Viirusliku hepatiidi B ja C määramine

Share Tweet Pin it

Jäta kommentaar 1,493

Hepatiit on rühm viirushaigustest, mis on peaaegu asümptomaatilised maksarakkudest. C-hepatiidi varajane diagnoosimine, mis on peidetud, võimaldab patoloogilise protsessi peatada. Hepatiit B ja C diagnoosimine on väga oluline taaskasutamise prognoosi kindlaksmääramiseks ja ravirežiimi valimiseks. Viiruste tuvastamiseks kasutage 2 meetodirühma: laboratoorne ja instrumentaalne. Kõige tõhusam on viirusliku hepatiidi laboratoorsed diagnoosid.

Miks on varajane diagnoos nii tähtis?

Infektsiooni esimesed sümptomid ei ole väljendunud ega ole spetsiifilised. Kui esialgsetes staadiumites esinev hepatiit B võib häirida kerget sümptomit põdeva patsiendi, siis vorm C ei avaldu kaua. Vahepeal hakkab viirus, samal ajal kehas, maksa hävitama aeglaselt. Paljud inimesed on haiguse kandjad, teadmata, et nad edastavad viiruse teistele.

Hepatiidi hilinenud diagnoos põhjustab haiguse ülemineku kroonilisele vormile või maksa, tsirroosi ja vähi pöördumatule kahjustusele.

Viiruse viiruse õigeaegseks märgistamiseks on tähtis perioodiliselt läbi viia teadusuuringuid inimestele, kellel on nakkusoht: HIV-positiivse staatuse inimesed, tervishoiutöötajad, patsiendid, kes saavad vereülekannet. Rasedate naiste puhul on vaja hepatiit C testida, et välistada lapse nakatumise võimalus.

Hepatiidi tunnused

B-hepatiidi etapid ja sümptomid

Viiruse hepatiit B areneb aeglaselt. Kokku on haiguse 4 faasi, millest sõltub sümptomite avaldumine. Taastumise prognoos on soodne, harvem muutub krooniliseks. Olukorra halvenemine on võimalik koos maksa samaaegse patoloogiaga, viiruste C, D samaaegne kaotamine. Kroonilisuse puudumine ravi puudumisel kestab umbes 10 aastat.

  • väsimus, isutus;
  • ehk veidi kehatemperatuuri tõus;
  • lihaste ja liigeste valu;
  • kibe maitse suus, iiveldus ja mõnikord oksendamine;
  • väljaheitehäired;
  • maks on laienenud ja valus;
  • igav valu kõhupiirkonnas;
  • tume uriin;
  • Cal värvitu.
  • naha ja silma sklerarea kollasus;
  • üldise seisundi halvenemine;
  • nahalööve.
  • kollasus ja sellega kaasnevad ilmingud kaovad järk-järgult;
  • isu taastatakse;
  • vereproovid normaliseeruvad.

C-hepatiidi vormid ja sümptomid

Haigus on ohtlik, sest see on sageli asümptomaatiline, isegi ägedas faasis, sümptomid kustutatakse. Enamik patsiente pöördub arstide poole, kellel on juba krooniline vorm. Inkubatsiooniperiood kestab 2 nädalat kuni 6 kuud. Sümptomid sõltuvad haiguse kulgu olemusest: äge või krooniline. Akuutne faas võib lõpuks taastuda või haigus muutub krooniliseks. Vasakpoolne ravim, tsirroos või primaarne maksavähk areneb mitme aasta jooksul.

Erinevalt B-hepatiidist on C-hepatiit 80-90% ulatuses muutunud krooniliseks, kuna see on varjatud, hilinenud avastamine ja ravi alustamine.

  • temperatuur veidi kõrgem;
  • suurte liigeste valu;
  • letargia ja nõrkus;
  • mõnikord oksendamine ja iiveldus;
  • raskustunne ja valu paremal hüpohondriumil;
  • uriini värv tumeneb järsult;
  • sklera kollaseks muutumine;
  • kerge kala
  • krooniline väsimus;
  • une tsükkel on häiritud;
  • raskustunne ja püsiv valu paremal hüpohoones;
  • väljaheidete ja uriini püsiv värvimuutus;
  • sagedane nina veritsus;
  • isutus häirimine, mõnikord ebaotstarbekas toiduga.

Uurimismeetodid hepatiit B ja C diagnoosimiseks

Uuringu eesmärk on tuvastada viirus, määrata selle liik, aktiivsus, maksarakkude kahjustus. Ainult uuringu tulemuste alusel tehakse lõplik diagnoos, valitakse ravimeetod, kasutatakse neid ka ravimeetodi efektiivsuse hindamiseks. Hepatiidi laboratoorsed diagnoosid viiakse läbi eri vere parameetrite uurimismeetodil.

Haiguse laboratoorsed diagnoosid

  • Ensüüm-seotud immunosorbentanalüüs (ELISA). Määrab konkreetsete antigeenide ja antikehade esinemise organismis. Antikehad tekitatakse 3-6 nädala möödumisel nakkusest ja pärast taastumist on veel pikk aeg. Tulemus näitab ainult viiruse võimalikku esinemist ja nõuab täiendavaid uuringuid. B-hepatiidi laboratoorsed diagnoosid on suunatud kolme tüüpi viiruse antigeeni tuvastamiseks: HBsAg, HBcAg, HBeAg. C-hepatiidiga avastatakse HCV-vastane antikeha.
  • Ekspresskatse. Antikehade tuvastamine veres toimub 15 minutiga. Katsetulemused ei ole nii täpsed kui ELISA, nii et positiivse tulemuse korral peaksite üksikasjaliku diagnoosiga nõu pidama arstiga. Kõige sagedamini viiakse läbi katseid, riskigruppide skriinimine nakkustesse ja patsientide esialgne diagnoosimine.
  • Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR). Määrab viiruse geneetiline kood ja osakeste arv 1 ml veres. Spetsiifiline ja kvalitatiivne diagnostiline meetod.
  • Vere biokeemia koos maksaensüümide (ALT, AST) määramisega. Nende ensüümide hulk vereringes on näitaja viiruse aktiivsusest ja põletiku intensiivsusest maksas.
  • Saplipigesta bilirubiini kontsentratsioon võimaldab teil hinnata maksa. Kui maksakude on kahjustatud, hakkab sapi osa verd sisenema ja bilirubiini kogus suureneb.
  • Valkude proovid.
  • Koagulogramm (vere hüübimise hindamine). Indikaatorid süvenevad protrombiini valgu koguse vähenemise tõttu.
  • Maksa biopsia. Maksakoe osakeste kogumine. See meetod võib määrata maksakoe struktuuri kahjustuse määra.
Tagasi sisukorra juurde

Hepatiidi diagnoosimise instrumenteeritud meetodid

Hepatiidi laboratoorset diagnoosimist täiendavad instrumentaalsed meetodid:

  • Fibroelastograafia. Seadme kasutamine (fibroskaana) määratakse kindlaks maksa tiheduse ja muutuste järgi kudedes. Meetod võimaldab jälgida haiguse dünaamikat ja ravi mõju.
  • Kõhuaunede ja maksa ultraheli. Maksa uurimine näitab ainult pindmisi muutusi. Ultraheli abil saate määrata keha kuju, suuruse ja asukoha.
Tagasi sisukorra juurde

Diferentsiaaldiagnostika analüüsid

Oluline on eristada B- ja C-hepatiidi tüüpe A, E, D. Diferentsiaaldiagnostikas kasutatakse laboratoorsed testid, mis tuvastavad viiruste geneetilised koodid ja spetsiifilised antigeenid. B- ja C-hepatiidi erinevused ilmnevad ka kliinilise pildi aspektides. Samuti on vajalik, et välistada hepatiit tekitas teiste patogeenide (tsütomegaloviirus, Epstein-Barr viirus, Toxoplasma), Sooleinfektsioonide toidumürgitus, sapikivitõbi ja kollatõbi nakkav olemus (tulenevalt ummistus sapijuha kivi sapikivitõbi või külluslik kasutamine karoteen-rikas tooted).

Viirusliku hepatiidi B ja C ravi

Patsiendid ägeda viirusliku hepatiidi vormiga tuleb saata nakkushaiguse paragrahvi. Raviprotseduuride kõrval on raviskeemi oluline aspekt. Arvestades haigusseisundi raskust, määratakse voodi või voodipesu. Hepatiidi ravi hõlmab järgmisi valdkondi:

  • Detoksifitseerimisravi. Keha toksiliste kahjustuste leevendamine. Intravenoosne manustamine: 5% glükoosilahus, "Hemodez". Kui sümptomid on väljendatud - glükokortikosteroidid ("prednisoon").
  • Immunomodulaatorid: interferoonid (sisaldavad proteiini, mis tekib viirusnakkuse ajal).
  • Viirusevastased ravimid: Cycloferon, Farmvir.
  • Antispasmoloogid. Sest kolestaas on eriti oluline (sapi väljaheite aeglustamine või peatumine). Kasutatakse "No-shpa" või "Spazmol."
  • Kolleretsed ravimid: magneesiumsulfaat, "Allohol".
  • Ensüümi preparaadid: "Mezim-forte".
  • Hepatoprotektorid: Karsil, Essentiale.
  • Vitamiinid: rühm B, kõige sagedamini B6 või B12, C, E.

