei nõua patogeeni liikide eristamist ja kasvatamist. Protsessi automatiseerimine võimaldab teil töödelda ja uurida materjali tulemusega 4-5 tundi.
    • Patogeeni määramise otsene - DNA erilise osa leidmine viitab otseselt haiguse esinemisele. Näiteks ELISA - leiab valgu markerid (bakterite jäätmed), mis ei anna täpseid tõendeid haiguse esinemise kohta.
    • Spetsiifilisus - uuritakse ainet, mis on iseloomulik ainult konkreetsele patogeenile, mis välistab reaktsiooni valetele reageerivatele ainetele.
    • Tundlikkus - võib tuvastada väikseima viiruse koguse.
    • Universaalsus - põhineb spetsiifiliste organismide DNA fragmentide või RNA leidmisel. See võimaldab läbi viia ühe biomaterjaliga seotud ainete diagnostika, kui teised meetodid on võimetud.
    • Avastab mitte ainult ilmseid, vaid ka latentseid infektsioone, mis on efektiivsed raskesti kasvatatavate, mitte kasvavate, püsivate ainete uurimiseks.
    • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

    Selle uuringu abil saab igaüht diagnoosida haiguse puudumise kontrollimiseks. Kuid usaldusväärsete faktide korral peate rangelt järgima juhiseid. PCR-i kasutatakse erinevates valdkondades: kohtuekspertiisi, isaduse määramiseks, erinevate viiruste diagnoosimiseks, ravimite allergiate avastamiseks, geenide kloonimiseks, mutageneesiks, DNA järjestamiseks.

    Millal on määratud viiruse koormuskatse?

    Seda uuringut määrab arst, kui C-hepatiidi diagnoosimisel on positiivne reaktsioon. Tavaliselt määratakse see samaaegselt C-hepatiidi viiruse genotüübi määramisega. Mida tähendab hepatiit C kvantitatiivse analüüsi dekodeerimine? Kõigepealt näitab see analüüs, kuidas patsient on nakatunud, ja seega on see nakkav. Viiruse kvantitatiivne määramine veres võimaldab teil määrata raviskeemi efektiivsuse. Arstid määravad seda ravi 4, 12 ja 24 nädala pärast. Viiruslike koormuste vähenemine näitab, et ravi on õigesti valitud. Samuti analüüsitakse 24 nädala pärast ravi lõppu.

    Uuringud on näidanud, et viiruse koormuse määr ei mõjuta alati maksa patoloogiliste protsesside arengu kiirust. Viiruse vedamise juhtumid näitavad, et isik ise ei pruugi hepatiit C-ga haige olla, kuid võib olla nakatumise allikas teistele inimestele. Lisaks võivad kandjad igal ajal haigestuda. Kui C-hepatiidi viirus aktiveerub, kui immuunsus väheneb, näiteks ägeda respiratoorse viirusnakkuse, gripi, raske stressi või hüpotermia korral.

    C-hepatiidi ülekandemeetodid

    Võite saada hepatiit C:

    • läbi vere. Infektsioon on võimalik saastunud vere üleviimise ajal vereoperatsioonide ja manipulatsioonide ajal, hambaravi, moolide ja tüükadest eemaldamine, kui vigu tehakse steriliseerimisvahendites;
    • ilutulestikes, täites tätoveeringuid, ilustamisvahendeid, trükitud maniküüri ja pediküüri, näopuhastus jne;
    • emalt lapsele sünnituse ajal (5%);
    • nakatunud isiku kaitsmata sugu ajal;
    • süstides narkootikume ühekordselt kasutatavate süstlakkudega;
    • esmaabi ajal viirusega nakatunud isikule, kui ta ei järgi ohutusmeetmeid

    Erinevalt teistest hepatiitest on hepatiit C ülekandemehhanismid seotud peamiselt verre. Kodused viis hepatiit C saamiseks on võimatu! Hüpofüütiline C-hepatiit ei pruugi kätte saada ega tavalisi (mitte-seksuaalse iseloomuga suudlusi) ja suhtlemist ega kodumajapidamistarbeid kasutada! Ärge võtke ainult C-hepatiidi all kannatava isiku maniküüri- ja raseerimisvahendeid! Esmakordse abi andmisel C-hepatiidi patsientide vigastuste korral peate alati kandma kindaid! Viirus sureb pärast paari minuti jooksul keetmist ja pärast pesemist temperatuuril 60 ° C - kolmkümmend minutit. Külmutamine ei tapa viirust. Viiruslik mõju viiruse UV-kiirgusele. 16 tunni pärast sureb viirus toatemperatuuril!

