C-hepatiidi PCR-analüüsi dekodeerimine

Share Tweet Pin it

Spetsiifiline laboratoorne uuring - PC-viiruse analüüs hepatiit C - oluliselt lihtsustab selle viirushaiguse diagnoosimist. C-hepatiit ei ole erand. Vana proovi verest saab testida viirusevastase aine rna ja muu geneetilise materjali sisalduse suhtes. Kõik patsiendid, kellel on hepatiit C vastased antikehad, tsirkuleerivad vereplasmas, analüüsitakse PCR abil, mille olemasolu kinnitas kvalitatiivset avastamist.

Tulemuste tõlgendamist tõlgendatakse uurimisvormi veerus kui "positiivset" või "negatiivset" analüüsi. Lisaks on PCR-i abil võimalik mitte ainult määrata minimaalne viiruse sisaldus, vaid ka osakeste arv. Seega on võimalik määrata hinnanguline viiruse koormus ja määrata meditsiinilise ravi taktika nii täpselt kui võimalik.

Viiruslik maksakahjustus

Maksa kui seedetrakti elemendiks on tohutu koorem. Tema rakkudes esineb kõige metaboolsetest metaboolsetest reaktsioonidest, mis tagavad kõikide elundite ja süsteemide optimaalse toimimise. Samal ajal on selle detoksifitseeriv väärtus suurepärane räbu ja metaboolsete toodete eemaldamiseks ensümaatilise sapiga.

Maksa katkestamine erineva iseloomuga viirustega on kehale väga ohtlik. Mitmekesine kliiniline pilt ja ravivastuse mittetäitmine viivad hepatiidi esile ohtu tervisele. C-hepatiit on krooniline ja võib pikka aega olla negatiivne, inimkeha aeglaselt parasiitidena. Viirus levib bioloogiliste vedelike kaudu: verd ja vähem sperma kaudu. Mittesteriilsete süstalde kuritarvitamine, nakatunud naiste loomulik sissetoomine, tervishoiutöötajate juhuslikud vigastused või kärped võivad põhjustada viiruse ülekandmist tervetele inimestele.

Haiguse õigeaegset diagnoosimist takistab peidetud kliiniline pilt ja mittesüstemaatiline patoloogia. Positiivset tulemust võib lihtsalt halvasti toimivate analüüsidega kaotada. Ainult märkimisväärne kahju maksa rakkudele põhjustab teatud sümptomaatiat, kuid vireemia negatiivne mõju ei jäta seega võimalust elundi taastamiseks.

Kaasaegne meditsiin on välja töötanud spetsiaalsed meetodid vähimatki viiruse jälgede äratundmiseks. PCR, IFA, maksa biopsia võib tuvastada vähimatki maksakahjustust ja minimaalset viirusevastaste antikehade taset. PCR-i abil on analüüsimine kõige lihtsam ja usaldusväärsem.

Kvalitatiivne analüüs

Polümeraasi reaktsiooni olemus on rna järjestuse genereerimine. Reaktsioon viiakse läbi samade viirusvalkude manulusel vereplasmas.

Spetsiaalsed katalüsaatorid võimaldavad sünteesida sarnast ahela viiruse järjestust, mida võrreldakse viiruse RNA tuntud nukleotiididega. Selle põhjal määravad nad kindlaks viiruse koormuse ja maksakahjustuse.

PCR suudab püüda isegi soovitud geeni ühe kohaloleku vereproovis. Selline diagnostiline ahelreaktsioon on samuti väga spetsiifiline. Nukleotiidide ahelate järjestus on iga olendi jaoks ainulaadne, nii et ensümaatilised praimerid loovad soovitud geneetilise teabe identsed järjestused. Seega võib iga viirust tuvastada vähimatki täpsusega, isegi kui selle kvantitatiivne näitaja on äärmiselt väike.

Patsientidel, kelle veres leiti antikehasid viirushepatiidi vastu, vii läbi PCR või Eph kvalitatiivne uuring. Analüüsi tulemus võib olla nii positiivne kui ka negatiivne, mis mõlemal juhul nõuab ravi.

Ahelreaktsiooni positiivne reaktsioon tuleks detekteerida hepatiidi viiruse RNA fragmentide esinemisena või infektsiooni nähtusena.

Praegu on vereplasm aktiivselt paljunev ja maksa rakkudes parasiitne. PCR-diagnostika võib anda negatiivse vastuse, kui plasmas esineb vähe viiruse RNA osakesi, mis on madalamad kui testi tundlikkus, või üldse mitte. Pärast otsest nakatumist kasvab viiruse hulk suhteliselt aeglaselt ja alles 1-2 nädala möödudes saab IFAS või muu kvalitatiivne uuring neid isoleerida.

Negatiivset analüüsi saab järgmistel juhtudel:

  1. Materjali võtmisel ebasoodsates tingimustes, saades vereproovi saastumisega;
  2. Kui patsient on varem saanud hepariini süsti.
  3. Võttes võetud proovide teiste ensüümide ja substraatide esinemine häirib ahelreaktsiooni kulgu.

Kvantitatiivne analüüs

Kvantitatiivne test mikrobioloogilise diagnoosina on mõeldud viiruse koormuse määramiseks. Geneetiliselt muundatud materjali koguse ja selle kontsentratsiooni määramise aluseks on kinnitatud kvalitatiivne analüüs vireemiale. Avastatud viiruse rna arv määratakse vere koguse ühikuna, tavaliselt 1 milliliitris. Nõutavad materjalid on väljendatud rahvusvahelistes üksustes, mõned laborid kasutavad eksemplaride arvu analüüsi käigus.

Tavaliselt analüüsitakse enne PCR-i mis tahes raviskeemi kvantitatiivset analüüsi. Viiruse rna loendamine toimub üsna tihti: pärast ühe, nelja, kaheteistkümne ja kakskümmend neli nädalat. 12. nädala peetakse indikatiivseks, kuna analüüsi põhjal viiakse selle perioodi jooksul läbi ravimeetmete tõhususe tõlgendamine.

Kvantitatiivne analüüs, kasutades PCR-i või IFA-d, hõlmab veeniproovide võtmist.

Tulemuste tõlgendamine kui kõrge viiruskoormus algab joonest 800 000 RÜ / ml. Selline C-hepatiidi positiivne tulemus peegeldab vähemalt 3000 000 koopiat milliliitri vere kohta. Vireemia madal tase lakkab 400 000 RÜ / ml. Uuringu tulemused võivad olla negatiivsed, aga ka näitaja "mõõtepiirkonna all".

Kvantitatiivne test, mille hinnanguline väärtus "alla mõõtepiirkonna" ütleb, et reaktsiooni ajal ei olnud võimalik RNA arvutada. Viirus liigub endiselt kehas, nagu näitab positiivne kvalitatiivne test. Pcr või ifa kvantitatiivse analüüsi negatiivne näitaja näitab rna puudumist selles vereproovis.

Vaatamata piiratud viisidele viiruse ülekandumise kaudu verest, suureneb risk, et viirus ületab sugu näärmete sekretsiooni emalt lapsele.

Kvantitatiivne analüüs annab olulist abi terapeutilise sekkumise hindamisel. Ifa ja PCR peegeldavad viirusevastaste ravimite toimet, aitavad kindlaks määrata ravi aja ja määravad patsiendi immuunsuse tekkimise. Laboratoorsete testide varane negatiivne reaktsioon näitab edukat ravi ja vajadust ravi kestuse vähendamiseks. Vireemia mööduvat langust võib tõlgendada kui teraapia muutmise vajadust. Viiruslike koormuste tase määrab haiguse prognoosi. Madala kiirusega hepatiit on tõenäoliselt lihtsalt ravitud ja viirust saab organismist täielikult eemaldada. Kõrge viirusliku esinemise määr veres nõuab hoolikat tähelepanu ja mitmekülgset ravi.