Isegi kerge haiguse korral on harjutus piiratud. Toitlustamine 4-5 korda päevas, säästmine vastavalt dieedile nr 5 või 5a (raske seisund). Ägeda perioodi jooksul juua rohkelt vett. Võite kasutada mineraalvett, puuvilja- ja marjajäätmeid. Need haigused langevad üldjuhul haiglasse 20.-30. Haiguspäevast.

Hepatiidi diagnoosimine: diagnostilised meetodid ja analüüsid

Hepatiidi arstid kutsuvad esile põletikulise maksahaiguse. Hepatotsüütide põletikulist reaktsiooni võib käivitada viirused, regulaarne alkoholi kuritarvitamine, ravimid, mürgised ained; Autoimmuunne hepatiit eristatakse eraldi rühmas, mille etioloogia on tänapäeval ravimile tundmatu. Hepatiidi nakkusliku ja mitteinfektsioosse geneesiooni ravi lähenemisviis on põhimõtteliselt erinev, seetõttu on arstil väga oluline uurida "maksa" sümptomitega patsiendi uurimisel patoloogia põhjuseid. Kuidas seda teha, milliseid hepatiidi diagnoosimise meetodeid on olemas - me vaatame kaugemale.

Sümptomid, mis viitavad hepatiitile

Äge hepatiit enamikul juhtudel tekkida heleda kliiniline pilt: kollasuse naha, mürgitus, iiveldus, oksendamine, kõhuvalu, hellus, kõhulahtisus, palavik, nõrkus. Kroonilise hepatiidi korral on kõik erinevad - nad praktiliselt ei ilmu ennast, kuid maks on hävitatud. Sellised patsiendid on sageli kogemata teada oma haiguse (vaatluse käigus, mida saab teostada täielikult teinekord), või selle ajal kui esineb pikaajalisi mõjusid Põletiku - maksatsirroosi ja maksavähi. Teise variandi vältimiseks on soovitatav pöörata tähelepanu mitte järgmistele sümptomitele:

  • Igasugune ebamugavustunne maksa piirkonnas. See võib olla lõhkemistunne, kihelus ja raskustunne.
  • Puhitus on nõrk.
  • Sage iiveldus.
  • Ebamugav jume ja silmavalge (võivad mõnikord saada kollaka värvi).
  • Püsiv väsimus.
  • Halva isu.

Kui teil on mõni eespool nimetatud probleemidest, peate kindlasti võtma ühendust terapeudiga. Hepatiidi diagnoosi kinnitamiseks tuleb põhjalikult läbi vaadata, millest peamised on mitmesugused laboratoorsed uuringud. Kuid vähese infosisu tõttu on vähese tähtsusega abistavad uuringud, mis visualiseerivad maksa (ultraheli, CT-skaneerimine, MRI), mis annavad teavet ainult organi struktuurimuutuste kohta, kuid mitte haiguse põhjuste kohta.

Erinevat tüüpi hepatiidi diagnoosimise tunnused

Diagnoosimise käigus peab arst kõigepealt leidma, millist hepatiiti ta tegeleb, teiseks määravad, kuidas sügavad patoloogilised muutused maksas, milline on põletikulise protsessi aktiivsus ja kui palju elundite funktsiooni häiritakse.

Viirushepatiit

Hepatiidi viirused on nakkushaigused ja seetõttu kõige levinumad elanikkonna hulgas. Sellist hepatiiti on kaks rühma:

  • need, mis kuuluvad "mustade kätehaiguste" hulka - A, E;
  • vere või muude kehavedelike kaudu seksuaalvahekorra ajal, meditsiinilised ja kosmeetilised manipulatsioonid saastunud vahenditega, vereülekanded - B, C, D, G.

Laboratoorsed meetodid viirusliku hepatiidi põhjustava aine identifitseerimiseks:

  • ensüümi immuunanalüüs viiruse antigeenide ja nende antikehade jaoks;
  • vereanalüüs viirusliku geneetilise materjali (DNA, RNA) tuvastamiseks PCR abil.

Hindamaks aktiivsuse astme hävitamine hepatotsüütides ja maksafunktsiooni teostati põhjalik biokeemiliste vereanalüüsil, milles määratakse kontsentratsioon ALT, AST, aluseline fosfataas (ensüüm, jättes veri hävitamise hepatotsüütides), fraktsioonid bilirubiin (vahetuse ainete tihedalt seotud maksa) valgu fraktsioonid (paljud proteiinid sünteesitakse maksas). Selles analüüsis on veel üks nimi - maksakatsed.

Kroonilise viirusliku hepatiidi korral on patsiendi uuringu oluliseks komponendiks põletikulise protsessi struktuursete muutuste ja aktiivsuse hindamine maksa koes. Selleks kasutatakse järgmisi meetodeid:

  • Elundi biopsia, millele järgneb võetud materjali morfoloogiline analüüs.
  • Elastomeedium on kiibilise degeneratsiooni taseme määramine (normaalse maksakoe asendamine funktsionaalselt vastuoluliste kiudarakkudega), kasutades Fibroscan seadet. See uuring sarnaneb ultraheliuuringuga.
  • FibroTest on kaasaegne mitteinvasiivne meetod fibroosi ja põletikuliste muutuste diagnoosimiseks maksas, mis põhineb 6 biokeemilise markeri kontsentratsiooni määramisel. Selle meetodi näideteks on viirusliku hepatiidi B ja C krooniline liikumine.

Autoimmuunne hepatiit

Sellise hepatiidi korral on põletikulise protsessi süüdlane oma immuunsuskaitsesüsteem - see ründab hepatotsüüte, nagu näiteks võõrrakud. Sageli esineb see haigus inimestel, kes põevad teisi autoimmuunpatoloogiaid - reumatoidartriiti, erütematoosluupasid, Crohni tõbe jne

On tavaks eristada kahte tüüpi autoimmuunse hepatiidi. Igal haiguste tüübil on oma laborimarkerid, mis määratakse kindlaks vereanalüüside käigus:

  • 1. tüüp - antinukleaarsed antikehad (ANA) ja silelihaste antikehad (ASMA);
  • Tüüp 2 - maksa ja neeru mikrosoomide antikehad (anti-LKM), maksa tsütosoolse antigeeni antikehad (Anti-LC-1).

Neid markereid saab tuvastada ka teistes patoloogiates, seega on autoimmuunse hepatiidi diagnoosimise "kuldstandard" lõpuks maksa punktsioonibiopsia. See uuring võimaldab meil kaaluda maksa koe morfoloogilist struktuuri ja määrata suure täpsusega põletikulise protsessi autoimmuunse olemuse, lisaks sellele teha kindlaks fibroosi iseloomulikud muutused. Maksa funktsionaalse elujõulisuse hindamiseks viiakse läbi täiendavad maksatalitluse testid.

Toksiline hepatiit

Paljud kemikaalid kahjustavad maksarakke - nende toimet nimetatakse hepatotoksilisemaks. Alkoholi võib põhjustada mürgise hepatiidi tekkimine (see ei ole nii palju annust, mis määrab, kuidas seda süstemaatiliselt kasutada), ravimid, looduslikud ja tööstuslikud mürgid. Kõige hepatotoksilist ravimitel on antibiootikumid, tuberkuloosiravimitega, sulfoonamiidide krambivastaste ja antineoplastilised ained, millest paljud antipüreetikum ja valuvaigistavad ravimid.

Mürgise hepatiidi diagnoosimisel on väga olulised anamneesilised andmed, st ohtlike ainete kasutamise kindlaksmääramine. Kuid laboratoorseid analüüse ei tehta mitte ainult maksa põletikulise reaktsiooni põhjuste väljaselgitamiseks, vaid ka elundite düsfunktsiooni määra kindlaksmääramiseks.

Viirusliku hepatiidi testid

Kuna kõige sagedamini avastatakse viirushepatiit, tuleb nende diagnoosi üksikasjalikumalt kaaluda. Viirusliku hepatiidi põhjustava toimeaine identifitseerimise kõige informatiivsemaks peetakse konkreetsete markerite vereanalüüsi. Neid näitajaid saab kasutada, et hinnata viiruse tüüpi ja haiguse kestust (haiguse arenguetapp).