    PCR-diagnostika

    PCR on kõige levinum ja täpne meetod viiruse ja selle kvantitatiivsete võimete kindlaksmääramiseks. Meetod suudab tuvastada erinevaid viirusi ja diagnoosida vähetuntud haigusi.

    PCR (polümeraasi ahelreaktsioon) analüüs tehakse, võttes vere ja määrates viiruse RNA.

    Vereproovidele lisatakse spetsiifilised ensüümid ja määratakse spetsiaalses reaktoris. Seal on rakkude kloonimine.

    Esimene laht on jagatud kahte eksemplari, seejärel jagatakse iga eksemplar veel kaheks. Seega, pärast koopiate sünteesimist ilmuvad sadu DNA-rakke.

    DNA-d saab võrrelda igasuguste patogeenide kohta teabe andmebaasiga ja tuvastada infektsioon haiguse varajastes staadiumides.

    PCR meetodi eelised:

    • Paljud diagnostikameetodid viitavad ainult viiruse esinemisele, eraldades nakkuslike mikroorganismide jäätmed veres. PCR-meetod näitab otseselt infektsiooni tekitajat;
    • PCR-spetsiifilisus on see, et uuritavas vereproovis avastatakse unikaalne DNA fragment. See välistab võimaliku vale tulemuse;
    • PCR võib isegi tuvastada infektsiooni üksikuid rakke ja diagnoosida mitu patogeeni ühes vereproovis.

    Kvalitatiivne analüüs

    Aitab tuvastada viirust veres. Positiivse tulemusega peaksite jätkama uurimist ja viima kvantitatiivse analüüsi, mis määrab haiguse staadiumi, ja annavad arstidele võimaluse planeerida kõige soodsama ravi taktika. Selle analüüsi läbiviimisel oli ainult kaks järeldust:

    • "Tuvastatud". Näitab viiruse olemasolu veres. Sarnane tulemus loetakse positiivseks. Verega on juba avastatud viiruse RNA, mis on juba hakanud arenema, nakatades terved rakud ja nakatades maksa.
    • "Ei leitud." Ta ütleb, et vereproovis puudub C-hepatiidi RNA. Samuti on juhtumeid, et viiruse kontsentratsioon uuritavas proovis on tühine ja see ei kuulu testi tundlikkuse vahemikku. Väärib märkimist, et analüüs näitab infektsiooni kümnendal päeval pärast infektsiooni, mis võimaldab viirust määrata isegi enne selle märkimisväärset välist ilmingut.

    Kvantitatiivne analüüs

    Tuvastab viiruse geneetilise materjali kontsentratsiooni teatud koguses verd. See mitte ainult ei võimalda kindlaks teha haiguse tõsidust, vaid võimaldab teil näha haiguse täielikku kliinilist pilti (sh ravi ajal). Selle analüüsi tulemusel võib olla ainult kolm järeldust:

    Tulemuseks on "positiivne". Arvuline indikaator vastab viiruse koormusele. Viiruse kontsentratsioon määrab viiruse koguse 1 milliliitris, mis on võrdne 1 kuupsentimeetrilise veresega. Selle analüüsi mõõtühikud on IU / ml (rahvusvaheliselt tunnustatud ühikud milliliitri kohta). Kui viirusosakeste kontsentratsioon on väiksem kui 8x10 000 RÜ / ml, siis on ravi efektiivne, kui vastupidi, tasub ravi taktikat muuta.