PCR-diagnostika kasutamine

Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) molekulaarbioloogias on eksperimentaalne meetod viiruste avastamiseks. See võimaldab märkimisväärselt suurendada teatud nukleiinhappefragmentide (DNA) kontsentratsiooni bioloogilise materjali proovides, mis võimaldab neid (tuvastada) ja lugeda.

Analüüs viiakse läbi järgmiselt. Toru sisestatakse geneetiline materjal (vereproov), mis võib potentsiaalselt sisaldada soovitud geeni. Samuti on paigutatud praimerid - soovitud geeni väikese pikkusega keemiliselt sünteesitud segmendid.

Samuti lisatakse anumasse DNA või RNA polümeraas, see suudab moodustada nukleiinhappeahela, mis on täielikult originaaliga identne. Saadud kompositsioon süstitakse ja moodustatakse neli vaba nukleotiidi - spetsiaalne ehitusmaterjal RNA või DNA jaoks, millest üks sisaldab radioaktiivseid fosforiosakesi.

Saadud segu kuumutatakse temperatuurini 95-96 ° C, mistõttu koondatakse kaks tavaliselt harjunud DNA-heelikku. Siis ravimit jahutatakse, millal praimerid ise kinnitavad viiruse genoomi soovitud piirkonnale, takistades uuesti RNA (või DNA) kahekordse heeliksi moodustumist.

Jahutamise käigus otsib polümeraas vaba nukleotiidide ahelat. Selle ensüümi toimimiseks on vaja nukleotiidide ahelat. Kuna polümeraas libiseb mööda DNA ahelat (nagu köites olev rõngas), pole see võimeline töötama topeltheeliksiga.

Seejärel viiakse läbi korduv küttetsükkel, mille tõttu nukleotiidide ahelad on eraldatud. Kõigil nimetatud PCR-i tsüklitel suureneb hepatiidi soovitud geeni proovis sisalduv kogus eksponentsiaalselt ja ülejäänud geneetiline materjal toodetakse (kasvab) lineaarselt.

Pärast lahuse puhastamist nukleotiidijääkidest ja DNA ahela elektroforeesi eraldamist molekulmassi parameetriga saab hõlpsasti kindlaks teha, kas uuritavas proovis on soovitud geen või mitte.

PCR-i eelised

PCR-i abil tehtavad laboriuuringud võimaldavad saada rohkem teavet kui viiruse RNA olemasolu. Radioaktiivse kiirguse taseme parameetri määramisel on võimalik kindlaks teha, kui palju geneetiline materjal oli algselt uuritavas proovis. Hepatiidi korral määrake viiruse koormuse näitaja.

Selle meetodi teine ​​eelis on CR reaktsiooni tundlikkus väga kõrge. See on palju kõrgem kui klassikalised viiruste avastamise meetodid. Ideaalis piisab, kui soovitud geeni identifitseerimiseks PCR-i jaoks on ainult üks viirus proovis.

Lisaks on PCR täiesti spetsiifiline. Selle praimerid on konstrueeritud nii, et need vastavad täielikult soovitud geenide ainulaadsetele piirkondadele, millele pole teistsugust järjestust. Nagu sõrmejäljed on unikaalsed, on igas geenis unikaalsed nukleotiidjärjestused.

PCR-i kvalitatiivne analüüs

Kvalitatiivne analüüs võimaldab tuvastada ainult viiruse esinemist veres. See test tuleb läbi viia kõikide patsientide puhul, kellel leiti veres C-hepatiidi antikehi. Selle tulemuseks võib olla ainult üks kahest väärtusest: "tuvastatud" või "ei tuvastatud". Tervislikul inimesel ei tohiks norm (kontrollväärtus) olla "avastatud".

Selliste kvalitatiivsete uuringute tulemuste eriline tõlgendamine on järgmine:

  • Tulemuseks on "tuvastatud". See tähendab, et võetud bioloogilise materjali analüüsitavas proovis leiti C-hepatiidi viiruse jaoks spetsiifilise RNA fragmenti. Seega on tõsiasi, et patsient on nakatunud C-hepatiidi viirusega. ja see nakatab sel ajal uusi maksarakke.
  • Tulemuseks on "ei tuvastatud." Selline otsus näitab, et selles laboris saadud bioloogilise materjali analüüsitud proovis ei leitud ühtegi RNA fragmenti, mis on spetsiifiline C-hepatiidi viiruse suhtes. Teise võimalusena oli patogeeni infektsiooni RNA kontsentratsioon selles proovis väiksem kui testi tundlikkuse piirväärtus.

C-hepatiidi viiruse RNA akuutses faasis saab selliseid kvalitatiivseid uuringuid PCR-meetodiga tuvastada juba 1-2 nädala jooksul kohe pärast kehahaiguse nakatumist, st juba ammu enne hepatiidi antikehade tekkimist.

Selle uuringu ebaõigeid katse tulemusi saab järgmiselt:

  • saastunud biomaterjal;
  • hepariini esinemine patsiendi veres;
  • keemiliste või valguliste ainete (inhibiitorite) olemasolu proovis, mis mõjutavad PCRi erinevaid komponente.

PCR-i kvalitatiivse analüüsi läbiviimiseks ei ole patsiendile vaja spetsiaalset ettevalmistust uuringuks teha. Materjalina kasutatakse venoosset verd.

Tulemuste hindamine

Kvaliteetsetel PCR-testidel on teatav tundlikkus ning sõltuvalt uuringute täpsusest ja laboratooriumi varustuse tasemest võib varieeruda vahemikus 10-500 RÜ / ml.

See tähendab, et kui vereproovis esinev viirus on väga madalal kontsentratsioonil (vähem kui selle labori tundlikkuse läviväärtus), siis võib tulemuse määrata patsiendi patsiendil kui mitte tuvastatud. Sellepärast on viirusevastase raviga patsientidel, näiteks vähese viiremia (vähese viiruse kontsentratsiooni) korral PCR-i kvalitatiivse analüüsi läbiviimisel väga oluline teada selle diagnostilise süsteemi tundlikkuse lävi.

Diagnostika süsteemide variandid

Viroloogilise ravivastuse kontrollimiseks soovitatakse kasutada viirusevastaseks raviks diagnostilisi süsteeme, mille tundlikkuse lävi on vähemalt 50 RÜ / ml. Need kriteeriumid on täidetud näiteks Cobas Ampicolori HCV-testi analüsaatoritega (täpsusega kuni 50 RÜ / ml) ja RealBest'i HCV RNA-ga (tundlikkusega 15 RÜ / ml).

Vastavalt Maailma Tervishoiuorganisatsiooni soovitustele on C-hepatiidi lõpliku diagnoosimise kindlakstegemiseks vaja aluseks võtta ainult C-viiruse RNA kolmekordset avastamist patsiendi seerumiproovides teiste hepatiidi markerite sortide puudumisel.

Lisaks PCR meetoditele kasutatakse ka TMA analüüsi (transkriptsiooni amplifikatsiooni meetodit) HCV RNA tuvastamiseks patsientidel. Sellel on parim tundlikkusläve (5-10 RÜ / ml), kuid meie riigis selline katsemeetod pole veel väga levinud.

Avastatavate viiruse modifikatsioonide hulk

Selline C-hepatiidi viiruse RNA esinemise seerumis kvalitatiivne määramine võimaldab kindlaks teha selle viiruse mitu genotüüpi. Praegu teab teaduses rohkem kui kuus selle viiruse genotüüpe, samuti umbes 10 selle haiguse alatüüpi.