Hepatiit A

Viiruse hepatiit A diagnoositakse viiruse antigeeni antikehadega (immunoglobuliinid). M klassi immunoglobuliinide avastamine on äge protsess. Kui klassi G immunoglobuliinid "läbivad katuse" veres, on kõige tõenäolisemalt alustanud taastumist (taastumine). A-hepatiidi viiruse RNA avastamist praktiliselt ei kasutata rutiinses diagnostikas.

B-hepatiit

B-hepatiitil on veel palju markereid:

  • HBsAg (pinna või Austraalia antigeen) - esineb kõigepealt patsientide veres.
  • HBeAg on aktiivse viiruse reproduktsiooni marker.
  • Teise klassi viiruse antigeeni antikehad.
  • PCR-iga tuvastatud viiruse DNA (kroonilise B-hepatiidi diagnoosimisel on oluline mitte ainult tuvastada viiruse DNA olemasolu veres, vaid ka selle kogus - nn viiruskoormus).

Sõltuvalt teatud markerite esinemisest võib arst kindlaks teha, kas hepatiit on äge või krooniline. Kui põletikuline protsess on äge, on võimalik selgitada haiguse perioodi: inkubatsioon, äge periood või taastumine. Hepatiidi kroonilisel kujul võivad markerid eristada replikatsiooni (kui viirus paljuneb) ja tervisliku seisundi integreerivat (kui viirus neelab) faase. See teave on raviplaani koostamisel ja patsiendi nakkushaiguse määra kindlaksmääramisel väga oluline.

C-hepatiit

Hepatiidi C diagnoos põhineb järgmisel:

  • Seroloogiliste markerite tuvastamine veres - antikehad viiruse antigeenidele.
  • Tuvastage viirus ise (selle RNA-d PCR-ga).
  • Viiruse genotüübi kindlakstegemine. See uuring on vajalik ennetamaks viirusevastase ravi tõhusust ja hinnata haiguse tõsiste tagajärgede (hepatokartsinoom, tsirroos) tekkimise ohtu.

Hepatiit D

Viiruse hepatiidi D peamine veremarker on viiruse RNA. See viirus ei saa parasiitida iseenesest, kuna sellel ei ole kest, selle pidev kaaslane on B-hepatiidi viirus. Sellega seoses tuleb B-hepatiidi patsientidel uurida hepatiidi D suhtes. Selle avastamist peetakse ebasoodsaks prognostiliseks märgiks.

E-hepatiit

Selle hepatiidi diagnoosimiseks patsiendi veres määratakse G ja M klassi antikehade kontsentratsioon viirusele E. Selle haiguse ägedas faasis on alati olemas immunoglobuliinid M, kuid immunoglobuliinid G ilmuvad pärast haiguse lahendamist.

Hepatiit G

Viiruse hepatiit G on tihtipeale kombineeritud viirusliku hepatiit C-ga, nii et kui viimane leitakse, viib patsient lisaks:

  • viiruse G RNA vereanalüüs;
  • viiruse G antigeenide antikehade seroloogilised testid

Kuidas arst määrab kindlaks, milline analüüs on patsiendile edastamiseks vajalik

Esmapilgul võib see näidata, et hepatiidi diagnoosimine on väga keeruline protsess. Tegelikult on kogenud hepatoloogid (maksahaiguste spetsialistid) tõestatud toimemehhanism, kui nad avastavad patsiendi maksa patoloogia tunnuseid.

Esimesel etapil kogub arst teavet, mis võib hepatiidi põhjuseid valgustada:

  • patsiendi suhtumine alkoholi, ravimitesse;
  • kontaktid inimestega, kes on haige või kellel on viirushepatiit;
  • edasi lükatud haigused;
  • ravi saanud jne

Järgmine etapp on maksa funktsionaalsete omaduste hindamine, kasutades biokeemilist vereanalüüsi. Kui maksakatsetes esineb kõrvalekaldeid, viiakse läbi viiruslike hepatiidi markerite seroloogilised testid (kolme põhipunkti alguses A, B, C) - see on kolmas etapp. Seroloogilise uuringu negatiivse tulemusega jätab pikenenud maksakontroll jätkuvalt välja autoimmuunprotsessi. Kui hepatiidi viirushaigus on kinnitatud, määratakse õige ravistrateegia valimiseks täiendavad testid ja instrumentaaluuringud.

Kaasaegsed laborikeskused pakuvad hepatiidi diagnoosimise paketti. Selline uuring on soovitav korrapäraselt inimestele, kellel on suur risk viirusliku hepatiidi leevendamiseks, näiteks need, kellel transfekteeritakse verd või hemodialüüsi.

Pidage meeles! Viirusliku ja mitteinfektsioosse hepatiidi õigeaegse avastamise korral on haiguse täielik taastumine või maksimaalne stabiliseerumine väga kõrge.

Olga Zubkova, meditsiiniline ekspert, epidemioloog

B-hepatiidi diagnoosimise meetodid

Viiruse hepatiit B (b) on üks levinumaid nakkushaigusi maksas. Venemaal on selle viirusega igal aastal umbes 50 tuhat inimest ja praegu on krooniliste infektsioonidega inimesi umbes kolm miljonit inimest.

Enamikul juhtudel puutub täiskasvanu immuunsüsteem HBV-ga üksinda. 10% juhtudest toimub infektsioon raskekujuliste sümptomiteta, ent voolab kroonilises staadiumis. Ligikaudu pooled asümptomaatilistest haigusjuhtudest langevad umbes veerandi võrra suuremad sümptomid. HBV sümptomaatilise pildi välise sarnasuse tõttu teiste hepatoviiruse tüüpidega on hepatiit B diagnoos terapeutiliste skeemide valimisel väga oluline.

B-hepatiidi erinevus teistest liikidest

Nagu iga teine ​​hepatiit, mõjutab HBV viirus enamikult maksa.

See raskendab terapeutiliste ainete valimist, sest antud juhul interferoonid kiirendavad ainult autoimmuunse tsütolüüsi. HBV ja teiste haiguste vahel esineb mõningaid erinevusi.

  1. Tõsist HBV ägeda vormi iseloomustab kiire, sümptomaatiliste sümptomitega areng peaaegu kohe pärast infektsiooni. Fulminantne (fulminantne) haigus toob kiiresti kaasa kooma ja surma, kuid sellised juhtumid õnneks on haruldased.
  2. Kui vastsündinu on nakatunud hepatiit B-ga, võite olla kindel, et haigus muutub krooniliseks.
  3. Täiskasvanutel, vastupidi, 90% juhtudest võib infektsioon olla täielikult lokaalne.
  4. Kui haigus on pikka aega asümptomaatiline, lõpeb see tavaliselt kroonilises vormis.
  5. Krooniline HBV on kõige sagedasem tsirroosi ja hepatotsellulaarse kartsinoomi (vähk) põhjus.
  6. HBV viirust peetakse üheks nakkuslikuks, kuna sellel on erakordne keskkonnas vastupidavus.
  7. HBV viiruse sarnasuse tõttu on B-hepatiidi vaktsineerimine erinevalt HCV-st olemas.

B-hepatiidi diagnoosimine

Praegu kasutatakse riigisiseses meditsiinis mitmeid hepatiidi B määramiseks olulisi laboratoorseid meetodeid. HBV diagnoos sisaldab:

  • HBV viiruse antikehade (anti-HBV) antikehade esinemise kindlakstegemiseks veres, mis praegu peetakse kõige usaldusväärsemaks, kiiremaks ja odavamaks, ensüümseotud immunosorbentanalüüs (ELISA);
  • viiruse DNA olemasolu vereanalüüs, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR), mille tulemused võivad kindlaks teha viiruse olemasolu ja aktiivsuse (viiruse koormus);
  • vere biokeemiline analüüs bilirubiini, alkaalse fosfataasi, maksaensüümide (ALT ja AST) tasemel, mis võimaldab hinnata põletikulise protsessi esinemist maksas.

On selge, et arst edastab nendele testidele viite, kui patsiendi seisundi sümptomaatiline pilt ja tema ajaloo uuring viitavad HBV-nakkuse ideele või kroonilise protsessi seisundi jälgimisele.

Täiendavad diagnostikameetodid

Alles hiljuti peeti elundi biopsia kõige usaldusväärsemaks patoloogiliste muutuste määra kindlaksmääramiseks maksas. See on uuring spetsiifilise nõelaga perkutaanselt ekstraheeritud maksa fragmendi kohta.

Protseduur viiakse läbi kohaliku anesteesia abil ja põhjustab harva komplikatsioone, kuigi see viitab kirurgilistele sekkumistele.

Täna on palju kaasaegseid ja vähem traumeerivaid viise:

Viimased 2 testid põhinevad vereproovil mitmel indikaatoril, kasutades spetsiifilisi algoritme. Ja fibroelastograafia võimaldab määrata maksa parenhüümi tihedust, kasutades ultraheliga sarnast meetodit.