    Kui viiruslik koormus esimese ravinädala jooksul langeb 60% -ni, siis on ravi efektiivsus suur. Madal tase on kuni 400 000 RÜ / ml ja kõrge on 1 000 000 RÜ / ml. Viiruslik koormus määrab haiguse ulatuse ja selle edasikandumise võimaluse. Viirusrakkude suur kontsentratsioon veres on haiguse vertikaalse või seksuaalse ülekandumise oht piisavalt suur.

    • Tulemus "Kehtetu". See tulemus tähendab, et kvalitatiivse analüüsi ajal leiti viirus organismist, kuid kvantitatiivne analüüs ei võimaldanud määrata selle kontsentratsiooni veres. See juhtub siis, kui viiruse RNA osakeste hulk veres on allpool avastamisvahemikku.
    • Tulemuseks on "Ei leitud." Dekodeerimise analüüs tähendab, et C-hepatiidi rakkude RNA puudumine vereproovis.

    CRP kvantitatiivne analüüs viiakse läbi haiguse kõigil etappidel. Optimaalsete ravianalüüside tuvastamine toimub õigeaegselt: (4., 12., 16. ja 24. nädal). Kui tulemused näitavad viiruse koormuse vähenemist, võib ravi pidada efektiivseks. Pärast ravi lõpetamist viiakse läbi kvantitatiivne analüüs, et tuvastada kordumist, see tähendab viiruse tuvastamist pärast selle aktiivsuse minimaalset vähendamist.

    01 HCV diagnoosi põhimõtted

    Hepatiit C seroloogiline diagnostika põhineb C-hepatiidi viiruse unikaalsete markerite tuvastamisel inimese plasmaproovides: antikehad HCV antigeenidele, mis kuuluvad klasside G ja M immunoglobuliinide hulka (anti-HCV-IgG ja anti-HCV-IgM) ning põhjustava agensi nukleiinhappe (RNA HCV).

    Meetodi põhimõte põhineb mitmesuguste bioloogiliste objektide konkreetsete DNA-de fragmentide (RNA) katsematerjalil, nende selektiivsel sünteesil ja nende fragmentide amplifitseerimisreaktsiooni toodete edasisel avastamisel.

    PCR-i kvantitatiivsed modifikatsioonid annavad idee HV-st, mis on oluline viirusliku hepatiit C ravi prognoosimiseks ja kontrollimiseks.

    02 Viiruse koormuse arvutamine viirushepatiit C korral

    Tavaliselt saab HCV RNA-d tuvastada esimesel nädala möödumisel nakkusest, kuni ilmneb HCV-vastane antikeha (anti-HCV), mida esimese 8-12 nädala jooksul ei leita. Mõlemad HCV infektsiooni markerid võivad erinevatel kombinatsioonidel veres tuvastada, mis nõuab nõuetekohast kliinilist tõlgendamist.

    Seetõttu on lõpliku diagnoosi moodustamiseks soovitav, et HCV-vastase ja HCV-RNA vastase vereproovi uuesti proovida, eriti kui tuvastatakse ainult üks kahest HCV markerist.

    Uuring viidi läbi HCV RNA koopiate arvutamise ja lugemise reaalajaline PCR-i abil.

    Kliinilises praktikas on PCR-i kõige täpsem diagnoosimismeetodiks REAL-TIME PCR, mis välistab proovide saastumise ja annab järelduse HCV RNA esinemise ja hulga kohta kaks nädalat pärast kavandatud infektsiooni. See meetod määrab muuhulgas viiruse genotüübi ühe viiruse koormusega. Katse kliiniline eripära on 100%. Tavaliste väärtuste standardvahemik on 15-100000000 IU / ml. Identifitseeritud viiruse 1-6 genotüübid (1, 2, 3, 4, 5, 6). Positiivse testi künnis, kui tuvastada viiruse RNA, on 15 RÜ / ml. PCR-i meetodi peamine eelis on analüüsi väga tundlikkus - kuni 1 eksemplari nakkusliku aine genoomse DNA-st PCR pandud modifitseerimisel uuritavas proovis.