Meie riigis on levinud viirused 1, 2, 3 genotüübid. Laboratooriumid võivad avastada järgmisi genotüüpe: 1a ja 1b, 2a, 2b ja 2c, samuti 3, 4, 5a ja 6, sõltumata alatüüpidest. Kõigi viiruse modifikatsioonide puhul on avastamise spetsiifilisus 100%.

PCR kvantitatiivne analüüs

Kvantitatiivse PCR-testi abil määratakse hepatiidi viiruse kontsentratsioon vereproovides (viiruskoormus). See vireemia katse (viiruse kontsentratsioon) võimaldab määrata kindlaksmääratud hulga teatud geneetilise materjali (kõige viirusliku RNA) ühikute arvu. Sellisel juhul määrake selle kontsentratsioon 1 ml, mis vastab 1 cu. vaata

Analüüsi kvantitatiivsed parameetrid on esitatud joonistel, selleks kasutatakse mõõtühikuna rahvusvahelist ühikut (RÜ) milliliitri kohta (ml), mida nimetatakse IU / ml. Praegu mõnedes laborites võib viiruse hulga määrata teistes üksustes: koopiate arv milliliitri kohta on näidatud koopiate / ml.

  • Kuupäevad: C-hepatiidi puhul viiakse selline PCR kvantitatiivne analüüs vahetult enne ravi alustamist. Siis 1., 4., 12. ja 24. nädalal. 12. nädala hindamine on soovituslik, see võimaldab kindlaks määrata ravi efektiivsuse.
  • Analüüsi ettevalmistamine. PCR-i kvantitatiivse analüüsi läbiviimiseks ei ole patsiendile ette nähtud spetsiaalset ettevalmistust uuringuks. Pool tundi enne proovide võtmist ei tohiks suitsetada. Laboratoorsel materjalil kasutatakse venoosset verd.

Tulemuste hindamine

Erinevate laboratoorsete testimissüsteemide jaoks on selle indikaatori jaoks erinevad ümberarvestuskoefitsiendid IU / ml kohta. Keskmiselt võtavad nad konversiooni parameetrit, mille korral 4 koopiat / ml = 1 RÜ / ml. Näiteks kui labor annab tulemuseks PCR analüüsi 2,4 * 10 6 koopiat / ml, siis tuleb see parameeter jagada 4-ks ja saame 6 * 10 5 RÜ / ml.

800 000 RÜ / ml koormust peetakse kõrgeks, mis vastab ligikaudu 3000 000 koopiat / ml. Mõnede autorite arvates vastab madal vireemia kvantitatiivse PCR parameetritele alla 400 000 RÜ / ml.

Kvantitatiivse testi tulemusena ei saa lõplikke tulemusi esitada digitaalse väärtuse kujul, vaid: "mõõtepiirkonna all" või "ei leitud".

  • Hindamine: "allpool mõõtepiirkonda." See viitab sellele, et kvantitatiivne test ei suutnud tuvastada C-hepatiidi viiruslikku RNA-d, kuid viirus ise on organismis väga madala kontsentratsiooniga. Seda tõendab täiendav kvalitatiivne test, mis kinnitab viiruse olemasolu.
  • Hinnang: pole tuvastatud. See tulemus näitab, et viiruse RNA proovis ei leitud kvantitatiivset testi.

Viirusliku koormuse parameeter määrab ennekõike haiguse nakkushaiguse astme, patsiendi "nakkavuse" taseme. Mida kõrgem on patsiendi viiruse kontsentratsioon, seda suurem on tõenäosus selle üle anda teistele inimestele. Näiteks seksuaalvahekorras koos haigete inimestega või vertikaalselt. See kvantitatiivne näitaja aitab samuti kindlaks teha patsiendi ravi efektiivsust.

Kõhukinnisuse kvantitatiivse analüüsi läbiviimine on viirusevastase ravi seisukohast oluline, hinnates selle edukust ja planeerides ravikuuri kestust. Seega võib ravi kestus olla lühenenud, kui organism ravib kiirelt reageerivalt ravi ja madala vireemia tasemega.

Kui kvantitatiivne PCR parameeter aeglaselt väheneb, tuleb viirusevastast ravi pikendada või modifitseerida. Kui viiruse koormuse tase on madal, siis on see teraapia soodne tegur, kuid kui see on kõrgendatud, siis kasutatav ravimeetod on ebaefektiivne ja ravimeid või nende kasutamise viise tuleb muuta.

Hepatiidi C kvalitatiivne analüüs

Jäta kommentaar 7,180

Polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne analüüs - C-hepatiidi PCR-i määramine määrab kindlaks HCV olemasolu või puudumise organismis. Laboratoorsetes tingimustes uuritakse RNA struktuuri, mis sisaldab viirust. Viiruse C avastamise korral on vaja läbi viia ravikuuri, sest maksa tähelepanuta jäetud seisund põhjustab tõsiseid tagajärgi. Kõrgekvaliteetne PCR viiakse läbi ka pärast taastumist, et kinnitada antikehade puudumist. Määratud tavapäraseks kontrollimiseks. PCR (kvalitatiivne), mis põhjustab vereseerumis madalat kontsentratsiooni, ei pruugi midagi tuvastada, kuna diagnostilise süsteemil on oma tundlikkuse piirväärtused. Haiguse esialgse või kerge vormi korral viiakse PCR ultra-diagnostika läbi ultra-tundlikes seadmetes.

Mis on RNA viirus?

C-hepatiidi viiruse (või C-hepatiidi viiruse RNA) termin RNA on maksahaigus ise. Viirus C seostub organismi tervete rakkudega sissetungimise kaudu. Aja jooksul levib kogu keha, on vaja ainult sattuda verdesse. Selle tulemusel tungib patogeen maksa sisse, kaitseb selle rakke ja teeb kõvasti tööd. Maksa rakud (hepatotsüüdid) töötavad selle mõju all, muutuvad ja sellest surevad nad. Mida kauem on viirus C maksas, seda suurem on rakkude arv. Aja jooksul arendada ohtlikke haigusi, mis põhjustavad pahaloomulise degeneratsiooni ja surma.

Maksa infektsioon selle tüüpi viirusega ei pruugi ilmneda väljastpoolt. Paljude aastate või aastakümnete vältel tunneb nakatunud inimene täiesti tervislikku seisundit ja sagedamini näitab patoloogiat ainult juhusliku uurimisega. Hepatiidi veres annetamisel uuritakse osa inimese RNA (ribonukleiinhappe) ahelast, mis on inimese geeni osa (DNA). Laboratoorsete uuringute tulemusi ei tohiks kasutada enesehoolduseks, sest see on ainult näitaja. Täpne pilt ja täiendav diagnoos on arsti poolt paremini kindlaks määratud.

Kui see on valmis: teadustöö näited

HCV kinnitamisel viiakse läbi PCR analüüs (polümeraasi ahelreaktsioon). PCR-uuringud aitavad patogeenset materjali leida RNA struktuuris ja määrata tõhus ravi. Nimetatud järgmistel juhtudel:

  • maksa põletiku tunnuste avastamine;
  • profülaktika uuringud ennetamiseks;
  • kokkupuutuvate inimeste uurimine;
  • segapärase hepatiidi diagnoos (peamise patogeeni kindlaksmääramine);
  • viiruse paljunemisvõime taseme kindlaksmääramine kroonilises vormis;
  • maksa tsirroos;
  • et määrata ettenähtud ravi tõhusus.
Teadusuuringute PCR näeb ette arsti, et määrata kindlaks hepatiidi raviskeemi efektiivsus.

PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs on olemas. Kvantitatiivne PCR näitab RNA protsentuaalset suhet viiruse kandjate hulka veres ja kvalitatiivne viiruse olemasolu või puudumine. Kvalitatiivne positiivne näitaja (C-hepatiidi RNA olemasolu) vajab ka kvantitatiivseid uuringuid. Hepatiidi põhjustava toimeaine kõrge kontsentratsioon seondub selle ülekandumise riskiga, teiste nakatamisega. Madal arv on paremini ravitav. RNA viiruste hulk veres ei ole seotud haiguse intensiivsusega. PCR-analüüs tehakse ka interferoonravi puhul, et määrata ravikuuri kestus ja keerukus.

Hepatiit C kõrge kvaliteediga PCR-analüüsi omadused

Polümeraasi ahelreaktsiooni indeksiga kvalitatiivne analüüs määratakse kõikidele patsientidele, kellel on veres C-hepatiidi antikehad. Haigestunud ja taastunud isikud peavad katse uuesti proovima. Soovitatav on läbida B-hepatiidi test, siis positiivse järelduse korral ja hepatiit D. Samuti tuleks kvalitatiivselt analüüsitud reaktsioon viia läbi koos teiste vereanalüüsidega. Analüüsid näitavad täielikku pilti viiruse levikust.

Katsetulemustest nähtub, et ainult C-hepatiidi positiivne test on nähtav või negatiivne, see tähendab viiruse olemasolu või puudumine. Kui väljund on "tuvastatud", siis viirus on ja on endiselt aktiivne. Nimetus "ei tuvastata" tähistab viiruse või selle väikese koguse puudumist. Selle indikaatoriga tuleks meeles pidada, et diagnostiliste süsteemide analüütiline tundlikkus on erinev ja et RNA hepatiit C võib ikkagi veres olla, kuid ei avaldu analüüsis.

Eriti tundlik PCR-meetod ultrahepatiit C avaldub isegi vähesel määral. Kasutatakse fluorestsentsi hübridisatsiooni uuringut, mis on mitu korda kõrgem kui tavalised PCR-süsteemid. Seda meetodit kasutatakse mitmel juhul:

  • kahtlustatud peidetud C-hepatiidi vormid;
  • PCR-diagnostika ei kinnita patogeeni, kuid seal on antikehi;
  • tagasinõudmise korral;
  • varajase nakkuse tuvastamiseks.
Tagasi sisukorra juurde

Dekodeerimisanalüüs

HCV dekodeerimine PCR-iga mõjutab lõplikku otsust diagnoosi andmisel eelkõige ultrametodmeetodil. Selle uuringu peamine puudus on proovi ja materjalide steriilsete tingimuste rangelt kinnipidamine. Väike kõrvalekalle mõnikord annab ebaõigeid analüütilisi järeldusi, raskendab diagnoosi ja järgnevat ravi. Hepatiidi RNA määramiseks PCR-i analüüs ei pruugi alati kindlalt näidata haiguse pilti, mõnikord on mõnikord ebatäpsed ja mõlemas suunas.

Hepatiidi viiruse diagnoosimisel soovitatakse kasutada terviklikku uuringut.

Näitajate norm

Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsi puhul peetakse uuringu tulemuste kohaselt viiruse hepatiit C JgM antikehade puudumist. Samal ajal näitavad seroloogilise analüüsi tulemused, et C-viiruse antikehade esinemine on samuti normaalne. Kvalitatiivne määratlus ei näita haiguse intensiivsust, see näitab ainult R-hepatiidi C põhjustatud agensit. Seda analüüsi korratakse pärast ravi, et kinnitada tegelikku taastumist.

Kõrvalekalded

Kui JgM antikehad esinevad HCV RNA-le, siis see viitab arenevale infektsioonile. Samaaegselt haigus jätkub ägedalt või krooniliselt, avaldub erinevates etappides. Kui antikehade arvu vähenemist registreeritakse, näitab analüüs, et ravitulemused saadi taastumise ajal. Diagnoosides leitakse ainult väga haruldasi valepositiivseid juhtumeid. Neid leidub naistel raseduse ajal ja teiste nakkushaigustega inimestel.

C-hepatiidi detekteerimisanalüüs

Kaasaegses maailmas on maksahaigused väga olulised, kuna see organ on keskkonnale kahjulik, ebaõige eluviis jne.

Kuid on haigusi, mida kõik saavad nakatuda, ja on väga raske ennustada, kas see juhtub või mitte. See on näiteks viirushepatiit, mis edastatakse peamiselt läbi verd ja esialgu ei anna endast teada. Eelkõige räägime C-hepatiidist.

Asjaolu, et viirus esialgu ei näita mingeid konkreetseid märke, raskendab diagnoosi tõsiselt, kuid sellegipoolest on üsna tõhusad ja mitmekesised uuringud, mis aitavad probleemi täpselt välja selgitada.

HCV-i haiguse tuvastamise põhiprintsiibiks on hepatiit C-testide detekteerimine, see tähendab, et teatud näitajaid võrreldakse normidega.

Juhiste saamise tingimused

Hepatiidi C diagnoosimine toimub inimeste poolt mitmel põhjusel, peamiselt:

  • võimaliku hepatiidi kahtlus;
  • inimene on ohus;
  • diagnoosimine on vajalik töö eripära tõttu;
  • naised raseduse ajal või planeerimisel.

On mitmeid diagnostikatüüpe: mõned neist on pinnapealsed uuringud, teised on sügavad ja väga täpsed, mille põhimõtteks on normaalsete näitajate minimaalsete kõrvalekallete uurimine või konkreetsete ainete avastamine.

Hepatiit C viiruse tuvastamiseks inimveres kasutatakse kolme liiki diagnostilisi meetodeid:

  1. Ensüüm-seotud immunosorbentanalüüs (ELISA). Laboris läbiviidud põhimõte seisneb hepatiidi antikehade määramises, eelkõige: IgG, IgM. See diagnoos ei anna üksikasjalikku vastust: inimene on haige või mitte, sest üks kolmandik antikehade kandjatest ei tuvastata. See juhtub seetõttu, et viirus siseneb kehasse ja selle antikehad tekivad, seega on see kahtlane ja väga pindmine analüüs.
  2. Rekombinantne immunoblotanalüüs. Seda tehakse ainult laboritestide kinnitamiseks, kui tulemus on positiivne, tähendab see seda, et isik on või oli haiguse kandja. Viiruse antikehasid ei näidata kohe, isegi pärast hepatiidi edukat ravi. Lisaks on mõne kolmanda osapoole tegurite tõttu vale tulemus võimalik.
  3. Polümeraasi (PCR) analüüs. Mis on kõige täpsem meetod hepatiidi kindlakstegemiseks? - unikaalne PCR. See on kõige noorem ja täpsem viis diagnoosida. See PCR võib anda üksikasjaliku vastuse haiguse kulgemise kohta, mis võimaldab määrata viiruse kontsentratsiooni veres ja selle genotüübis (seal on 6). Põhimõte põhineb DNR / RNA viiruse tuvastamisel vereplasmas. See meetod välistab kõik eespool toodud diagnoosi kvaliteedi poolest: enne hepatiidi kliinilistest ilmingutest peab olema vähemalt 20 päeva ja enne antikehade tootmist 120 päeva, 10-12 nädala jooksul pärast viiruse levikut. Ent põhjustava aine tuvastamine veres ei saa mingil juhul olla vale, ainus piirang: infektsiooni hetkest alates peab 5 päeva mööduma, sest uuritud veremoodus ei pruugi veel olla viirus.

Täpse diagnoosi tegemiseks tehakse PCR, toimub kolm alamliiki:

  1. Kvalitatiivne analüüs. Sellega määratakse ainult viiruse olemasolu.
  2. Kvantitatiivne diagnostika. Kasutatakse viiruse täpse sisalduse määramiseks veres mahus; ravi ajal kasutatakse efektiivsuse kontrollimiseks.
  3. Genotüüpiline diagnoos. Kasutatakse genotüübi ja hiljem viiruse fenotüübi määramiseks. Patogeeni genotüübi tundmine on teraapia jaoks äärmiselt oluline, sest sõltuvalt omadustest muutub ravimi sissevõtmise suundumus ja kontsentratsioon.