Kas B-hepatiidi diagnoos on vale?

B-hepatiidi diagnoosimine võib olla vale mitmete põhjuste tõttu:

  • bioloogilise materjali saastumine;
  • analüüsisüsteemi vead;
  • labori vigu.

Viimane kahjuks esineb väga sageli. Seetõttu ei ole piisav B-hepatiidi diagnoosimiseks tehtud ühekordse vereannetuse saamine.

Välismõju välistamiseks uuringu tulemuste põhjal tuleks analüüsi eelõhtul järgida järgmisi reegleid:

  1. Ärge sööge 12 tundi enne vere annetamist.
  2. Lõpeta suitsetamine poole tunni jooksul enne uuringut.
  3. Pool tundi enne testi katkes hoidumist liigse emotsionaalse ja füüsilise stressi eest.

Kasulik video

Millised testid peate hepatiidi diagnoosimiseks läbima, vaadake seda videot:

B-hepatiidi ja hepatiit C. diagnoosimine

Hepatiit on maksa põletikuliste protsesside üldnimetus. Kõige sagedamini põhjustavad hepatiit B ja C-hepatiidi viirused hepatiiti. Üks võib nakatuda huulte, tätoveeringute, maniküüride või intravenoossete ravimite läbiviimisel. On suur nakkusoht hambaarstil, operatsiooni ajal, vereülekanne. B-hepatiit levib raseduse ajal sugulisel teel ja emalt lapsele (risk on ligikaudu 30-40%). C-hepatiidi korral on see edastamise viis vähe tähtsust.

Viirusliku hepatiit B ja hepatiit C sümptomid on sarnased.

Kliiniline pilt on ägedate ja krooniliste vormide puhul erinev.

Äge viiruslik hepatiit on maksakudede põletikuline protsess, mis on põhjustatud hiljutisest (vähem kui 6 kuu vanusest) infektsioonist. Krooniline viirushepatiit on põletikuline-düstroofiline maksakahjustus, mille mõõdukas fibroos on pikem kui 6 kuud.

Viirusliku hepatiidi sümptomid on põhjustatud joobeseisundist maksa- ja kolestaasikahjustuse (sapi väljavoolu rikkumine) tõttu. Esiteks on tserebrotoksiline toime, mis põhjustab suurenenud väsimust, unehäireid (kerge ägedas hepatiidi ja kroonilise hepatiidi korral).

Akuutse haiguse korral algne periood kestab umbes 2-3 nädalat. Sellega kaasneb liigesevalu, nõrkus, seedehäired (iiveldus, oksendamine, isutus), palavik, eriti sageli viirusliku hepatiit B-ga. Kolestaas põhjustatud kollatõbi on iseloomulik ka B-hepatiidi suhtes. See muudab uriini värvi (tumedamaks) ja väljaheiteid (kergemini ) Sageli on äge vorm tavaliselt asümptomaatiline, eriti hepatiit C.
Akuutne viirushepatiit B lõpeb 80% -l juhtudest taastumisest ja muutub 20% krooniliseks. C-hepatiidi korral areneb krooniline haigus umbes 90% -l täiskasvanud patsientidest ja 20% -l lastest. Krooniline vorm on kõige ohtlikum, sest see muutub sageli maksa tsirroosiks.

Ravitamata patsientidel võib vaimu depressioon ja väsimus olla kroonilise viirusliku hepatiidi ainsad ilmingud isegi enne diagnoosi tegemist. Kroonilise hepatiidi, millega on kaasnenud ulatuslik fibroos ja tsirroos, hilisemates staadiumides esile tuleb esile portaal-hüpertensiooni sündroom, mis on eluohtlik vedeliku kogunemise tõttu kõhuõõnes (astsiit) ja võimalik sisemine verejooks.

Hepatiidi iseloomulike sümptomite esmakordse ilmnemise korral on vaja läbi viia B (B) ja C-hepatiidi viiruste diagnostiline uuring. Arvestades asjaolu, et haiguse asümptomaatiline suund on võimalik, samuti nakkuse leevendamine, tuleb hepatiidi viiruseid testida regulaarselt ja viirusliku hepatiidi B inokuleerimine.

Viirusliku hepatiidi B ja C laboratoorsed diagnoosid

Laboratoorsete uuringute tulemused omavad tähtsat, kuid mitte juhtivat rolli viirusliku hepatiidi diagnoosimise ja selle etioloogia kindlakstegemisel.

Biokeemiline vereanalüüs

Patsientide vere biokeemiline analüüs on juba ammu kliiniliste laboratooriumide praktika alustanud. Bilirubiini, vadakuvalkude ja ensüümide vahetuste näitajate kogutud andmed võimaldavad tuvastada inimkehas esinevaid põletikulisi protsesse ja soovitavad nende lokaliseerimist. Need kriteeriumid ei ole spetsiifilised ja ei iseloomusta viirusliku hepatiidi etioloogiat, kuid on siiski olulised maksa funktsionaalse seisundi hindamiseks.

Bilirubiini vahetusindikaatorid.

Patsient saab hinnata bilirubiini metabolismi seisundit vere, uriini ja rooja biokeemilise analüüsi põhjal. Vaba bilirubiin on hemoglobiini derivaat, mis vabaneb punavereliblede hemolüüsi ajal. Füsioloogilistes tingimustes hemoleeritakse iga päev ligikaudu 1% tsirkuleerivatest erütrotsüütidest, mis moodustavad 200-250 mg bilirubiini. Bilirubiini peamine osa siseneb põrna ja luuüdi mononukleaarsete fagotsüütide süsteemi rakkudesse. Bilirubiin vees ei lahustu, mistõttu liigub veres mittespetsiifilised transportvalgud, albumiin. Vaba bilirubiin on toksiline ühend, mis on võimeline tungima hematoentsefaalbarjääri, põhjustades entsefalopaatiat. Bilirubiini detoksikatsioon toimub maksarakkudes, kus glükuroonhape on sellega seotud, moodustades bilirubiini glükuroniidid. Need ühendid ei ole enam mürgised ja vees lahustuvad, mis hõlbustab nende eemaldamist keha osana sapist. Soolestikus moodustuvad bakteriaalsete ensüümide toimel kaks bilirubiini lagunemisprodukti rühma - urobilinogeene ja sterkobinogeene, millest enamik eritub väljaheites. Normaalsetel füsioloogilistel tingimustel ei kaasne bilirubiini eemaldamisega neerud.
Bilirubiini tervetel inimverd sisaldub kontsentratsioonis 1,7-17,1 mmol / l ning sisaldab kahe fraktsiooni: lahustumatu bilirubiini seotud albumiiniga - kaudse bilirubiini ja lahustuva glucuronide bilirubiini - otsene bilirubiini. Tavaliselt on nende suhe 3: 1.
Hepatiidi korral kahjustatakse maksarakke ja selle tulemusena väheneb sapi tootmine. Lisaks põhjustab maksa parenhüümi kahjustuse tagajärg mitte ainult sapiteede kanalit, vaid ka verd. Need protsessid põhjustavad mõlema selle fraktsiooni mõlema vere bilirubiini koguhulka. Tuleb märkida, et lõpus predzheltushnogo perioodi mõnedel patsientidel on tavalise kogubilirubiini hakkab kasvama murdosa otsest bilirubiini, mis on varajane näitajaks tsütolüüsida protsesse maksas. Uriinis hakatakse tuvastama bilirubiini ja urobiliini ning sterkobiini kontsentratsioon käärhoonetes väheneb järsult (tabel 1).
Tabel 1. Bilirubiini metabolismi suhe normaalse ja maksa-kollasuse tekkes.

Seerumi bilirubiini üldsisaldus

1,7 - 17,1 umol / l

Otseseerumi bilirubiin

Kaudne seerumi bilirubiin

Uriini reaktsioon bilirubiinile ja urobiliinile

Erektsioonide reaktsioon sterkobiliinile

Tuleb märkida, et bilirubiini metabolismi indikaatorid viirusliku hepatiidi diagnoosimiseks mängivad rolli ainult kollatõve kujunemisel. Enamik viirusliku hepatiidi anikterilist vormi ja preiterterfaasi on enamasti tunnustamata.

Ensüümi aktiivsuse hindamine.

Määramine seerumis aminotransferaas aktiivsust ((ALAT) ja aspartaadi aminotransferaas (AST)) on väga tundlik näitaja Tsütolüüsi hepatotsüütide mis määrab juhtiv roll diagnoosimisel hepatiit erinevate etioloogiate. Tsütolüütilises protsessis, mis areneb viirusliku hepatiidiga patsiendi maksas, valitseb ALT "loputus", AST suurenemine on oluliselt väiksem (tabel 2).