    PCR on tänapäevane, väga tundlik meetod. Kuid selle eelis - kõrge tundlikkus - on samal ajal ka selle haavatavus, see tähendab, et see toob valesid tulemusi isegi siis, kui analüüsi teostavad hästi kvalifitseeritud spetsialistid hästi varustatud laborites. Erinevate laborite uuringutulemused sageli ei kattu, mis viitab vajadusele PCR-diagnostika diagnostika süsteemide standardiseerimiseks ja selle uuringu läbiviimisele suurema tähelepanu pööramiseks. Kõrge hind, analüüsi kestus, meetodi keerukus ja lahknevused eri laborites saadud tulemuste vahel piiravad PCR-i kasutamist laias praktikas.

    Uuringu tulemused väljastatakse tabelis oleval kujul, mis näitab viiruse RNA tuvastatava taseme (koopiate arv või kontsentratsioon IU / ml kohta). IU / ml väljendamiseks võib kasutada teisi matemaatilisi sümboleid, näiteks 1. 9 * 10 ^ 5 (1. 9 kuni 10 5 kraadi juures).

    03 näidustused uuringuks

    Peamised näited viiruskoormuse määramiseks viirushepatitis C on:

    • laboratoorselt kinnitatud patogeeni RNA kvalitatiivne olemasolu vereseerumis;
    • kas raviarstil on küsimusi viirusevastaste ravimite valimise kohta;
    • vajadus ravimi tõhususe täpseks hindamiseks.

    Uuring ei nõua patsiendi spetsiaalset ettevalmistamist.

    04 Tulemuste tõlgendamine

    Tavaliselt puudub tervislikel inimestel patogeen RNA, st BH on null. BH väljendatakse rahvusvahelistes ühikutes ml kohta. Eraldage suur BH (> 400 000 RÜ / ml) ja väike BH (100000000 RÜ / ml

    Viirusevastase ravi efektiivsuse jälgimiseks tuleks kasutada reaalajas PCR-analüüsi, mille minimaalne avastamisaste on 15 RÜ / ml. Et eristada madala BH ja kõrge, kasutatakse 500 000 RÜ / ml viiruslikku RNA-d.

    Viiruslike koormuste taset jälgitakse nii ägeda kui ka kroonilise C-hepatiidi puhul. Viiruse koormus registreeritakse ravi ajal, selle valmimisel ja 24 nädala jooksul pärast ravi alustamist.

    Rasedatel naistel on see näitaja diagnoosimiseks fikseeritud, sest viirusevastast ravi raseduse ajal ei tehta.

    Viirusliku koormuse taseme andmeid kasutatakse viirusevastase ravi valimiseks ja kontrollimiseks, kuid ei anna mingil juhul ettekujutust haiguse tulemustest, eriti normaalse maksafunktsiooniga HCV krooniliste vormide korral.

    Järelkontrolli ajal patsiendid läbivad kord aastas kvalitatiivse HCV RNA määramise veres. Kui kvalitatiivne tulemus on positiivne, tehakse viirusliku koormuse määramisel täiendav kvantitatiivne analüüs.

    05 Kokkuvõte

    Praeguseks on HCV diagnoosimiseks kasutatud erinevaid meetodeid, mille hulgas on viiruse koormuse kvantitatiivne loendamine patsiendi eduka ravi seisukohalt võtmetähtsusega. Selle meetodi eelised on suured usaldusväärsus, tundlikkus ja kliiniline spetsiifilisus. Lisaks viiruse koormuse tase on väga selge näitaja viirusevastaste ravimite efektiivsuse kohta nii monoteraapias kui ka kombinatsioonides.

    Kuid viirusliku koormuse alusel ei saa mingil juhul hinnata haiguse kulgu ja tulemust. Seetõttu on see näitaja informatiivne ravivabale arstile ainult koos teiste andmetega - fibrokananatsiooni ja biopsia tulemustega koos maksarakkude mikroskoopiaga. Seega viiruse koormuse taseme arvutamine mingil juhul ei asenda, vaid täiendab ainult olemasolevaid diagnoosimeetodeid, mida kasutatakse kliinilises praktikas.

    Viiruslike koormuste tase on kõige usaldusväärsem näitaja, mis võimaldab patsiendil usaldusväärselt tuvastada viiruse olemasolu ja jälgida ravi.


    Seotud Artiklid Hepatiit