Abistavad analüüsid

Diagnoosimeetodites mängib olulist rolli täiendavad testid, mis mõnikord muudavad ravi iseärasusi ja mõnikord võivad isegi osutada teistsugusele diagnoosile.

Biokeemiline analüüs

Selleks, et ravimeid korralikult välja kirjutada ja mitte pildi süvendada, peate usaldusväärselt määrama maksakahjustuse määra, kasutades selleks biokeemilist vereanalüüsi, mis näitab kõrvalekaldeid oma koostise normist.

Muutused iseloomustavad maksakoe kahjustusi, see on: haiguse staadium, fibroosi raskusaste, maksa häired. Biokeemiline meetod näitab veres bilirubiini, valgu, uurea, kreatiniini, suhkru, AST ja ALT, leeliselise fosfataosi, raua ja gamma-glutamüültranspeptidaasi tegelikku arvu. Lisaks määratakse kindlaks lipiidide profiil ja valkude metabolismi kvaliteet.

Fibroso-diagnoosimine

Fibroos on maksakudede kahjustus, kurss sõltub selle astmest, seetõttu on koekahjustuse raskusastme diagnoosimine väga oluline. Arvestades haiguse kulgemise pilti, võib arst otsustada ravi kiireloomulisuse üle: kui olukord pole kriitiline, võib seda isegi edasi lükata, et see ei kahjustaks teisi elundeid ravimitega.

Muud analüüsid

Mõnikord saamiseks täieliku ülevaate haiguse ultraheli kõhu ja kilpnääre, ühine vereanalüüsi. Vanematel inimestel diagnoositakse südame-veresoonkonna ja seedetrakti süsteemid, kopsud.

Kui standardseid ELISA / PCR analüüse ei ole võimalik läbi viia, viiakse läbi spetsiifilised analüüsid: sülje ja muude vedelike analüüs patogeeni esinemise kohta.

Näitajad

Hepatiidi C diagnoosimise tehnoloogiad on kõrgel tasemel ja sageli ei anna valeid tulemusi.

Sellest hoolimata ei ole 100% -lise täpsuse tagamine võimatu: on võimalik valepositiivseid tulemusi.

Vereanalüüs võib anda vale vastuse analüüsi eeskirjade või mõne muu teguri rikkumise korral. Tulemuste moonutamise peamised põhjused:

  • mõned spetsiifilised nakkused, mis reageerivad skriinimisainetega ja test on positiivne;
  • raseduse uurimine;
  • teiseste ainete olemasolu organismis;
  • immuunsüsteemi häired;
  • vereproovide võtmise eeskirjade rikkumine.

C-hepatiidi detekteerivad testid

Hepatiidi dekodeerimise testid käsitlevad kogenud spetsialisti, kes määrab iga indikaatori kõrvalekalded ja kirjutab järelduse hepatiidi tõenäosuse kohta.

ELISA-ga diagnoosimisel tuvastab antikehade tuvastamine veres eksitavalt, et inimese kehas esineb või oli hepatiidi viirus: kas patsient on praegu haige või on haiguse saanud, ja antigeenidel pole lihtsalt aega kehast välja pääseda. Tuleks meeles pidada, et antikehad ei tööta kohe - teatud aja jooksul peab läbima teatud aja, et selline analüüs annab usaldusväärseid tulemusi, mistõttu tuleb vajadusel veri annetada katsetamiseks.

Kui PCR-diagnoos andis positiivse vastuse, siis on tõenäosus, et organismis on patogeen. Sellisel juhul on vaja kindlaks määrata raskusastmed ja viia läbi rna genotüüpimine, et korrigeerida muidugi, ja kohe alustada ravi nii, et hepatiit ei muutuks krooniliseks. Neid polümeraasi analüüse peetakse väga täpsaks, kuna nad suudavad tuvastada rakus viirusega kuni 1 esindajat. Kui polümeraasi ahelreaktsiooni voolukiirust ei rikuta, siis on vastus negatiivne ja muret ei ole vaja.

Hepatiidi C määramisel kasutatakse bilirubiini, ALT ja AST kvantitatiivset määramist valke. Nende sisu näitab ka haiguse ulatust ja tõsidust.

Üldine tabel vereainete indikaatorite kohta, mis võivad pärast biokeemilist analüüsi näidata C-hepatiiti:

Vereproovide ja C-hepatiidi PCR-i maksumus

C-hepatiit on põletikuline patoloogia, mille puhul mõjutavad maksarakud. Haigus areneb C-hepatiidi viiruse (HVC) tungimise tagajärjel inimese kehasse.

Haiguse vorm võib olla äge või krooniline.

Enamikul patsientidel esineb sageli patoloogia ägeda vormi sümptomeid, mõnikord kaasneb haigusega ka valulikud aistingud kõhupiirkonnas, vähenenud toime, väsimus, isutus, uriini tumedat tooni, väljaheidete värvuse muutumist, naha ja limaskestade kollasus, lihasevalu. Sellised sümptomid ilmnevad tavaliselt 6-8 nädalat pärast nakatumist, kuid võivad ilmneda kuue kuu pärast.

Selliste nähtuste kujunemisega on vaja pöörduda meditsiiniasutuse poole ja läbi kogu organismi põhjalikult uurida. Arstliku läbivaatuse osana tehakse C-hepatiidi vereanalüüs.

Tänapäeva diagnostiliste meetodite abil saab seda patoloogiat kindlaks teha esialgses arengujärgus, mis suurendab oluliselt haiguse täieliku ravivõtmise võimalusi.

Hepatiidi C testimiseks on vaja järgmisi inimesi:

  • naised lapse kandmise ajal;
  • hepatiidi sümptomitega isikud;
  • meditsiinitöötajad;
  • potentsiaalsed organid ja vere doonorid;
  • uimastisõltlased, HIV-nakkusega inimesed, loitsuline intiimne elu.

Nõutavate uuringute loetelu

Milliseid katseid peaksin C-hepatiidi puhul võtma? Selle haiguse täpsuse diagnoosimiseks, selle põhjuste kindlaksmääramiseks ja maksa parenhüümi seisundi määramiseks on vajalikud järgmised uuringud:

  • üldine uriin ja vereanalüüsid;
  • vere biokeemiline analüüs;
  • PCR analüüs;
  • vereanalüüs HVC antikehade tuvastamiseks;
  • olemasolevate oma maksarakkude antikehade vereanalüüs;
  • maksa biopsia.

C-hepatiidi vereanalüüside dekodeerimist teostab spetsialist. Mõelge iga uurimismeetodi üksikasjalikumalt, samuti mõistame, milline hepatiit C analüüs on kõige täpsem.

Üldanalüüs

Hepatiit C üldise vereanalüüsi läbiviimisel saate hinnata patsiendi seisundit. Vere parameetrite muutusi ei peeta hepatiidi spetsiifilisteks sümptomiteks, kuid selle haigusega on selliseid häireid nagu:

  • hemoglobiini, trombotsüütide ja leukotsüütide väiksem kontsentratsioon;
  • suurendab lümfotsüütide sisaldust;
  • vere hüübimist rikutakse;
  • erütrotsüütide settimise määr (ESR) suureneb.

Uriini üldanalüüs võimaldab oma koostises tuvastada urobelini - sapipiget, mis tekib uriinis maksatalitluse häire tõttu.