Tabel 2. Ensüümi aktiivsuse kindlaksmääramine seerumis

Hepatiidi väärtused

Hepatotsüütide spetsiifilisus

Leeliseline fosfataas (SHF)

31-115 U / l lapsed: kuni 350 U / l

* väärtused on antud vastavalt KDL NPF "Liteh" poolt kasutatavate diagnostiliste testimissüsteemide soovitustele

Täiendava kinnituse gepatogennoy milline ensüümi aktiivsust saab määrata pechenochnospetsificheskih ensüümid -. Sorbitooldehüdrogenaasi, fruktoos-1-fosfataldolazy urokinaasi jne Nad paiknevad peamiselt hepatotsüüdides ja nende avastamine veres on unikaalselt seotud maksahaigus. Kuid need testid on tundlikumad ALT aktiivsuse määramise suhtes. ALAT ja AST aktiivsus peegeldab maksa põletiku raskust, kuid mitte hepatiidi etioloogiat.

Valkude proovid

Ägeda viirusliku hepatiidi korral jääb vereplasma proteiinisisaldus ja nende koostis peaaegu muutumatuks. Erandiks on tümooli test, mille väärtused on tavaliselt kuni 4 U ja tõusevad hepatiitini 6-8 RÜ-ni.

Kui CG staadiumis CP-l võib tekkida vereserumi albumiini kontsentratsiooni vähenemine, protrombiiniindeksi vähenemine (alla 70%), hepatotsellulaarse puudulikkuse sündroomi teistel hüübimisfaktorite kontsentratsiooni langus. Hepatiidi aktiivsuse lisanäitajad on kiirendatud ESR (~ 15 mm / h), gamma-globuliini kontsentratsiooni suurenemine seerumis.

Viirusliku hepatiidi seroloogiliste markerite tuvastamine

Hepatiidi viiruslikku olemust on võimalik kindlaks teha ja teavet selle etioloogia kohta saada ainult hepatiidi viiruste seroloogiliste markerite abil. Sellised markerid hõlmavad viiruse valke (antigeene), spetsiifilisi antikehi, mida organism toodab infektsiooni korral, ja viiruse nukleiinhappeid (DNA või RNA), mis esindavad selle genoomi.

Spetsiifiliste viiruslike või bakteriaalsete valkude (antigeenid) või antikehade tuvastamiseks peremeesorganismis ühe või teise patogeeni manulusel bioloogilistes kudedes ja vedelikes viidatakse immunoloogilistele laboratoorsete analüüside meetoditele. Viimastel aastakümnetel on immunoloogilised uurimismeetodid laialt levinud. Selle põhjuseks oli immunoloogia ja biotehnoloogia tihe liitmine, mis võimaldas välja töötada ja praktikas rakendada mitmesuguseid testimissüsteeme, mis põhinevad antigeeni antikeha vastastiktoimel. Viiruse hepatiidi puhul viitab ELISA kaudsetele patogeeni tuvastamise meetoditele, võimaldades tuvastada haiguse etioloogiat.

Suhteliselt hiljuti on kliiniliste diagnostiliste laborite praktikasse sisse viidud geniandiagnostika meetodid, mis võimaldavad geenide või mõttetute DNA ja / või RNA järjestuste avastamist ja iseloomustamist. Nende areng tuleneb polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) põhimõtte arendamisest 1983. aastal. Esimesed aruanded PCR-i praktilise rakendamise kohta ilmusid 1985. aastal ja sellest ajast peale on väljaannete arv, kus PCR-i kasutatakse üheks uurimismeetodiks, on üks maailma teadus-kirjanduse esimesi kohti. Need lähenemisviisid on rakendatavad nakkushaiguste genoomide avastamiseks ja uurimiseks, onkoloogiliste haiguste markerite avastamiseks, erinevate geneetiliste muutuste tuvastamiseks inimese genoomis, mis on seotud erinevate funktsionaalsete häiretega. Erinevalt ELISA-st viitab PCR-analüüs otsesetele meetoditele patogeeni avastamiseks kliinilises materjalis, mis võimaldab hinnata viiruseprotsessi aktiivsust ja tuvastada patogeeni levikut erinevates elundites ja kudedes.

Viirusliku hepatiidi B serodiagnostika

Hepatiit B viirus (hepatiit B viirus, HBV) kuulub Hepadnoviridae perekonda. Viiruse genoomi esindab osaliselt kahekordne 3200 bp suurune ümmargune DNA molekul. Valgusmikroskoobi all näeb HBV välja nurga all oleva osakese läbimõõduga 42 nm (Dane'i osake), mis koosneb tuumast - nukleoonist, mis on kujutatud iososedriga diameetriga 28 nm, mille sees on kaheahelaline DNA, terminaalne valk ja DNA polümeraasi ensüüm. Nukleoidvalk sisaldab HBcAg ja HBeAg. Väliskest (7 nm paksune) moodustab HBV pinnaantigeen - HBsAg (joonis 2, 3). B-hepatiidi viirus on pseudoretroviirus, s.t. selle DNA võib osaliselt sisestada hepatotsüütide genoomi.

Joon. 2. HBV virioni struktuuri skeem ja pinnaantigeeni komponendid. Pinna valgu (HBsAg) liigne tootmine põhjustab selle esinemise patsiendi seerumis vabas vormis.

Joon. 3. Daniini osakesed patsiendi seerumis (valguse mikroskoopia)

AVH-iga ja kroonilise hepatiidi ägenemise korral võib patsiendi hepatotsüütides ja seerumis avastada viirusosakesed. Kroonilise hepatiit B integratiivse vormi ja remissiooni staadiumis HBV seerumis ei tuvastata.

HBV infektsiooni labori diagnoosimise aluseks on viiruse nakkuse seroloogiliste markerite määramine: HBsAg, HBeAg, anti-HBc klass IgM ja IgG, anti-HBe ja anti-HBs, HBV DNA ja viiruse DNA polümeraasi aktiivsus. Sõltuvalt viirushepatiidi B käigust tundub seroloogiliste markerite muutuste spekter teistsugune (joonis 4, 5)

Joon. 4. Akuutse hepatiit B seroloogiliste markerite muutuste spekter eraldusjärgus

Joonis 5. Seroloogiliste markerite muutuste spekter kroonilise B-hepatiidi korral

HBsAg on HBV nakkuse peamine marker. Ägeda viiruse B korral (90-80%) võib HBsAg-i tuvastada inkubatsiooniperioodil, alates infektsiooni 3-5-ndast nädalast. Antigeenide tsirkulatsiooni keskmine kestus on 70-80 päeva. HBsAg kiire kadumine (kollatõbi esimestel päevadel) antiBB-de ilmnemisega on halb prognostiline märk. Kroonilises B-hepatiidis võib HBsAg tsirkuleerida patsiendi veres paljude aastate jooksul. Tuleb märkida, et praegu kasutatavatel meetoditel HBsAg, sealhulgas ELISA määramiseks, on tundlikkuse piirväärtus. Seepärast on hepatiidi kliiniliste tunnuste ja HBsAg puudumise korral seerumis vaja uurida teisi HBV infektsiooni markereid. HBsAg esinemine veres viitab viiruse esinemisele maksas ja on väga tõenäoline veres. Mitte iga HBsAg sisaldav seerum ei sisalda B-hepatiidi viirust. Mõnel juhul ei sisalda viiruse DNA täielikult hepatotsüütide DNA-d, vaid osaliselt ainult HBsAg-i sünteesi kodeerivat piirkonda. Neil juhtudel sünteesitakse HBsAg ilma virioni teiste komponentideta (st ilma teiste antigeenita). Arvatakse, et selline olukord tekib siis, kui "tervislik" kandja HBsAg.

B-hepatiidi viiruse HBeAg iseloomustab kõrge vere nakkavust, mis on HBV aktiivse replikatsiooni indikaator. HBeAg tsirkuleerub patsiendi veres ainult HBsAg manulusel. Kõhulihase perioodi esimesel nädalal tuvastatakse see 85-95% patsientidest. HBeAg detekteerimine kaheks kuuks või kauemaks on prognostiline märk kroonilise hepatiidi tekkest. Enamikul kroonilise hepatiidiga patsientidel, kellel on kõrge aktiivsus HBeAg-protsessis, püsib see pikka aega (kuni mitu aastat).

B-hepatiidi viiruse klassi M (anti-HBc IgM) nukleaarse antigeeni antikehad - HBV aktiivse replikatsiooni marker ja äge infektsioon. Tuvastati 1-2 nädalat pärast HBsAg avastamist ja püsib 2-18 kuud. Ägeda hepatiidi B patsientidel on 4-20% -l HBc-vastane IgM-i ainus infektsiooni marker. Kroonilise B-hepatiidiga patsientidel võib mõne vähese tiitrusega patsiendil avastada HBc-IgM-i kui akuutse infektsiooni ajal, kusjuures antikehade tiiter peegeldab hepatiidi raskust.

HBcAg klassi G (anti-HBc IgG) antikehad ilmnevad peaaegu samaaegselt anti-HBc IgM-iga. Reeglina jäävad nad kõikideks isikuteks, kellel on elu jooksul B-hepatiit. HBsAg-vastane antikeha levib 95% HBsAg kandjatest koos HBsAg-ga.

HBsAg-vastased antikehad (anti-HB-d) viitavad eelmisele infektsioonile või vaktsineerimisjärgsele immuunsusele (kaitse tase - 10 RÜ / ml). Need ilmnevad taastumisperioodil, 4 nädalat pärast HBsAg kadumist, saavutades maksimaalse kontsentratsiooni 1-2 aasta jooksul, millele järgneb ajakohane diagnostiliste meetodite abil avastamiseks ligipääsmatu taseme järkjärguline vähenemine. Mõnedel juhtudel võivad anti-HB-d elada kogu aeg. Hepatiit B-ga patsientide kliinilise paranemise taustal on anti-HB-de esinemine hea prognostiline märk. On oluline märkida, et ägeda HBV infektsiooni dünaamikas on "aken", kui HBsAg ei ole enam määratletud ja anti-HB-sid pole veel ilmnenud. Samal ajal tuvastatakse anti-HBc IgM ja IgG. Sellest järeldub, et on vaja uurida AVH-i patsiente anti-HBc-IgM-i suhtes isegi HBsAg ja anti-HBs-uuringu negatiivsete tulemustega.

HBeAg-vastased antikehad (anti-HBe) ilmuvad veres pärast HBeAg eliminatsiooni ja viiruse replikatsiooni viimist. B-hepatiidi ägeda perioodi 9. nädala lõpuks on enam kui 90% -l patsientidest anti-HBe. Taastumisaja jooksul võib anti-HBe kaob. Kuid anti-HBe olemasolu ei viita konkreetse seerumi nakkavuse puudumisele. On näidatud, et paljudel B-hepatiidi (umbes 10%) arengus esinevatel patsientidel esineb viiruse "immuunrõhu" all mutantvormid, mis "vältida" immuunsüsteemi ja ei ole kõrvaldatud. HB-vastase antikeha rakkudest eraldati mutant, mis ei suutnud toota HBeAg-i defektide tõttu eelregiooni piires ja mida nimetati HBeAg-negatiivseks. HBeAg-negatiivse mutandi välimus põhjustab maksakahjustuse progresseerumist viiruse replikatsiooni jätkamisega (HBV DNA olemasolu seerumis). HBeAg-negatiivse mutandi esmane nakkus suurendab oluliselt fulmitava hepatiidi riski.

Kirjeldatud hepatiit B markereid kontrollitakse ELISA abil. Antikehade (anti-HBe, anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBc IgG) ja antigeenide (HBsAg, HBeAg) antikehade spekter võimaldab määrata B-hepatiidi diagnoosi ja määrata haiguse staadium (tabel 3). Selle meetodi puuduseks on see, et seda ei saa kasutada viiruse mutantvormide infektsioonil, immunosupressiooniga (vähipatsiendid, narkomaanid jne) ja organismis esineva patogeeni kvantitatiivseks hindamiseks. Nende probleemide lahendamine sai võimalikuks molekulaarbioloogiliste meetodite kasutuselevõtmise tulemusena kliiniliste diagnostiliste laborite praktikas.

Tabel 3. Hepatiit B viiruse nakkuse seroloogiliste markerite erinevad kombinatsioonid ja nende tõlgendamine

antiNBc
Igm

antivib
c summad

Genotsioloogiaga seotud meetodid, mis hõlmavad PCR-i, suurendavad oluliselt viiruse B laboratoorset diagnoosimist, võimaldades otseselt identifitseerida patogeeni, luua HBV koe ja rakusisese lokaliseerimise, tuvastada ja iseloomustada viiruse mutantseid vorme, hinnata vireemia taset haiguse ajal, sealhulgas viirusevastase ravi taustal.

Praegu on PCR-meetodil põhinevad laboratoorsed tingimused HBV DNA tuvastamiseks mitmesugused diagnostiliste testimissüsteemid - Roche, NPF Litekh, DNA tehnoloogia, LCR (ligaasi ahelreaktsioon) - Abbott, bDNA (meetod "erinevad" DNA-sondid) - kindel "Chiron". Need katsesüsteemid võimaldavad patogeeni olemasolu kvalitatiivsel määramisel bioloogilises materjalis: seerumis või plasmas, maksas koes, mononukleaarsetes rakkudes. Üks võimalus HBV DNA kvalitatiivseks määramiseks on in situ PCR-tehnoloogia (histoloogilistes sektsioonides), mis võimaldab kindlaks teha viiruse rakusisese lokaliseerimise hepatotsüütides.

Abbot kasutas LCR-i abil ainukese kaubandusliku testi süsteemi HBeAg-negatiivse hepatiidi B diferentsiaaldiagnostikas. Selle süsteemi oluliseks puuduseks on ainult üks paljudest mutatsioonidest, mis põhjustab HBeAg viiruse sünteesi puudumist. HBeAg-negatiivse B-hepatiidi viiruste jaoks iseloomulike geneetiliste muutuste kogu identifitseerimine on seni võimalik ainult viiruse genoomi PCR-amplifitseeritud fragmentide otsese järjestamise teel.

HBV DNA sisalduse kvantitatiivne iseloomustus kliinilistes proovides on oluline viirusevastase ravi efektiivsuse hindamiseks ja sellel on prognostiline tähtsus HBV krooniliseks määramiseks. Kui algselt madal vireemia (HBV DNA alla 500 fg / l) protsendi kroonilise akuutne hepatiit B nullilähedane, samas kontsentratsioonis DNA HBV vahemikus 500 kuni 2000 fg / ul krooniliseks protsessi täheldatakse 25-30% patsientidest, samas kõrgema vireemia patsient (üle 2000 fg / μl) äge hepatiit B muutub sageli krooniliseks.

Tuntud kommertskatsesüsteemid HBV DNA kontsentratsiooni hindamiseks rakendavad konkureeriva PCR analüüsi põhimõtet, millele järgneb hübridisatsioonikava amplifikatsiooniproduktide määramiseks (Roche, NPF Liteh). See lähenemisviis põhineb teadaoleva kontsentratsiooni siseanalüüsi kliinilisel proovil, mis on kvalitatiivselt erinev määratud maatriksist. Pärast PCR-i arvutamiseks arvutatakse HBV DNA kontsentratsioon katsematerjalis, lähtudes sisestandardi tuntud kontsentratsioonist ja sisestandardi ja määratud maatriksi amplifikatsioonikoguste kuhjumise suhetest.

Praegu arengus laboridiagnostikale hepatiidi meetodeid normaaltingimustes loomise suunas kaubandusliku testikomplektidega identifitseerimist kliiniliselt olulisi HBV mutanttüvesid, samuti uute optiliste seadmete (biosensorid) terviklike HBV infektsiooni diagnoosimiseks (viirusvalkude selle antikehad ja HBV DNA)

Hepatiit C seradiagnostika

C-hepatiidi viirus (hepatiit C viirus, HCV) on RAV, mis sisaldab Flaviviridae perekonda kuuluvaid hepatotroopseid ja lümfotroopseid viirusi. Viiruse genoomi esindab üheahelaline (+) RNA molekul, mille mõõtmed on umbes 9500 alust, mis kodeerivad struktuurseid ja mittestruktuurseid valke (joonis 6).

Joon. 6. HCV genoomse RNA skeem ja viiruse valgu süntees

Struktuursed valgud hõlmavad südamiku valku (tuum) ja ümbritsevaid glükoproteiine (E1 ja E2). Mittestruktuurne piirkond on valkude kompleks, millel on ensümaatiline aktiivsus, peamiselt RNA-sõltuv RNA polümeraas. Lisaks viiruslikele valkudele on virionist väljaspool ka lipiidmembraan, mis koosneb lipoproteiinide madala tihedusega peremeesorganismist (joonis 7).

Joon. 7. Hepatiit C viiruse struktuuri skeem.

Kuni 1990. aastani diagnoositi parenteraalset transmissiooni CGN-A-Ni-B, viiruse hepatiidi muude teadaolevate markerite puudumisel seerumi ALAT aktiivsuse suurenemise tõttu 6 kuud. Kuid mõnedel patsientidel, kellel on krooniline hepatiit C, ei suurene ALAT tase. C-hepatiidi tänapäevases diagnostikas on peamine roll HCV-vastaste antikehade määramisel ja HCV RNA tuvastamisel.