Biokeemiline analüüs

Vere biokeemiline analüüs hepatiit C võimaldab tuvastada selliseid häireid nagu:

  • maksaensüümide aktiivsuse tõus (alaniini transaminaas - ALAT ja aspartaataminotransferaas - AST), mis sisenevad verd, kui hepatotsüüdid on kahjustatud. Normaalses seisundis ei tohiks neid näitajaid meeste puhul rohkem kui 37 RÜ / l, naiste puhul - mitte üle 31 RÜ / l. ALT ja ASAT suurenenud kontsentratsioon asümptomaatilisel hepatiit C on sageli ainuke selle haiguse sümptom. Lisaks suureneb vere glutamüültranspeptidaasi aluselise fosfataasi sisaldus (tavaliselt mitte üle 150 RÜ / l).
  • ületab bilirubiinisisaldust (nii üldist kui ka otsest) veres. Kui kollase pigmendi sisaldus seerumis ületab 27-34 μmol / l, tekib ikterus (kerge kuni 80 μmol / l, 86-169 μmol / l - mõõdukas, üle 170 μmol / l - raske kujul).
  • Albumiini tase on langetatud, vastupidi, gamma-globuliinide kontsentratsioon suureneb. Gamma-globuliinid koosnevad immunoglobuliinidest - antikehadest, mis kaitsevad keha haigustekitajaid põhjustavate ainete eest.
  • triglütseriidide kontsentratsioon veres.

PCR-test

PCR-tehnika abil on võimalik diagnoosida haiguse põhjustaja. Selle analüüsi teostamine võimaldab tuvastada viirust veres, isegi kui selle kogus on minimaalne. C-hepatiidi PCR-analüüs võimaldab olemasoleva infektsiooni verd määrata juba 5 päeva pärast infektsiooni hetkest, see on ammu enne antikehade ilmnemist.

Kui C-hepatiidi vereanalüüsi tulemus PCR-ga on positiivne, siis näitab see aktiivse infektsiooni esinemist organismis. Selle meetodi abil saate läbi viia HVC RNA kvalitatiivse ja kvantitatiivse uuringu.

C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivse analüüsi käigus on võimalik inimese kehas olemasolevat viirust tuvastada.

See diagnoosimisprotseduur viiakse läbi, kui anti-HVC veres leitakse.

Hepatiit C analüüsi lahutamine sisaldab teavet selle kohta, et infektsioon on kas organismis avastatud või tuvastatud. Tavaliselt ei leita veres patoloogilisi aineid.

Kui C-hepatiidi test on positiivne, tähendab see, et patogeen liigub pidevalt ja nakatab maksa rakke.

Selle analüüsi tulemused võivad olla ebausaldusväärsed, see on võimalik järgmistel juhtudel:

  • kasutatud saastunud biomaterjal;
  • hepariini olemasolul veres;
  • uuritava biomaterjaliga keemiliste või valguliste ainete (inhibiitorite) juuresolekul, mis mõjutavad PCR elemente.

C-hepatiidi kvantitatiivne analüüs annab teavet veres sisalduva viiruse hulga kohta, mis määrab kindlaks viiruse koormuse. Selle mõiste all mõeldakse veres sisalduva HVC RNA kogust (näiteks 1 ml). Hepatiit C kvantitatiivse analüüsi tõlgendamisel väljendatakse seda väärtust digitaalses ekvivalendis, mõõdetuna IU / ml kohta.

Enne terapeutilisi meetmeid tuleb võtta C-hepatiidi PCR-vere jaoks. Pärast analüüsi teostatakse 1, 4, 12 ja 24 nädala jooksul. 12. nädala uuring on soovituslik ja viiakse läbi, et hinnata meditsiiniliste protseduuride tõhusust.

Kui C-hepatiidi uuring raseduse ajal on positiivne ja viiruse koormuse väärtused on ületatud, suureneb patogeensete haigustekitajate ülekandumise oht lastel lapsel mitu korda. Ka viiruse koormuse suurenenud väärtuste korral on terapeutiliste meetmete rakendamine keeruline.

Vastavalt hepatiit C testide ärakirjale, kui viiruse koormuse väärtused ületavad 800 000 RÜ / ml, on see kõrge. Kui arvud on alla 400 000 RÜ / ml, peetakse viiruskoormuse taset madalaks.

Hepatiidi C analüüsi PCR-ga peetakse kõige täpsemaks ja sellel on mitmeid eeliseid teiste uurimisvõimaluste suhtes, nimelt:

  • haigusjuhtumi otsene diagnoosimine. Traditsiooniliste uuringute läbiviimisel määratakse kindlaks valgu markerid, mis on patogeenide jäätmed. See näitab ainult seda, et infektsioon esineb veres. Kui hepatiit C testib PCR abil, on võimalik kindlaks teha ohtliku patoloogia patogeeni tüüp.
  • tehnika eripära. Selle protseduuri käigus määratakse ainulaadne DNA piirkond biomaterjalis, mis vastab ainult ühele patogeeni tüübile. See vähendab võltsitud tulemuste tõenäosust.
  • kõrge tundlikkus. PCR-analüüsi tegemisel saate tuvastada minimaalse arvu viiruse. See on tähtis, kui tuvastatakse tingimuslikult patogeensed ained, mis kujutavad ohtu ainult siis, kui nende tase tõuseb.
  • Selle meetodi kasutamisel ühes biomaterjali proovis saab korraga tuvastada mitut patogeeni.
  • saab avastada peidetud nakkusi. Analüüs võimaldab teil lisaks diagnoosida patogeenseid mikroorganisme, mis elavad rakkudes ja on kõrge antigeense varieeruvusega.

Kui testi tulemused on positiivsed, leitakse viiruse jäljed biomaterjalis, siis on võrgus olemas infektsioon kehas.

Hepatiidi C negatiivne PCR-analüüs tähendab, et biomaterjalis pole nakkuse jälgi.

Immunoloogiline uuring

See meetod võimaldab teil tuvastada kõikide hepatiidi viiruse tüüpide antikehad, samuti antikehad teie organismi maksa rakkudele, mille välimus aitab kaasa autoimmuunse hepatiidi tekkimisele.

Uuringu käigus saadud tulemused on asjakohased 3 kuud, siis peaksite hepatiidi C jaoks veri üle andma.

Samuti on võimalik läbi viia ekspress-uuring spetsiifiliste testribadega. See analüüs võimaldab määrata viiruse C antikehi vere ja sülje koostises. Seda protseduuri saab teostada iseseisvalt kodus.

Maksa biopsia

Sellise analüüsi teostamiseks võetakse osa maksa parenhüümi ja tehakse saadud biomaterjali histoloogiline uurimine. See võimaldab teil hinnata keha seisundit: tuvastada põletikulised, nekrootilised fookused, fibroosi staadium ja nii edasi.

Praegu kasutatakse hepatiidist parenhüümi histoloogilise analüüsi asemel tehtavaid katseid.

Maksakahjustuse staadiumi ja põletikuprotsessi intensiivsuse hindamiseks kasutatakse spetsiaalseid venoosset vere biomarkereid. FibroTest'i abil saate hinnata kiudude koe kasvu taset.

Actinest'i täitmisel saate teavet patoloogiliste protsesside intensiivsuse kohta maksa parenhüümil. Steatototesta kasutamine võib diagnoosida maksa rasvkoe ja hinnata selle protsessi ulatust. Fibromax koosneb kõigist ülaltoodud testidest ja võib hõlmata ka teisi uuringuid.

Uuringu ettevalmistamine

Millised testid on tehtud hepatiit C kohta ja kuidas oleme seda või seda tüüpi teadustööd leidnud? Samuti on oluline teada, kuidas analüüsimiseks ette valmistuda.