Erinevalt B-hepatiidist, milles on võimalik tuvastada viiruse antigeenid ja nende antikehad, võib hepatiit C abil tuvastada ainult antikehasid ELISA-ga. HCV antigeenid, kui nad sisenevad verd kogustes, mis on vaevu lõksus. Neid saab leida ainult maksakoes, kasutades immunohistokeemilisi uurimismeetodeid. See piirab oluliselt võime hinnata nakkusprotsessi kulgu ja aktiivsust.

HCV-vastane antikeha ei viita viiruse replikatsiooni jätkamisele ja võib olla nii praeguste kui ka minevikuinfektsioonide märguanne. Samuti on vaja arvestada, et HCV-doonorivastast antikeha, mis ei pruugi näidata HCV nakkust, saab tuvastada retsipientidel, kes on üle nakatunud verd. Kroonilise C-hepatiidiga patsientidel leitakse anti-HCV sisaldus veres mitte ainult vabas vormis, vaid ka tsirkuleerivate immuunkomplekside koostises.

Igale viiruslikule proteiinile, mis paikneb viiruse genoomi struktuurilises ja mittestruktuurilises piirkonnas, moodustuvad antikehad. See määrab nende erineva spetsiifilisuse ja seega erinevate diagnostilise teabe. Hepatiit C sõeluuringuks kasutatakse ELISA-meetodit ja kinnitava testi abil kasutatakse immunoblot-meetodit (RIBA). HCV-de tuvastamiseks on erinevad diagnostiliste testimissüsteemide põlvkonnad, mis erinevad nende tundlikkuse ja spetsiifilisuse poolest (tabel 4).

Tabel 4. Diagnostiliste ensüümide immunoloogilise testi süsteemide erinevate põlvkondade võrdlus HCV antikehade tuvastamiseks.

* 4. põlvkonna katsesüsteemid sisaldavad sünteetilisi ja rekombinantseid viiruslikke antigeene, mille suurused võivad erineda kolmanda põlvkonna fragmentidest.

Esimene diagnostilise testi süsteem, mis põhineb C-100-3 antikehade tuvastamisel, töötati välja 1989. aastal M. Houghtoni laboris ja sai kiiresti üldlevinud. See võimaldas püüda antikehi vööndis, mis iseloomustab ainult 12% viiruslikust valgusest mittestruktuurilises piirkonnas (NS3, NS4). Lisaks ei ühti kunstlik rekombinantse antigeen C-100-3 täielikult looduslike viirusvalkudega, mis määrab selle nõrga immunogeensuse. C-valgu (Ag-tuum) antikehad antigeeni C-100-3 abil ei jää üldse. See määrati kindlaks HCV-vastase antikehade määratluse madala spetsiifilisusega ja suure hulga vale-negatiivsete tulemustega, eriti kroonilise C-hepatiidiga patsientidel. Raske hüpergammaglobulineemiaga patsientidel on vastupidi C-100-3 test sageli valepositiivne.

Teise põlvkonna katsesüsteemid, mis ilmusid aastal 1991, võimaldavad hõivata antikehasid valkudele erinevates genoomi piirkondades, mitte ainult mittestruktuurilistes, vaid ka struktuurilistes piirkondades. Nende eeliseks olid eelkõige kõrge spetsiifilisus, samuti HCV antigeenide spektri täielikuma esindatuse võimalus. Teise põlvkonna katsesüsteemide kasutamine võimaldas märkimisväärselt parandada doonorite valimist ja vähendada transfusiooni järgse hepatiidi C tekke ohtu.

Teise põlvkonna katsesüsteemide kasutamisel ei välistata ka vale negatiivseid tulemusi, eriti HCV genotüüpidega patsientidel, mis on selles piirkonnas ebatavalised. Kolmanda ja neljanda põlvkonna kõige sobivamad katsesüsteemid, mida kasutatakse alates 1995. aastast kliinilises praktikas.