Usaldusväärsete tulemuste saamiseks on soovitatav järgida järgmisi nõudeid:

  • Hepatiit C testid tuleb võtta tühja kõhuga hommikul. Viimast korda tuleks toitu tarbida vähemalt 8 tundi enne uuringut.
  • Biomaterjali võib koguda päevaajal või õhtul. Sellisel juhul on oluline, et viimase söögikorra ja analüüsi vahele jääks vähemalt 5-6 tundi.
  • Enne hepatiit C annuse andmist tuleb tee, kohv, mahl või muud jookud ära visata, lubatud on ainult vesi.
  • 48 tundi enne uuringut on vaja välja jätta rasvade, praetud ja alkoholit sisaldavate jookide kasutamine.
  • vähemalt tund enne analüüsi, peate hoiduma suitsetamisest.
  • analüüsi ei tohiks teha kohe pärast ultraheli-, instrumentaal-, röntgenuuringut, massaaži või füsioteraapiat.
  • üks päev enne uuringu läbiviimist peab ravimite ja intensiivse füüsilise tegevuse kasutamine välja jätma. Emotsionaalne stress on vastunäidustatud.
  • Soovitatav on kulutada 15 minutit enne uuringu läbimist rahulikus olekus.

Vere kogumise protseduuri läbiviimine

Kust testitakse C-hepatiidi vastu? Biomaterjalide proovide võtmine edasistes uuringutes viiakse läbi meditsiiniasutuse laboris või patsiendi kodus.

Veeni vere võetakse järgmiselt:

  • Patsiendi küünarvarre ümbritsetud spetsiaalse jalutuskäigu abil peatatakse venoosne verevool. Tänu sellisele manipuleerimisele veenid täidetakse verest ja on nähtavamad, mis aitab oluliselt nõela sisestamise protsessi.
  • kus nõel sisestatakse, hoolikalt töödeldakse alkoholi või alkoholi sisaldava vedelikuga.
  • Nõel sisestatakse õrnalt veeni, seejärel kinnitatakse sellele katseklaas, mis on spetsiaalselt ette nähtud vere kogumiseks.
  • Vahetult pärast seda, kui nõel on veeni sisestatud, eemaldatakse patsiendi käes pigistatav rakmed.
  • kui analüüsi jaoks vajalik veremahus on kogutud, eemaldatakse nõel veenist ettevaatlikult.
  • Süstekohta tuleb kanda alkoholiga niisutatud steriilne puuvillane tampoon või marli pad.
  • et vältida hematoomide esinemist, tuleb tampoon vajutada mõnevõrra nõela sisestamisala vastu, painutada käe küünarliigendil ja hoida seda selles asendis mitu minutit. Sellised tegevused aitavad ka verd kiiremini peatada.

Kui sisejuhtimise tehnika on hea, on see protseduur täiesti ohutu ega põhjusta valusaid tundeid.

Harvadel juhtudel võivad vere kogunemine paisuda. Seda nähtust nimetatakse "flebiitiks". Probleemide lahendamiseks aitab kokku suruda (mitte kuum), seda tuleks naha piirkondade paistetamiseks kasutada mitu korda päevas.

Teatud probleemid võivad tekkida ka veritsushäire korral. Aspiriini, varfariini ja teiste vere vedeldite võtmine võib põhjustada verejooksu. Seetõttu peab enne analüüsi tegemist keelduma mis tahes ravimi võtmisest. Kui ravi ei saa tühistada, peaksite sellest spetsialisti teavitama.

Kuupäevad ja hinnad

Kui palju on testitud C-hepatiidi suhtes? Hepatiidi vereanalüüsi tulemusi saab valmis mõne tunni ja mõne päeva jooksul (reeglina mitte rohkem kui 8 päeva). Tulemuste ettevalmistamise kestus sõltub viiruse tüübist ja valitud analüüsimeetodist. Kiirem on PCR-meetodiga läbi viidud uuring. Sellisel juhul tulemused on valmis mõne tunni tagant.

Kui palju maksab C-hepatiidi test? Sõltuvalt kliinikusse ja uuringu keerukusest võib protseduuri hind varieeruda 400 kuni 11 000 rubla ulatuses.

Te peate teadma, et HVC antikehade piisava hulga moodustamiseks võib kuluda mitu nädalat. Seetõttu võib patoloogia arengu varases staadiumis uuringu tulemus olla vale-negatiivne.

Lisaks on ebausaldusväärsete andmete saamine võimalikult vähene kvaliteedi analüüs ja saadud biomaterjali transportimise tingimuste rikkumine (proovid tuleb viia laborisse maksimaalselt 2 tundi pärast vereproovide võtmist).

Kui uuringu tulemus on positiivne, peate kohe ühendust võtma nakkushaiguste arstiga. Spetsialist viib läbi täiendava uuringu ja määrab asjakohase ravi.

Kas te arvate endiselt, et hepatiit C ravimine on raske?

Otsustades asjaolu, et te loete neid jooni kohe - võit võitluses maksahaiguste vastu pole teie poolel. Kas olete juba mõelnud interferoonravi üle? See on arusaadav, sest hepatiit C on väga raske haigus, sest maksa korralik toimimine on tervise ja heaolu võti. Iiveldus ja oksendamine, kollakas või hallikas nahk, mõru maitse suus, tumedad uriinid ja kõhulahtisus. Kõik need sümptomid on teile tuttavad esimest korda.

Kuid ehk on õige mitte mõjutada mõju, vaid põhjus? Ravi jaoks soovitame kasutada kaasaegseid kodumaiseid ravimeid - sofosbuviiri ja daklatsavi. Loe edasi >>

Hepatiit C PCR uuring: tüübid, näidustused, transkriptsioon

Viiruse hepatiit C on tõsine haigus, mis tekib maksakahjustusega. Kaheksakümmend protsenti patsientidest muutub see krooniliseks. Viirus levib maksarakkudes - hepatotsüütides - ja põhjustab nende surma. Surnud kude asendatakse sidekoe fookustega, areneb fibroos.

Mis areng maksa fibroos ei suuda täita oma ülesannet, hakkab tsirroosi, mis on ohtlik selle tüsistused: kasvavat survet värativeeni, seedetrakti verejooks, halvenenud vere hüübimist, vaimseid muutusi tõttu kahjustada aju tuumade mürgiseid aineid.

Haiguse põhjuseks on viiruse nakatumine Flaviviridae perekonnast, mis kuulub RNA viiruste tüübi hulka. See tähendab, et geneetiline materjal, millega sünteesitakse patogeeni valgud, kodeeritakse ribonukleiinhappemolekulis. Infektsioon toimub vere kaudu, seksuaalselt ja rasedast naisest lootele. Kahjuks võib nakkuse ja antikehade tootmise algusest piisava ajaga edasi liikuda - kahe nädala kuni kuue kuu jooksul. See ei võimalda nakkuse tuvastamist immuunanalüüsi meetodil ja ravi alustamist ravi alustamiseks.

Mis on PCR-analüüs?

PCR on molekulaaranalüüsi meetod, mis võimaldab tuvastada patogeeni geneetilist materjali juba esimesel nädalal pärast infektsiooni, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni. Uuringul on kõrge spetsiifilisus, täpsus ja see võimaldab mitte ainult määrata viiruse olemasolu või puudumist, vaid ka selle kontsentratsiooni ja genotüüpi.

Uuringuks võetakse patsiendi veri, milles võib potentsiaalselt paikneda viiruse RNA. Verele lisatakse praimerid - väikese pikkusega soovitud geeni kunstlikult sünteesitud piirkonnad ja RNA polümeraas on spetsiaalne ensüüm, mis suurendab korduvalt patogeeni geneetilist materjali. Spetsiaalse seadme kasutamisel viiakse läbi mitu kütte- ja jahutustsüklit. Seejärel analüüsitakse materjali ja võrreldakse viiruse tuntud geene, mille põhjal tehakse järeldus infektsiooni esinemise või puudumise kohta.

C-hepatiidi PCR-analüüsi tüübid

On olemas kolm tüüpi PCR analüüsi:

  1. PCR-i kvalitatiivne analüüs. Uuringu esimene etapp. See võimaldab tuvastada viiruse geneetilise materjali veres.

  • PCR kvantitatiivne analüüs. Võimaldab määrata viiruse koormuse - patogeeni geneetilise materjali kontsentratsiooni ühes milliliitris veres. See uuring viiakse läbi enne ravikuuri algust ja seejärel esimesel, neljandal, kaheteistkümnendal ja (kui see on pikk) ravi kahekümne neljandal nädalal, et hinnata selle efektiivsust.

  • Genotüüpimine Hepatiidi C põhjustav põhjustab sageli ja kiiresti mutante. Selles viiruse genotüübis leidus planeedil seitse varianti. Venemaal on levinud esimene, teine ​​ja kolmas tüüp. Igal genotüübil on erinev resistentsus ravile, näiteks esimese tüübi ravi efektiivsus on kuuskümmend protsenti, teisel ja kolmandal juhul on see arv kaheksakümmend viis. Seega, selleks, et valida sobivad ravimid ja määrata piisava kestusega ravikuur, on vaja täpselt määrata, millist tüüpi viirust patsient nakatub.
  • C-hepatiidi PCR-analüüsi näited

    PCR uuring määratakse järgmistel juhtudel:

    • kokkupuude haigega, kellel võib nakkust esineda;
    • positiivne ensüümi immuunanalüüs;
    • tsirroosi tunnused: maksa suuruse muutused, põrna suurenemine, nahaaluse venoosse põrnakujulise näo tekkimine;
    • maksakahjustuse sümptomite ilmnemine: valu paremal kõhul, naha kollasus;
    • ALAT ja ASAT aktiivsuse suurenemine vere biokeemilises analüüsis;
    • enne viiruskoormuse määramist ravi alustamiseks;
    • viirusevastase ravi efektiivsuse jälgimine;
    • pärast ravi, et kontrollida relapsi;
    • diagnoositud hepatiit B juuresolekul, et välistada segatüüpi maksakahjustus.

    C-hepatiidi PCR-uuringute selgitus

    Hepatiidi C dekodeerimise PCR-analüüs ja ensüümi immuunanalüüs tuleks teha hepatoloog või nakkushaiguste spetsialist. PCR-i tulemuste analüüsimine on vajalik kombinatsioonis vere biokeemilise analüüsi, biopsia ja ultraheli andmetega. Ainult kvalifitseeritud arst oskab analüüsida uuringute tulemusi ja määrata nende alusel õige ravi.

    Kvalitatiivse analüüsi dekodeerimine.

    Analüüsitud bioloogilises materjalis leiti patogeeni geneetiline materjal. Infektsioon on kinnitatud.

    Infektsioon puudub või patogeeni RNA kogus on tundlikkuse piirist madalam.

    Kvantitatiivse analüüsi dekodeerimine.

    Normaalne tase tervetele inimestele. See tähendab, et uuritavas materjalis ei ole C-hepatiidi RNA-d ega selle kontsentratsioon on uuringu tundlikkuse piirist madalam.

    RNA kontsentratsioon on alla kvantifitseerimise vahemiku. Neid tulemusi tõlgendatakse väga hoolikalt, korreleerige neid teiste uuringute andmetega, sageli uuesti õppige.

    Viirusekoormuse tase antud kontsentratsioonil peetakse madalaks. Tavaliselt tähendab viiruse vähenemine seda, et ravi on edukas.

    Rohkem kui 8 x 10 5 RÜ / ml

    Viirusekoormuse tase antud kontsentratsioonil peetakse kõrgeks.

    Rohkem kui 2,4 * 10 ^ 7 RÜ / ml

    RNA kogus on üle kvantifitseerimisvahemiku ülempiiri. Seda tulemust ei saa teha viirusliku koormuse astme kohta. Sellistel juhtudel korratakse katset vereproovi lahjendamisega.

    Genotüübi dekodeerimine.

    Tuvastatud genotüübi tuvastatud RNA

    Biomaterjalis tuvastati teatud genotüübi ja alatüübi C-hepatiidi viirus. Tulemus on kodeeritud rooma numbrite ja ladina tähtedega, näiteks - 1a, 2b. Kokku on seitse genotüüpi ja kuuskümmend seitse alamtüüpi, kuid Venemaal on ainult kolm esimest tüüpi.

    Hepatiit C viiruse RNA avastati

    Venemaal leiti haruldast genotüüpi veres olevat RNA-d, mida ei saa seostada esimese, teise või kolmanda tüübiga. Rohkem teadusuuringuid on vaja.

    See tulemus näitab, et patsient on tervislik või et patogeeni RNA on liiga väike.

    On võimalik, et C-hepatiidi PCR-analüüs on negatiivne ja ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs tuvastab viiruse vastased antikehad. See tähendab, et patsiendil oli äge hepatiit C ja ta taastati iseendale. Umbes 20 infektsiooni juhtumit põhjustab spontaanne taastumine, kui patsiendi organismil on infektsioonile piisavalt vastupanu.

    Kuigi PCR on väga täpne analüüs, võib selle tulemusi moonutada järgmistel juhtudel:

    • vere transporditi laborisse sobimatutesse tingimustesse, temperatuur oli rikutud;
    • biomaterjaliproov oli saastunud;
    • oli veres hepariini ja teiste antikoagulantide jääkide jäljed;
    • Leiti, et uurijad on inhibiitorid - ained, mis aeglustavad või peatavad polümeraasi ahelreaktsiooni.

    PCR-i eelised muude meetodite puhul

    1. Diagnoos alguses. PCR tuvastab põhjustava toimeaine geneetilise materjali. Immunofluorestsentsanalüüsi abil saab määrata ainult immunoglobuliine - aineid, mis organism tekitab infektsiooni suhtes. C-hepatiidi nakatumise korral võib intervall infektsiooni ja immuunvastuse alguse vahel olla mitu nädalat ja kuud, sel ajal on ELISA ebaefektiivne. PCR annab vastuse esimesel nädalal pärast infektsiooni.

  • Väike vea tõenäosus. Uuritavas materjalis määratakse geneetilise materjali pindala, mis on iseloomulik ainult ühele patogeenide tüübile. See kõrvaldab valed tulemused. Kui ELISA-vead on võimalikud, kuna sama tüüpi antikehi saab erinevate viiruste vastu vabastada - neid antikehi nimetatakse ristantikehadeks.

  • Kõrge tundlikkus. PCR võimaldab tuvastada haigusetekitaja RNA isegi minimaalsetes kogustes. See võimaldab tuvastada varjatud nakkusi.
  • Kuidas valmistuda vereannetamiseks PCR-uuringute jaoks

    C-hepatiidi PCR analüüsiks kogutakse venoosse verega verd. Tavaliselt võetakse patsiendi veeni korraga kaks vere osa: esimene saadetakse PCR-ile ja teine ​​ELISA-ga. Seda tehakse selleks, et täpsemalt hinnata, kui palju patsient on nakatunud viirusega ja kuidas immuunsus selle vastu võideldes.

    Tavaliselt peab patsient järgima järgmisi reegleid:

    • hommikul võetakse vereanalüüs;
    • Viimase toidukordi ja vereannetuse vaheline intervall peaks olema kaheksa kuni kümme tundi;
    • kaks või kolm päeva enne analüüsi on vaja loobuda praetud ja rasvases toidus ja alkoholis;
    • 24 tundi enne analüüsi peaks patsient vältima füüsilist koormust: ärge kandke raskusi, ärge minge jõusaali või basseini.

    Järgmine Artikkel

    C-hepatiit lastel

    Seotud Artiklid Hepatiit