Kolmanda ja neljanda põlvkonna katsesüsteemid võimaldavad 99,8% -l juhtudest tuvastada HCV-vastast antikeha. Mõnel juhul ei pruugi HCV-vastased antikehad tuvastada näiteks siis, kui immuunvastus lükkub edasi, kui kasutatakse immunosupressiivset ravi või kui onkoloogilises haiguses, ravimite võtmisel jne esineb immunosupressioon. Valepositiivseid tulemusi on väga harva täheldatud. Nende välistamiseks analüüsitakse küsitavaid seerumeid RIBA või INNO LIA testides, mis tuvastavad iga HCV valgu antikehad. Hepatiidi C diagnoosimise ja patsientide seire määramine on sageli rasked, kui kasutatakse ainult klassikalisi laboratoorset diagnoosi meetodeid. Selle põhjuseks on HCV nakkuse käigu eripära, mille käigus võib täheldada järgmist: asümptomaatiline haiguse algfaasis; madal, sageli normaalne ALT tase; antikehade hilinenud ilmumine (kuni 2 aastat haiguse alguse tekkimisest); usaldusväärsete katsesüsteemide puudumine viirusvalkude avastamiseks. Molekulaardiagnostika hepatiit C juhtpositsiooni laboridiagnostikale HCV nakkuse hõivata genodiagnostic võimaldavaid meetodeid: otseselt tuvastada geneetilises materjalis viirus seerumis ja kudedes inimkeha (mononukleaarsetest rakkudest, hepatotsüütides, luuüdi, jne); hinnata viiruse replikatsiooni aktiivsust kudedes; kvantifitseerige viiruse kontsentratsiooni seerumis; tuvastama viiruse genotüübi ja jälgida HCV varieeruvust. HCV RNA tuvastamine seerumis on diagnoosi "kuldstandard", mis näitab jätkuvat HCV replikatsiooni. Vastavalt Maailma Terviseorganisatsiooni soovitusele võib hepatiit C diagnoosida, kui patsiendi seerumis on kolmekordne HCV RNA tuvastamine teiste hepatiidi markerite puudumisel. Hepatiidi ägedas faasis tuvastatakse RNA juba 1-2 nädala jooksul pärast nakatamist s.o. ammu enne HCV-i esilekerkimist. Kõigi HCV populatsiooni heterogeensuse korral on kõikidel viiruse geneetilistel variantidel genoomi 5'-mitteselemendatud piirkonnas konservatiivne piirkond, mille tuvastamisel põhinevad kõige tuntumad diagnostilised testimissüsteemid HCV RNA tuvastamiseks. Hiljuti peeti HCV RNA määramiseks kõige tundlikumaks testiks Amplicor HCV Roche'i test, mis näitas, et RNA on 700 koopiat milliliitri kohta. Abbotti LCx komplekti abil saab tuvastada 200 RNA / ml koopiat. BDNA Quantiplexi test (firma "Chiron") on praegu vähem tundlik, kuid on laialt levinud. Riigisisesed katsesüsteemid põhinevad HCV RNA määramisel kliinilises proovis RT-PCR-iga, kasutades sihtmärgiks viiruse genoomi konservatiivset 5'-mittesisaldatud piirkonna amplifikatsiooni (NPF Liteh, DNA-tehnoloogia). PCR võimaldab tuvastada HCV RNA mitte ainult vere seerumis, vaid ka maksa koes, mis on oluline HCV rolli kinnitamisel hepatotsellulaarse kartsinoomi moodustumisel. Selles patsiendikategoorias tuvastatakse HCV RNA hepatotsüütides ja seerumis anti-HCV ja HCV RNA puudumisel. HCV-infektsiooni kulgu iseloomustab mitmete ekstrahepaatiliste ilmingute areng, mis nõuab viiruse leviku jälgimist organismis. HCV RNA määratakse PCR-ga vere mononukleaarsetes rakkudes, krüopretsipitaatides, rakkude ajukoes, maksa biopsia ja lihaskoes. On metoodiline lähenemisviis, mis võimaldab mitte ainult määrata viiruse esinemist koes, vaid ka hinnata selle replikatsiooni aktiivsust - reaktsiooni (-) RNA ahelale. Kroonilise hepatiit C patsientide jälgimisel mängib olulist rolli patsiendi seerumi või vereplasma viiruse sisalduse kvantitatiivne hindamine ja HCV genotüübi määramine. Viirusevastase ravi kõige soodsam vastus on täheldatud madala vireemia ja 2. või 3. genotüübiga isikutel. Hea teadaolevate diagnostiliste testimissüsteemide alus HCV sisalduse määramiseks on lähenemine, mis põhineb HCV RNA ja sisestandardi konkurentsivõimelise võimendamise põhimõttel. Esiteks on need Roche ja NASBA HCV (Organon) Amplicor HCV monitori komplekti diagnostilised ettevõtted. Firma "Chiron" bDNA Quantiplex kvantitatiivsed testimissüsteemid, mis võimaldavad teil otseselt hinnata maatriksi kontsentratsiooni proovis salvestatud signaali intensiivsusega. Need katsesüsteemid eristatakse usaldusväärsuse, parema reprodutseeritavuse, kuid madalama tundlikkuse tasemega võrreldes amplifikatsioonidega. Ettevõtete Gen-Probe ja Bayer Diagnostics töötajad avaldasid HCV RNA kvantifitseerimise tulemusi, kasutades TMA-d (transkriptsiooni vahendatud võimendus) väga madala tundlikkuse lävega 50 koopiat / ml. Enamik kodumaiseid laboratoreid kasutavad HCV RNA kontsentratsiooni hindamiseks limiteeriva lahjendusmeetodi. See põhineb analüüsitava maatriksi laagerdamisel kontsentratsioonide kadumisel ja algkontsentratsiooni arvutamisel, mis põhineb amplifikatsiooni tulemustel, võrreldes kalibreerimiskõveraga. Kahjuks pole see meetod piisavalt õige, kuna see ei võta arvesse katseprooviga katseklaasis amplifitseerimisreaktsiooni summeerimise võimalust. Sellest hoolimata on meetod üsna lihtne täideviimiseks ja seda kasutatakse paljudes laborites "sisekasutuseks" (majas). HCV omaduse oluline tunnus on selle geneetiline heterogeensus, mis vastab nukleotiidide eriti kiirele nukleotiididele. Selle tulemusena moodustub suur hulk erinevaid genotüüpe ja alatüüpe. Simmondsi klassifikatsiooni järgi eristatakse 11 tüüpi (genotüübid 1-11), mis omakorda on jagatud HCV alatüüpideks (näiteks alatüübid 1a, 1c, 1c) alamtüübiks (näiteks alatüübid 1a, 1c, 1c). Eriti paljud HCV alatüübid on leitud Aafrikas ja Kagu-Aasias. See kinnitab kaudselt HCV olemasolu nendes piirkondades juba mitu sajandit. Nad arvavad, et HCV ilmnes hiljem Euroopas ja Põhja-Ameerikas, mis vastab tunduvalt väiksemale arvule alatüüpidele. Kliinilises praktikas on piisav eristada HCV 5 alatüüpi: 1a, 1b, 2a, 2b, 3a. Erinevate genotüüpide levimise geograafilised erinevused. Seega on Jaapanis, Taiwanis ja osaliselt Hiinas genotüübid 1b, 2a, 2b enamasti registreeritud. Tüüpi 1b nimetatakse isegi "jaapanlasena". Ameerika Ühendriikides on 1a - "Ameerika" genotüüp valitseb. Euroopa riikides valitseb genotüp HCV 1a, Lõuna-Euroopas suureneb oluliselt genotüübi 1b osakaal. Vene Föderatsiooni territooriumil on domineeriv genotüüp 1b, moodustades 80% viiruse populatsioonist, seejärel sagedus - 3a, 1a, 2a. Tavalise metoodika lähenemine HCV tüpiseerimiseks on tuvastada viiruse genoomi - 5 'tõlkimata, Cor, NS5A piirkondade konservatiivsetes piirkondades iseloomulikke geneetilisi muutusi (mutatsioonid). HCV kirjutades on amplifikatsiooni konserveerunud piirkondade viiruse genoomi ja analüüsi konkreetseid nukleotiidijärjestused meetodid: otsene sekveneerimine võimendati fragmendid järgnes PCR tüübispetsiifilistele spetsiifilisi praimereid RFLP (analüüs võimendatud fragmentideks restriktsiooniensüümide) reverse hübridiseerumisel tüübispetsiifilisest sondide (LiPA) SSCP (analüüs konformatsioonilises polümorfismi üheahelaline fragmendid DNA) HCV genotüübi loomiseks on loodud kaubanduslik InnoLiPA HCV testimissüsteem ("Innogenetics"), põhiliselt Mis põhineb reverse hübridiseerimise põhimõttel tüübispetsiifiliste sondidega (joonis 8). 1-1a genotüüp 2-1c genotüüp 3-2a genotüüp 4-1c + 3a genotüüp 5-2c genotüüp 6-1a + 2a genotüüp 7-negatiivne kontroll amplifikatsiooniga Pic. 8. kehtestamine genotüübiga C-hepatiidi viiruse abil test-süsteemi "InnoLipa ​​HCV" Mõnes suuremates keskustes teostada diagnostikamenetlustes algset HCV tüpiseerimine PCR tüübispetsiifilisest praimereid, DNA fragmendid restrictase analüüs (RFLP), üheahelaline konformatsioonilises analüüsi või DNA fragmentide (SSCP ) Seega NPF Litekh kliinilises ja diagnostilises laboris määratakse viiruse genotüüp PCR-SSCP-ga (joonis fig 9) või alleel-spetsiifiline amplifikatsioon vastavate praimeritega. Joonis 9. HCV RNA genotüpiseerimine SSCP analüüsi järgi: 1-5 genotüüp 1 kuni 6 - 1a7 - 2a8 - 3a. On kindlaks tehtud, et HCV populatsioon ei ole igas patsiendis ühtlane. HCV tsirkuleerib inimese keha kui sama viiruse genotüübiga seotud lähedaste mutantsete tüvede heterogeenset segu, millel on geneetilised erinevused viiruse genoomi varieeruvates piirkondades. Geneetiliselt erinevad HCV-i variantid, mis tsirkuleerivad ühe peremehe kehas nimega "kvaasiliigid". Erakordset ebastabiilsust iseloomustab E2 / NS1 piirkond, mis sisaldab ainult 80 nukleotiidi ja nimetatakse hüpervarieeruvat piirkonda (HVR1). Arvatakse, et E2 / NS1 genoomi poolt kodeeritavate valkude antikehad, millel on neutraliseerivad omadused. HVR1 piirkonna erakordne ebastabiilsus toob kaasa asjaolu, et viirus suudab oma antigeenset struktuuri muuta, mistõttu immunokompetentsed rakud ei suuda tuvastada pidevalt uuendatud antigeene. "Kvaasiliikide" esinemine on seotud viiruse põgenemisega immuunvastusest, HCV-i ebaefektiivse eemaldamisega ja selle tagajärjel selle pikaajalise püsivusega inimese kehas ja suurte krooniliste infektsioonide osakaaluga. Üksiku HCV populatsiooni heterogeensuse hindamine viiakse tavaliselt läbi HVR1 viiruse genoomi geneetiliste variantide arvu registreerimise alusel, kasutades heterodupleksi analüüsi või SSCP-d. Mõnede välismaiste teadlaste arvates põhjustab HVR-lookuse individuaalse HCV populatsiooni kõrge heterogeensuse tase HCG C-i raskemat liikumist kudede transaminaaside taseme kõikuvuse ja viirusevastase ravi suhtes. Füüsikalis-keemilise meditsiini teadusuuringute instituudi tehtud uuring näitas, et HCV populatsiooni geneetiliste muutuste registreerimisel ägeda hepatiit C korral ei ole prognoositav väärtus, nagu mõnedel juhtudel on HCG-C. Seega on geneetiline heterogeensus vaja pidada kui elusoleva viiruse adaptiivne reageering peremeesorganismi muutuvatele tingimustele, mida tõendavad erinevused hepatotsüütide, mononukleaarsete rakkude ja inimese seerumi HCV subpopulatsioonides. Lisaks sellele võib HCV üksikpopulatsiooni geneetilise varieeruvuse dünaamika ja muutused viiruse kontsentratsioonis patsiendi seerumis olla ka maksarakkudes esineva replikatsiooniprotsessi aktiivsuse kaudne marker. Hepatiidi C laboratoorne diagnostika areneb uute, arenenumate katsesüsteemide loomiseks. Ortho Clinic Diagnostic on käivitanud uue immunoloogilise analüüsi komplekti, et määrata veres oleva tuumantigeeni. Esimene etapp on antigeenide vabastamine rakulistest struktuuridest seerumi lüüsimisega, teine ​​on antigeenide hõivamine spetsiifiliste monokloonsete antikehadega. See katse on eriti kasulik HCV-nakkuse varase staadiumi tuvastamiseks, kui viiruspetsiifilised antikehad pole veel ilmnenud. Chiron ja Gen-Probe pakuvad uut amplifikatsioonikatset - NAT-i analüüsi - nii HCV kui ka HIV RNA tuvastamiseks, mis võib analüüsida analüüsitavas materjalis ühe viiruse koopiaid. Kokkuvõttes tuleb mainida vajadust patsiendi tervikliku uurimise järele, kaasates meditsiinilise ja bioloogilise teaduse uusimad edusammud viirusliku hepatiidi õigeks diagnoosiks ja patsiendile piisava ravi määramiseks.


Seotud Artiklid Hepatiit